عالية الكثافة تسجيلات EEG من الفئران تتحرك بحرية باستخدام بوليميد المستندة Microelectrode

مرحباً، أنا مينا لي من مختبر Gen Choice في مركز علوم الأعصاب في المعهد الكوري للعلوم والتكنولوجيا. سنقوم اليوم بتوضيح حالة تخطيط الدماغ (EG) عالي الكثافة في نموذج القوارض باستخدام مصفوفة أقطاب كهربائية دقيقة قائمة على البوليمر. تتضمن العملية إعداد الأجهزة، وتحضير الحيوانات للجراحة، وإجراء الجراحة التجسيمية.

بعد الجراحة، سنقوم بتسجيل تخطيط كهربية الدماغ (EEG) ثم تحليل البيانات. لنبدأ الآن. قبل البدء في الجراحة، قم بتجهيز أدوات التثبيت المجسمة وجميع المواد المطلوبة.

يجب أن تكون البيئة نظيفة. قم بتجهيز الفأر للجراحة. سأقوم بتوضيح جراحة اليوم باستخدام فأر هجين من سلالة basic six black six J 1 29 s four S-V-J-A-E يبلغ من العمر 17 أسبوعاً.

يمكننا أيضاً استخدام الفئران التي تزن أكثر من 25 grams. يتم تخدير الفأر عن طريق حقنة في التجويف البريتوني (IP) بمزيج يحتوي على 120 milligram per kilogram من ketamine و 6 milligram per kilogram من xylazine. يتم قرص ذيل الفأر برفق للتأكد من تخدير الفأر بشكل عميق بما يكفي للمضي قدماً في الجراحة.

لبدء الجراحة، قم بتثبيت الحيوان على جهاز التوجيه القُنّي (stereotaxic apparatus). ضع قضبان التثبيت في قناة الفأر واحدة تلو الأخرى وأحكم إغلاقها. ضع بعض الميثانول على رأسه، ثم قم بحلاقة شعر الرأس.

قم بالحقن، ثم إجراء شق طولي من المنطقة الواقعة بين العينين إلى المنطقة الواقعة بين الأذنين والجمجمة. استخدم الملاقط الدقيقة لقرص جلد الفأر وذلك لإبقاء الشق مفتوحاً بشكل واسع. أزل أي أنسجة أو أغشية متبقية من الجمجمة باستخدام مسحات قطنية معقمة.

ضع قلم التحديد فوق الرأس. حدد نقاط BMA lambda. ثم قم بإزالة قلم التحديد وتحديد النقاط باستخدام قلم دقيق قديم.

بالضبط عند النقطة المحددة. أحضر القطب الغشائي فوق الرأس وضع قطرة من الماء T على الجمجمة.

ضع مصفوفة BMA في منتصف الطبقة الخامسة من Ontario الخاصة بمصفوفة الأقطاب الكهربائية الدقيقة poly best. قم بإزالة الغشاء بعناية من الإنسي إلى الوحشي باستخدام مسحات قطنية مبللة بالماء. انتظر بضع دقائق حتى يجف تماماً.

يساعد هذا في تحقيق التصاق أفضل. ضع ثلاث علامات باستخدام قلم قائم على الزيت في المساحة المتبقية. هذه العلامات هي المواضع التي ستقوم بالثقب عندها.

كن حذراً جداً عند حفر الثقوب لتجنب لمس الجزء الداخلي. ضع مسامير التثبيت الثلاثة الموجهة لخطوط التعقيم على الجمجمة وثبتها حتى تصبح محكمة الإغلاق. اخلط كمية كثيفة من الأسمنت السني السائل، وقم بتغطية مسامير القطب الكهربائي الغشائي وبقية الجمجمة.

قم بإعداد دفعة أخرى واستخدمها لتغطية القطب الكهربائي بالكامل. اكشف البراغي مرة أخرى لتثبيته. تذكر أن هذا الرجل لا ينبغي أن يكون تحت قطب الغشاء.

ضع علامة مزدوجة بها شريط لاصق على الجزء الخلفي من مستوى الموصل. قم بتثبيت عصا صلبة كحزام في منتصف الجمجمة باستخدام غراء قوي. في تجربة اليوم، استخدمت طرف مسحة قطع لهذه الخطوة الخاصة بالعصا، وقم بتحريك موضع الموصل للخلف حتى يلامس طرف نقطة القطع.

يجب أن تكون المسافة بين الجمجمة والموصل أكثر من خمسة مليمترات. قم بتثبيت مستوى الموصل على طرف مسحة القطن باستخدام غراء قوي. ثم قم بتغطية بقية المنطقة المفتوحة باستخدام أسمنت الأكريليك.

بعد تصلب الإسمنت، قم بإزالة المشابك وحرك الجلد. أخرج الفأر من القالب وقم بتغطية المساحة الإضافية. باستخدام إسمنت الأسنان الأكريليكي، ضع مضاد حيوي صوديوم أتي حول الإسمنت ومنطقة الغرز الجراحية.

ضع الفأر في قفصه الخاص واتركه لمدة خمسة أيام للتعافي. قم بتوصيل الفأر بجهاز تخطيط كهربية الدماغ (EEG) واتركه لأكثر من ساعة للتأقلم. بعد مرور ساعة، قم بإجراء تسجيل تخطيط كهربية الدماغ؛ حيث قمنا بعملية استحصال تخطيط كهربية الدماغ عالي الكثافة في نموذج فأر باستخدام مصفوفة أقطاب مجهرية قائمة على البوليمر.

عند تنفيذ هذا الإجراء، من المهم تذكر التعامل مع غشاء electro Tri بلطف لأن سمكه سبعة ميكرومتر فقط. أ، من الضروري وضع قطرة من مياه الصنبور عند إعادة ترتيب القطب الكهربائي. إذا تخطيت هذه الخطوة، فقد يلتف القطب الكهربائي بسهولة، لذا تأكد من أن مواد acrylic dentals المصنوعة بلزوجة عالية لا تتسرب تحت الغشاء.

بعد التسجيل، نقوم بإجراء تحليل غير متصل بالإنترنت باستخدام meth lab لرسم عدة رسوم بيانية للدماغ بهدف التصوير الواضح لأنشطة الدماغ في الفئران. هذه هي إشارات EEG متعددة القنوات الممثلة بعد حقن GBL. في اللوحة اليسرى، يمكنك رؤية إشارات e الممثلة متعددة القنوات بعد حقن GBL في اللوحة اليمنى.

يتم عرض خرائط تضاريس الدماغ، مثل متوسط تأخير الوقت للقوة، ومتوسط قوة الذروة، وخريطة متوسط احتمالية بدء النوبة. هذا كل شيء. شكراً للمشاهدة.