الفحص مباشرة للالكمي لتجنب الاجتماعي في ذبابة الفاكهة السوداء

الهدف من هذا الإجراء هو تحديد استجابة الذباب للإشارة الاجتماعية المنبعثة من الأفراد المجهدين. يتم تحقيق ذلك عن طريق جمع الذباب الأول والمستجيب والباعث قبل يومين من التجربة. تتمثل الخطوة الثانية في نقل كل من الذباب الباعث والمستجيب إلى قوارير جديدة قبل ساعتين من التجربة والسماح لها بالتعود على الغرفة الخاضعة للرقابة البيئية حيث سيتم إجراء الفحص.

بعد ذلك ، يتم وضع الذباب المستجيب في TMAs ويتم إعطائه الاختيار بين قارورة تم فيها الضغط على الذباب مسبقا ، وبالتالي تحتوي على رائحة إجهاد ذبابة الفاكهة وقارورة جديدة ، والخطوة الأخيرة هي حساب عدد الذباب المستجيب في القارورة الجديدة في قارورة DSO وفي المصعد لتحديد استجابتهم ل DSO. في النهاية ، يتم استخدام متاهة T لقياس تجنب الذباب لإشارة الإجهاد الاجتماعي ، وتحديدا رائحة الإجهاد gilo. خطرت لي فكرة هذه الطريقة لأول مرة عندما كنت باحث ما بعد الدكتوراه في معهد كاليفورنيا للتكنولوجيا.

في ذلك الوقت ، كان جريج سو ومستشاره لما بعد الدكتوراه ديفيد أندرسون ، متفاعلين في دراسة الخوف أو التجنب الاجتماعي في فيلا ، ولكن لم يكن هناك اختبار حالي لذلك. لقد اقتربوا مني لأنني كنت أقوم بإجراء الكثير من فحوصات السلوك في مختبر S brands وأثناء إجراء تجارب التصوير التاكسي والتعلم الشمي ، لاحظت أن الذباب ينجذب إلى القوارير التي قضى فيها الذباب الآخر بعض الوقت دون إزعاج مع تجنب القوارير التي تعرض فيها الذباب للإجهاد في ذلك الوقت بصدمة كهربائية. أسقف. يعد إثبات هذه الطريقة أمرا بالغ الأهمية لأن العملية التجريبية لمقايسة التجنب الاجتماعي تتطلب بعض الممارسة لتكون سريعة وفعالة في نقل السير دون فقدان أي ذباب أو DSL.

الميزة الرئيسية لهذه التقنية لفحص التفاعلات الاجتماعية على الأساليب الحالية مثل تتبع الفيديو بمساعدة الكمبيوتر ، هي أن هذا اختبار سهل الإتقانه وتنفيذه ، ولكنه قوي جدا لتحديد التجنب الاجتماعي للأفراد المجهدين. لبدء التجربة ، قم بقص لوح بولي إيثيلين مسامي لتغطية صندوق 12.7 سم × 10.2 سم. املأ الصندوق بالثلج المجروش وقم بتغطيته بالصفيحة لإكمال جهاز التخدير البارد ذبابة الفاكهة.

قم بإجراء التجربة على مقعد مغطى بغطاء مقعد أبيض وسبورة بيضاء في المقدمة لضمان ظروف إضاءة متجانسة. بعد ذلك ، قم بإعداد جهاز زملائه في فريق شفاط الذبابة الدوامة ، ومقياس الحرارة ، والمؤقت. قبل يوم إلى يومين من التجربة ، يخدر القولون الذباب.

انقل الذباب بقمع إلى أنبوب سعة 50 مليلتر وضع الأنبوب في دلو ثلج معزول تحت مستوى الجليد. انتظر خمس دقائق حتى يدخل الذباب في غيبوبة باردة. ثم انقل الذباب إلى لوح البولي إيثيلين المسامي في درجة حرارة الغرفة وفرز ذباب المستجيب تحت مجهر استريو.

افصل الذباب الذكور البالغ من العمر ثلاثة إلى سبعة أيام عن إناث الذباب ، وحافظ على هذه الذباب في مجموعة من 40 شخصا يجمع بلطف ذباب باعث كانتون المختلط. باستخدام شفاط الفم اسمح للذباب. ليلة واحدة من التعافي لتقليل أي تأثير مربك للجمع على السلوك.

