منهج في تقييم فعالية المبيدات الحشرية ضد سرير علة، البق الفراشي والبيض والأطوار الأولى
مارس 15, 2017
وكثيرا ما تستهدف تقييم المبيدات الحشرية ضد الحشرات البالغة، بدلا من المراحل غير ناضجة. هنا، نقدم بروتوكول لتقييم المبيدات الحشرية ضد البيض بق الفراش مع مقارنة لأول الحورية مرحلة بق الفراش. يمكن تعديل هذه البروتوكولات للحشرات أخرى لتقييم فعالية المبيدات الحشرية في مراحل الحياة غير البالغين.
الهدف العام من هذه التجربة هو تقييم فعالية المبيدات الحشرية في قتل بيض بق الفراش والأطوار الأولى. يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على الأسئلة الرئيسية في مجال علم الحشرات ، مثل تأثيرات المقايسات السمية على بيض بق الفراش والحوريات الصغيرة. الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أنها مصممة لعلاج مرحلة حياة الحشرات الصعبة بالمبيدات الحشرية ، وخاصة مرحلة البيض.
لبدء التجربة ، اسحب خمسة إلى 10 إناث بق الفراش البالغة المتزاوجة جيدا من مستعمرة وضع الإناث في طبق بتري بورق ترشيح. قم بإعداد 10 مكررات للتأكد من وجود بيض كاف لفحص المبيدات الحشرية. تحقق من الأطباق كل يوم لمعرفة ما إذا كانت الإناث قد وضعت البيض.
بمجرد أن تضع الإناث البيض ، أخرج الإناث من طبق بتري وضعها في أطباق بتري جديدة بورق ترشيح جديد يوميا. سجل البيانات على أطباق بتري القديمة والجديدة. اترك البيض يتقدم في العمر من أربعة إلى خمسة أيام قبل بدء الفحص.
بمجرد أن يتقدم البيض في العمر بشكل مناسب ، قم بإزالة بيض بق الفراش برفق من أوراق الترشيح باستخدام ملقط ناعم الرؤوس. اكشط قاع البيضة المرفقة بورق الترشيح برفق باستخدام الملقط ثم أمسك البيضة برفق دون الضغط الشديد لتجنب رمي بيض بق الفراش. ضع بيض بق الفراش الذي تمت إزالته في مجموعاته داخل أطباق بتري البلاستيكية.
افركي الجزء السفلي من كل طبق بتري من الخارج بورقة منعم للأقمشة للحد من الكهرباء الساكنة من قذف بيض بق الفراش. بعد ذلك ، قم بإعداد تخفيفات متسلسلة من المبيدات الحشرية للحصول على مجموعة من خمسة تركيزات مختلفة ومحلول تحكم بماء الصنبور فقط لكل منها بحجم 20 مل. خذ 50 مل من أنابيب الطرد المركزي مقطوعة مسبقا عند خط مل ثم قم بتقطيع شبكة دقيقة إلى مربعات كبيرة بما يكفي لتناسب الغطاء.
قم بربط الشبكة بإحكام ، مما يزيل أي نتوءات في أنابيب الطرد المركزي باستخدام غطاء أنبوب الطرد المركزي. بعد ذلك ، باستخدام فرشاة الرسم ، ضع مجموعة من بيض بق الفراش على الشبكة داخل أنبوب الطرد المركزي. اغمس مجموعة بيض بق الفراش داخل أنبوب الطرد المركزي المقطوع في تركيز مبيد حشري لمدة خمس ثوان.
قم بإزالة أنبوب الطرد المركزي من محلول المبيد الحشري. ضع أنبوب الطرد المركزي مباشرة على أنسجة المخاض لتجفيف الشبكة مع البيض بداخلها. بعد التجفيف ، قم بإزالة مجموعة البيض من أنبوب الطرد المركزي باستخدام فرشاة طلاء صغيرة ذات شعيرات ناعمة وضعها في طبق بتري نظيف بورق ترشيح نظيف.
