ديسمبر 2, 2015
بروتوكول الإجهاد الخفيف المزمن (UCMS) الذي لا يمكن التنبؤ به هو طريقة تم التحقق من صحتها لدراسة التغيرات السلوكية والفسيولوجية المرتبطة بالإجهاد المزمن وأعراض الاكتئاب. ثمانية أسابيع من فرض بروتوكول UCMS تؤدي إلى تغييرات سلوكية ونتائج صحية سيئة في القوارض من كلا الجنسين.
الهدف العام من التجربة التالية هو تعريض سلالة القوارض لسلسلة من الضغوطات المزمنة التي لا يمكن التنبؤ بها والتي يتم تحديدها عشوائيا ، بحيث لا يمكن للحيوان التعويض بشكل فعال في ظل شدة متزايدة من أعراض الاكتئاب. يتم تحقيق ذلك من خلال التعرض اليومي لأحد قائمة المحفزات المحتملة المصممة لتكون مرهقة ولكنها ليست ضارة أو ضارة بالحيوان. تتعرض لضغوط من خمسة إلى ستة أيام في الأسبوع لمدة ثمانية أسابيع على فترات منتظمة ، ويتم مراقبة لتطور أعراض الاكتئاب من خلال تقييم حالة الكود واستجابات لفرض المحفزات ، مثل اختبار رش السكروز.
تظهر النتائج أن فرض ضغوطات عشوائية مزمنة غير قابلة للحل على بيئة يمنع قدرة على التكيف ويسبب تطور أعراض الاكتئاب على مدار عدة أسابيع. يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على الأسئلة الرئيسية في مجال الأمراض المزمنة ، مثل كيف يمكن أن تؤدي أعراض الاكتئاب المزمن إلى نتائج صحية سلبية في الأنسجة أو أجهزة الأعضاء الأخرى. خطرت لنا فكرة استخدام هذه الطريقة لأول مرة عندما علمنا بالعلاقات المصاحبة العميقة بين أمراض القلب والأوعية الدموية المتقدمة ومخاطر الإصابة بالأمراض في سكاننا السريريين ، والعرض المتزامن لأمراض الاكتئاب العميقة أيضا.
سيظهر هذا الإجراء طلاب الدكتوراه السيد ستيفن بروكس والسيدة كايلا برانون من مختبراتنا. من أجل إنتاج فئران منزلية خفيفة الإجهاد في أقفاص منفصلة وتعريض الفئران لواحد أو اثنين من الضغوطات يوميا لمدة لا تقل عن ثلاث إلى أربع ساعات لكل ضغط ، يجب إجراء قائمة الضغوطات التالية وفقا لجدول زمني عشوائي لضغط الفراش الرطب. بلل الفراش عن طريق سكب 10 إلى 20 أونصة من الماء النظيف في قفص قياسي.
احتفظ بالماوس في قفص رطب لمدة ثلاث إلى أربع ساعات. قم بإزالة الفراش من القفص لمدة ثلاث إلى أربع ساعات وبعد ذلك قم بتحويل الماوس إلى ضغط آخر يتطلب قفصا فارغا ، أو ضعه في قفص نظيف به فراش جديد. قم بإمالة الأقفاص الخالية من الفراش إلى حوالي 45 درجة لمدة ثلاث إلى أربع ساعات باستخدام جسم قوي سيبقى في مكانه بينما يتحرك الماوس في القفص بالنسبة لهذا الضغط ، قم بتغيير الضوء العادي لمدة 12 ساعة ، و 12 ساعة من الدورات المظلمة إلى فترات متتالية مدتها 30 دقيقة ، تستمر ما مجموعه ثماني ساعات.
انقل الماوس من قفص منزله إلى قفص فأر مجاور تمت إزالته لمدة ثلاث ساعات. قم بإزالة الفراش من القفص وأضف الماء إلى عمق حوالي 0.25 بوصة للفئران ، واترك الماوس لمدة أربع ساعات تقريبا. باختصار ، جفف الماوس بمنشفة ناعمة في ختام التعرض للماء.
قم بتعريض الفئران للحيوانات المفترسة أو الروائح أو الأصوات عن طريق إضافة خصلات موزعة عشوائيا أو 10 إلى 20 مل من البول من أنواع الحيوانات المفترسة الطبيعية في القفص ، واترك الفأر لمدة ثلاث إلى أربع ساعات. بدلا من ذلك ، قم بتشغيل أصوات الهدير أو المفترسة من أنواع المفترسة الطبيعية بالقرب من الأقفاص لمدة ثلاث ساعات في نهاية كل فترة إجهاد يومية. ضع الفئران في أقفاص نظيفة وأعدها إلى منشأة الإسكان يوميا.
