بسيطة والشم اختبار لالفئران بمساعدة الحاسوب

الهدف العام من التجربة التالية هو اختبار التمييز الفطري الشمي أو تفضيل حاسة الشم أو التجنب والحساسية الشمية في الفئران. يتم تحقيق ذلك عن طريق تعريض الفأر لجاذب جديد أو مستأنف ، ورائحة محايدة ، وهي الماء. في هذه الأثناء ، تسجل كاميرا الفيديو الجلسة السلوكية.

بعد ذلك ، يتم تحليل الفيديو في الصورة J باستخدام وحدات الماكرو المتوفرة للحصول على الوقت الذي يقضيه في معلمات الرائحة والماء. أظهرت النتائج تفضيل أو سلوك تجنب الروائح مقارنة بالماء بين الأنماط الجينية المختلفة بناء على التحليل اللاحق بمساعدة الحاسوب. الميزة الرئيسية لاختبار حاسة الشم على استخدام الساحة المخصصة والشم هي أنه يستخدم ساحة مألوفة ، وبالتالي فهو سريع الاكتمال وإعداد بسيط.

بالإضافة إلى ذلك ، فإنه يستخدم أجهزة غير مكلفة توضح أن الإجراء سيكون إيمانويل أبري ، وفقا للطالب في مختبري. في هذه التجربة ، استخدم ذكرا يبلغ من العمر ثلاثة إلى خمسة أشهر ، C 57 أسود ، ستة فئران من النوع البري ، ومعدلة وراثيا. يستخدم هذا العرض خطين بالضربة القاضية وعناصر تحكم في رفيقة القمامة.

بالنسبة للساحات التجريبية ، استخدم أقفاص فأر نظيفة معقمة مع ثلاثة سنتيمترات من الفراش. بعد ذلك ، قم بإعداد إعداد الكاميرا. ضعه على ارتفاع 58 سم فوق أرضية القفص على حامل ثلاثي القوائم مخصص.

ضع بعض العلامات على المنضدة للإشارة إلى المكان الذي يجب أن يكون فيه موضع القفص. بالنسبة للصورة المركزية، اضبط الكاميرا على تسجيل فيديو بدقة 320 × 240 بكسل بمعدل 15 إطارا في الثانية تقريبا. لتحضير الاختبار ، قم بتخزين مركزات من كل رائحة في مذيب كلما أمكن ذلك.

لاختبار التفضيل ، قم بعمل محلول 10٪ من زبدة الفول السوداني بوزن الحجم في زيت الفول السوداني. لاختبار التجنب ، احصل على محلول 98٪ إلى حمض الميثيل الزبد. لاختبار الحساسية ، اجمع بول الأنثى من فأر من نفس السلالة قبل يوم إلى يومين من الاختبار.

كبح جماح الأنثى بطنها فوق شبكة القفص واجمع قطرات من بولها في طبق بلاستيكي. اجمع عينات من عدة إناث للتطبيع. للتباين الفردي ، اسحب جميع العينات في أنبوب سعة 1.5 مليلتر وقم بتخزينها عند درجة حرارة 20 درجة مئوية تحت الصفر.

للبدء في التعود على ، ضع واحدة في قفص نظيف واتركها تستكشف. لمدة خمس دقائق يجب أن تكون بيئة قفص الاختبار مثل بيئة قفص المنزل. كرر مرحلة التعود مرة واحدة في كل يوم اختبار ، عندما تنتهي فترة التعود ، ابدأ التسجيل وقم بتعبئة 60 ميكرولتر من الرائحة اللطيفة.

في هذه الحالة ، زبدة الفول السوداني على جدار واحد على الجدار المقابل ، ماصة نفس الكمية من الماء. رائحة محايدة ، ضع القطرات حوالي 10 سم فوق كل جدار. الآن دع يستكشف لمدة دقيقتين ، ثم أوقف التسجيل وأعد الماوس إلى قفص منزله.

كرر العملية مع كل ماوس ليتم اختباره. استخدام أقفاص اختبار جديدة دائما. بعد إجراء جميع اختبارات التفضيل ، قم بإجراء اختبار التجنب باستخدام قفص اختبار جديد.

لكل ماوس ، قم بإجراء اختبار التجنب. مثل اختبار الجذب ، استبدل الرائحة اللطيفة فقط برائحة التجنب ، وهي حمض الميثيل الزبد. بالنسبة لاختبار الحساسية ، يمكن إعادة استخدام قفص واحد بين التجارب لنفس الماوس.

لذا ضع علامة على الجانب المائي من القفص واستعد لتنظيف الجدران القصيرة بورق مبلل بالإيثانول بنسبة 70٪ بين التجارب. في يوم التجربة ، قم بعمل أربعة تركيزات من البول بسلسلة التخفيف عشرة أضعاف. باستخدام الماء المقطر المزدوج مثل اختبار التجنب ، اعتاد كل على قفص الاختبار لمدة خمس دقائق.

ثم قم بتعريض كل فأر للبول بأعلى تخفيف في البداية ، وهو واحد إلى 10000. أثناء التسجيل ، ضع تخفيف البول على قفص الاختبار وضع الماء على الجدار المقابل. كما هو الحال في الاختبارات الأخرى ، دع يستكشف.

لمدة دقيقتين. بعد ذلك ، انقل إلى قفص فأر نظيف. بعد أن تشهد جميع الحيوانات أقل تركيز ، قم بتنظيف جميع جدران قفص الاختبار وكرر الاختبار على كل فأر باستخدام البول التالي الأكثر تركيزا.

استمر في هذه العملية حتى يتم اختبار البول النقي. بعد جمع جميع البيانات الخاصة بالتجربة ، افتح مقاطع الفيديو في الصورة J لتعديلها ومعالجتها والتي يتم توفير تفاصيل في بروتوكول النص باستخدام البروتوكولات الموصوفة. خطان مختلفان بالضربة القاضية.

تمت مقارنة المجموعتين B و C بمجموعة التحكم A.A اختبار T غير الاتجاهي للطالب مع تباين متساو أو غير متساو يقارن الوقت الذي يقضيه بين الرائحة والماء داخل الأنماط الجينية. قارن السلوك بين الأنماط الجينية باستخدام inova أحادي الاتجاه. أظهرت كلتا المجموعتين التجريبيتين ، B و C ، عدم تفضيل الرائحة الجذابة في اختبار التجنب ، كانت الاستجابة تجاه رائحة حمض الميثيل الزبد المثيرة للاشمئزاز كما هو متوقع للمجموعتين A و B ، لكن المجموعة C لم تظهر أي سلوك تجنب لهذه الرائحة.

في اختبار الحساسية ، تم الحصول على عتبة الجذب عن طريق طرح الوقت الذي يقضيه مع البول من الوقت الذي يقضيه مع الماء ، وهو البول المفضل للماء عند تخفيف واحد إلى 1000. في حين أن كلتا المجموعتين التجريبيتين ، احتاجت B و C إلى تركيز أكبر بمقدار 100 ضعف لإظهار التفضيل. بمجرد إتقان ، يمكن إجراء هذه التقنية في غضون ساعتين إذا تم إجراؤها بشكل صحيح ، ثم باتباع هذا الإجراء ، يمكن إجراء طرق أخرى مثل التعلم الشمي والانقراض للتحقيق في اللدونة الشمية والتعلم.