سجل معدل نفوق البيض لمدة 14 يوما للتأكد من أن جميع البيض قد حان الوقت الكافي للفقس. تصحيح الوفيات في العلاج الضابط باستخدام صيغة أبوت. أدخل معدل الوفيات المسجل بالتركيزات المقابلة في برنامج التحليل لحساب قيم LC50.
افصل مجموعة من خمسة ذكور بالغين وخمس إناث بالغات تم إطعامهم في اليوم السابق وضعهم في طبق بتري بورق ترشيح. اسمح لبق الفراش البالغ بالتزاوج ووضع البيض لمدة ثمانية أيام. بعد ذلك ، قم بإزالة البالغين من أطباق بتري واترك البيض يفقس في الأطوار الأولى داخل أطباق بتري.
اجمع الأطوار الأولى غير المغذية من نفس العمر باستخدام فرشاة الرسم ، ثم ضعها في أطباق بتري نظيفة جديدة حتى فحص المبيدات الحشرية. Pipet 150 ميكرولتر من كل من المخففات الخمسة المعدة السابقة من المبيدات الحشرية والماء للمجموعة الضابطة على أوراق ترشيح فردية. قم بتوزيع المبيد الحشري بالتساوي عن طريق وضع قطرات حول حافة ووسط ورق الترشيح بالكامل.
ضع أوراق الترشيح المعالجة بشكل فردي فوق الألواح الصلبة الفردية. حرر مجموعات من الأطوار الأولى على أوراق الترشيح الفردية وهي لا تزال مبللة بالمبيدات الحشرية وقم بتغطية الأطوار الأولى بقاع طبق بتري مقلوب وضع وزنا فوق طبق بتري لمنع بق الفراش الأول من الهروب. سجل نفوق بق الفراش الأول بعد 24 ساعة من التعرض لجميع تركيزات المبيدات الحشرية.
تصحيح الوفيات في العلاج الضابط باستخدام صيغة أبوت. أدخل معدل الوفيات والتركيزات المسجلة في برنامج التحليل لحساب قيم LC50. زادت النسبة المئوية للاستجابة أو الوفيات لبيض بق الفراش من سلالة هارلين إلى خمسة تركيزات مختلفة من ميتوكلوبريد بيتا سيفلوثرين مع زيادة الجرعة.
وصلت الوفيات إلى 100٪ عند أعلى تركيز تم اختباره. بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن يكون لديك فهم أفضل لكيفية تقييم فعالية المبيدات الحشرية ضد بيض بق الفراش والأطوار الأولى.
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية
نظرة عامة
تقدم هذه الدراسة بروتوكولاً لتقييم فعالية المبيدات الحشرية ضد بيوض بق الفراش والحوريات في طورها الأول. تهدف هذه الطريقة إلى معالجة التحديات المتعلقة بتقييم كفاءة المبيدات الحشرية في المراحل العمرية غير البالغة، والتي غالباً ما يتم إغفالها في التقييمات التقليدية.
المكونات الرئيسية للدراسة
المجال العلمي
- علم الحشرات
- فعالية المبيدات الحشرية
- مراحل حياة الحشرة
خلفية علمية
- تركز تقييمات مبيدات الحشرات عادةً على الحشرات البالغة.
- تعد المراحل غير البالغة، مثل البيض والحوريات، حاسمة في مكافحة الآفات.
- إن فهم تأثيرات مبيدات الحشرات على هذه المراحل يمكن أن يحسن استراتيجيات إدارة الآفات.
- توفر هذه الدراسة طريقة مخصصة لتقييم مبيدات الحشرات على بيض بق الفراش.
الغرض من الدراسة
- لتقييم فعالية المبيدات الحشرية على بيوض بق الفراش والحوريات في طورها الأول.
- لتطوير بروتوكول يمكن تطويعه لأنواع أخرى من الحشرات.