افحص كل بحثا عن تطور الجروح أو القروح التي قد تتطلب علاجا بيطريا مرة واحدة في الأسبوع ، وقم بتدريب اثنين من المحققين على تقييم الاستمالة بالأكواد افحص كل وقم بتعيين درجة رمز أسبوعية على مقياس من صفر إلى واحد. أضف كل درجة فردية عن طريق تعيين درجات فردية من الصفر بمعنى نظيف أو معنى واحد قذر لكل منطقة من مناطق الجسم الثماني.
الرأس والرقبة والمعطف الظهري والمعطف البطني والذيل والأطراف الأربعة والأطراف الخلفية والمنطقة التناسلية. ضع في قفص نظيف مبطن بقطعة قطن أو منشفة لمنع الفراش من الالتصاق بمعطفه. ثم رش محلول سكروز بنسبة 10٪ على الرأس والطبقة الظهرية لكل وسجل سلوك الحلاقة الكلي لمدة خمس دقائق.
قم بقياس زمن انتقال وتواتر نشاط العناية بالوجه خلال هذا الوقت. الكمون هو مقدار الوقت بين الرش الأول وبدء العناية بالوجه ، ويجب قياس التردد على أنه عدد المرات التي يتم فيها تنظيف الوجه. بعد ثمانية أسابيع من الإجهاد الخفيف المزمن الذي لا يمكن التنبؤ به ، كانت هناك تغييرات كبيرة في كل من النتائج السلوكية والفسيولوجية في القوارض المجهدة بشكل مزمن بالنسبة لسلالات التحكم غير المجهدة.
أصيبت الفئران بأعراض تشبه الاكتئاب بعد إجهاد خفيف مزمن لا يمكن التنبؤ به ، وأظهرت انخفاضا تدريجيا في درجات العناية بالمعطف. يشير هذا التدهور الملحوظ في الحالة الجسدية للمعطف إلى انخفاض نشاط الاستمالة وقد يتوازى مع نقص الدافع. أشارت الأدلة الحديثة إلى وجود اختلاف كمي كبير في الاستجابات للإجهاد الخفيف المزمن الذي لا يمكن التنبؤ به بين ذكور وإناث الفئران.
على وجه التحديد ، تشير البيانات إلى أن إناث الفئران التي تعرضت لبروتوكول الإجهاد المتطابق مع الذكور المطابقة للعمر تطور استجابات سلوكية أكثر حدة للبروتوكول من الذكور. بعد هذا الإجراء ، يمكن تنفيذ طرق أخرى مناسبة لوظيفة معينة للعضو بسهولة من أجل الإجابة على أسئلة إضافية مثل كيف يمكن أن يؤثر وجود أعراض الاكتئاب المزمنة على الوظيفة الطبيعية في نظام الأعضاء المعنية. بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية الاستفادة من الخطوات والإجراءات المختلفة في بروتوكول UCMS لخلق ظروف متزايدة أعراض الاكتئاب بشكل تدريجي في نموذج القوارض الخاص بك.
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية
يُعد بروتوكول الإجهاد المزمن الخفيف غير المتوقع (UCMS) طريقة معتمدة لدراسة التغيرات السلوكية والفسيولوجية المرتبطة بالإجهاد المزمن وأعراض الاكتئاب. تقوم هذه الدراسة بتعريض القوارض لسلسلة من مسببات الإجهاد المزمنة وغير المتوقعة على مدار ثمانية أسابيع، مما يؤدي إلى ظهور أعراض اكتئابية.
يوفر بروتوكول الإجهاد الخفيف غير المتوقع المزمن (UCMS) نموذجاً للقوارض ذا صلة ترجمية لتقييم العواقب السلوكية والفسيولوجية للتعرض للإجهاد المزمن، والذي يعد عامل خطر رئيسي للاكتئاب السريري. ومن خلال تحفيز أعراض شبيهة بالاكتئاب ونتائج صحية مرتبطة بها مثل فرط كورتيزول الدم وارتفاع ضغط الدم، يدعم هذا النموذج تقليل المخاطر الآلية في مراحل الاكتشاف المبكرة للعلاجات التي تستهدف الجهاز العصبي المركزي. كما يتيح التقييم قبل السريري للتدخلات المحتملة، بما في ذلك فعالية مثبطات استرداد السيروتونين الانتقائية (SSRI) المزمنة، مما يساهم في اتخاذ قرارات المضي قدماً أو التوقف في مسارات تطوير مضادات الاكتئاب.
يتناسب بروتوكول UCMS مع تسلسل عمليات الاكتشاف، بدءاً من التحقق من الهدف، مروراً بتحديد المركبات الرائدة، وصولاً إلى اختبارات الفعالية قبل السريرية، لا سيما في برامج اضطرابات الجهاز العصبي المركزي والاضطرابات النفسية الجسدية. كما يتيح هذا البروتوكول استقصاء الآليات المرتبطة بالإجهاد بناءً على فرضيات محددة قبل البدء في عملية فحص المركبات.