بعد ذلك ، افتح كيس قوارير الاختبار لاستبدال الهواء ذو الرائحة البلاستيكية التي لا معنى لها في الكيس بالهواء النقي. قبل التجربة ، تأكد من أن درجة حرارة غرفة الاختبار عند 25 درجة مئوية ، وأن الغرفة بها ضوء متساو ، وأن الرطوبة أكبر من 30٪ قبل ساعتين من التجربة ، قم بنقل المستجيب والذباب الباعث إلى قوارير طعام طازجة والسماح للذباب بالتكيف مع البيئة الموجودة على المقعد حيث سيتم إجراء التجربة. ضع متاهة الشاي على وسادة القصف وشد مشبك المسمار بحيث يكون المصعد مستقرا.

بعد ذلك ، انقل ذباب المستجيب إلى قارورة اختبار جديدة وقم بالتقاط القارورة التي تحتوي على ذباب المستجيب فوق متاهة الشاي. ثم قم بإمالة جهاز متاهة الشاي واضغط عليه على حصيرة القصف حتى يسقط ذباب الفاكهة في المصعد. حرك الجزء العلوي من المصعد لأسفل لوضع الذباب بين القسمين العلوي والسفلي من TMAs وتأكد من أن المصعد فوق نقطة الاختيار لمنع الذباب من الهروب أثناء تكيف ذباب المستجيب مع البيئة الجديدة.

ضع الذباب الباعث في قارورة اختبار جديدة وقم بتغطيتها بقطعة من القطن. حرك القارورة على دوامة صغيرة بهذه الطريقة. سوف ينبعث الذباب من DSO ، وينقل الذباب إلى قارورة طعام ويضع القارورة المملوءة ب DSO بسرعة في أحد جانبي الفريق.

بديل جانب التنسيب للقارورة المملوءة ب DSO. في كل جولة جديدة ، ضع قارورة اختبار جديدة على الجانب الآخر من الفريق A ثم قم بإسقاط المصعد بالكامل حتى يتمكن ذباب الفاكهة من الاختيار بين قارورة الاختبار الطازجة والقارورة المملوءة بواحة والديك السيليكون (DSO). ابدأ المؤقت على الفور.

بعد دقيقة واحدة ، حرك المصعد لأعلى لفصل الذباب في القارورة الجديدة وقارورة DSO عن الذباب العالق في المصعد. احسب عدد الذباب في كل قارورة وفي المصعد. كرر هذا.

لكل نمط وراثي و / أو حالة ، لا يؤثر حجم الذباب المستجيب على تجنبهم ل DSO. بعد إجراء التجربة على مجموعة من 10 إلى 80 ذبابة ، لم يظهر اختبار T أي دلالة إحصائية بين مؤشرات الأداء أو مؤشرات الأداء للذباب المستجيب. يؤثر عدد الذباب الباعث على تجنب الذباب من DSO كما هو موضح في هذا الرسم البياني ، والذي يمثل تجارب مختلفة.

باستخدام 10 إلى 160 ذبابة باعث لكل منهما. لا يزال يتم اكتشاف تجنب كبير مع 10 ذباب مجهد فقط. يؤثر الاختيار والوقت والخلفية الجينية لذباب الفاكهة على الاستجابة ل DSO كما يتضح من هذا الرسم البياني ، والذي يوضح استجابة سلالات كانتون وإلوود.

يظهر كلا النمطين الجينيين تجنبا أقوى ل DSO من ولاية أوريغون وبعض سلالات ماركين بعد تطورها. مهدت هذه التقنية الطريق للباحثين في مجال علم الأعصاب لتحديد الدائرة العصبية الكامنة وراء إدراك وتجنب ثاني أكسيد الكربون2 ، أحد مكونات DSO. كما تم استخدامه لدراسة دور الجينات المرشحة للتوحد في التأثير على السلوك الاجتماعي.

في جوزيف أنو جاستر. بمجرد إتقانها ، يمكن تنفيذ هذه التقنية في أقل من خمس دقائق لكل تكرار. بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية إجراء اختبار التجنب الاجتماعي من إعداد الباعث والذباب المستجيب قبل اختبارها إلى إنشاء السير الذاتية الميدانية DSL والتلاعب بزملائك في الفريق لتزويد المستجيبين بخيار ثنائي.