- لتعزيز المعرفة في مجال علم الحشرات فيما يتعلق بتأثيرات المبيدات الحشرية على المراحل غير البالغة.
الطرق المستخدمة
- اجمع من 5 إلى 10 إناث بالغة من بق الفراش متزاوجة ومغذاة جيداً.
- ضع الإناث في أطباق بتري تحتوي على ورق ترشيح.
- جهز 10 مكررات لضمان إنتاج كمية كافية من البيض.
- راقب الأطباق يومياً للتأكد من وضع البيض.
النتائج الرئيسية
- يُقيّم هذا البروتوكول بنجاح فعالية مبيدات الحشرات على بيوض بق الفراش.
- تم تقييم اليرقات في طورها الأول أيضاً لمقارنة مدى القابلية للتأثر.
- تشير النتائج إلى أهمية استهداف المراحل غير البالغة في مكافحة الآفات.
- يمكن تكييف هذه الطريقة لتشمل أنواعاً أخرى من الحشرات.
الاستنتاجات
- يعد تقييم المبيدات الحشرية على المراحل غير البالغة أمراً بالغ الأهمية للإدارة الفعالة للآفات.
- توفر هذه الدراسة بروتوكولاً قيماً للأبحاث المستقبلية.
- هناك حاجة إلى إجراء المزيد من الدراسات لاستكشاف الآثار المترتبة على آفات حشرية أخرى.
الأسئلة الشائعة
الأهمية الصناعية التنفيذية
يعد تقييم فعالية المبيدات الحشرية عبر جميع المراحل العمرية، بما في ذلك البيض والأعمار اليرقية المبكرة، أمراً بالغ الأهمية لاستراتيجيات مكافحة الآفات الشاملة في مجالات البحث والتطوير في الصناعات الدوائية الحيوية والصحة العامة. تتيح هذه الطريقة إجراء تقييم كمي للتأثير السمي على المراحل غير البالغة من بق الفراش، مما يدعم التحقق من الأهداف والحد من المخاطر الميكانيكية في برامج مكافحة النواقل. ومن خلال توليد بيانات الاستجابة للتركيز وقيم LC50 للمراحل العمرية غير البالغة، يعزز هذا النهج الثقة التنبؤية في مراحل الاكتشاف المبكرة وتحديد أولويات المحفظة للمركبات المبيدة للحشرات المبتكرة.
التطبيقات الاستراتيجية في البحث والتطوير في مجال الأدوية الحيوية
الاكتشاف المبكر والتحقق من الهدف
- القيمة العلمية: تتيح استقصاء آليات إبادة الحشرات عبر المراحل العمرية الحساسة، مما يوضح مدى التفاعل مع الهدف في البيوض والأعمار اليرقية الأولى.
- القيمة التشغيلية: تدعم الحد من المخاطر البيولوجية من خلال تأكيد الفعالية في الحالات التي قد تفشل فيها المقاييس التقليدية التي تركز على البالغين.
- القيمة التنبؤية: تعزز الثقة في الهدف من خلال تحديد ملف الفعالية الخاص بكل مرحلة عمرية، مما يوجه قرارات الاستمرار أو التوقف في عملية تحديد المركبات الواعدة.
الفحص وتطوير المقايسة
- القيمة العلمية: إنتاج منحنيات استجابة للتركيز معيارية وقابلة للتكرار لتقدير LC50 في بيوض بق الفراش وأطوارها اليرقية الأولى.
- القيمة التشغيلية: تتيح تحضير تخفيفات المبيدات الحشرية وبروتوكولات التعريض عالية الإنتاجية والقابلة للتوسع باستخدام اختبارات الغمر والملامسة.
- جاهزية المقايسة: توليد مخرجات كمية لمعدلات النفوق مناسبة لفحص المركبات وتحليل العلاقة بين البنية والنشاط.
الأبحاث الترجمية وما قبل السريرية
- القيمة العلمية: يدعم نمذجة الأنظمة ذات الصلة بالأمراض من خلال تقييم الفعالية في المراحل المبكرة من الحياة التي تساهم في مرونة الجمهرة.
- القيمة التشغيلية: يضمن الاستمرارية الانتقالية من مرحلة الاكتشاف وصولاً إلى التحقق قبل السريري من خلال رصد القابلية للإصابة على مدار دورة الحياة الكاملة.
- التقدم المعدل حسب المخاطر: يوجه قرارات المضي قدماً أو التوقف في المرحلة قبل السريرية عبر الكشف عن أنماط المقاومة أو التحمل الخاصة بمراحل معينة.
تكامل سير العمل والمسارات التحليلية
تتكامل هذه الطريقة ضمن سلسلة عمليات الاكتشاف، بدءاً من التحقق الأولي من الأهداف وصولاً إلى تحديد المركبات الرائدة والتقييم قبل السريري، لا سيما في مجال مكافحة النواقل وتطوير المبيدات الحشرية الموجهة للصحة العامة.
- بيولوجيا الاكتشاف: تدعم اختبار الفرضيات الخاصة بآليات إبادة الحشرات من خلال تمكين تقييم الفعالية في مراحل الحياة غير البالغة التي غالباً ما يتم إغفالها في عمليات الفحص القياسية.
- الفحص: تضمن جاهزية المقايسات من خلال بروتوكولات الغمر والتلامس الموحدة التي تعطي بيانات وفيات كمية وقابلة للتكرار.
- التحليلات: توفر حسابات LC50 ونمذجة الاستجابة للتركيز التي تتيح المقارنة بين المركبات وتصنيف القوة.
- الأبحاث الانتقالية: تربط النتائج في المراحل المبكرة بالاستمرارية قبل السريرية من خلال معالجة الفعالية عبر دورة حياة بق الفراش، وهو عامل رئيسي في إدارة المقاومة.
- إعادة الاستخدام المؤسسي: تؤسس منصة قابلة لإعادة الاستخدام لتقييم المركبات المبيدة للحشرات المبتكرة ضد مراحل الحياة التي يصعب علاجها، مما يقلل من تكرار تطوير المقايسات.
التأثير التشغيلي والمؤسسي
- القيمة العلمية: تزيد من الثقة التنبؤية من خلال الكشف عن القابلية للتأثر الخاصة بكل مرحلة، وتقليل الغموض الميكانيكي في عمل المبيدات الحشرية.
- القيمة التشغيلية: توفر بروتوكولات قياسية وقابلة للتكرار لاختبارات البيض والطور اليرقي الأول، مما يقلل من التباين بين المختبرات.
- القيمة الاستراتيجية: تحسن كفاءة رأس المال من خلال تمكين الحد من المخاطر مبكراً للمركبات التي تفشل ضد المراحل غير البالغة، مما يمنع الفشل في المراحل المتأخرة.
- التأثير على المحفظة: تدعم تحديد الأولويات المعدلة وفقاً للمخاطر عن طريق تحديد المركبات ذات النشاط الواسع عبر دورة الحياة، مما يعزز قرارات التطوير.
اعتبارات التنفيذ
- يتطلب خبرة في التعامل مع الحشرات، وتربيتها، والمعالجة الدقيقة للبيوض والأطوار اليرقية المبكرة.
- يعتمد على الدقة في تحضير التخفيفات، وتوقيت التعرض، والضوابط البيئية لضمان صحة الاختبار.
- يستلزم تقييماً معيارياً لمعدلات الوفيات وتصحيحها باستخدام صيغة Abbott للتحليل المعدل بناءً على مجموعة الضبط.
- يتضمن اعتبارات التكيف عند تعميم البروتوكول على أنواع أخرى من الحشرات التي تختلف في مورفولوجيا البيض أو سلوك الأطوار اليرقية.
- تشمل القيود العملية الطبيعة الشاقة لعمليات جمع البيض وتعتيقه والتعامل الفردي معه، مما قد يحد من الإنتاجية في غياب الأتمتة.
