طريقة موحدة لقياس المساحة الداخلية الرئة السطحية عن طريق استئصال رئوي الماوس وزرع الاصطناعية

الهدف العام من هذا الإجراء هو قياس مساحة السطح الداخلية لرئة الفأر بدقة بعد استئصال الالتهاب الرئوي وزرع الأطراف الاصطناعية. تساعد هذه الطريقة في تحليل الوظائف المورفولوجية والفسيولوجية للرئة في تجديد الرئة البالغة الناجم عن القوة الميكانيكية. تتمثل الميزة الرئيسية لهذه التقنية في تحديد مساحة سطح الرئة الداخلية بدقة ، والتي تعد بزيادة موثوقية وقابلية تكرار حالة وظائف الرئة.

جهز الفأر للجراحة على منصة التنبيب مع إمكانية الوصول إلى جانبها البطني. ثم اسحب اللسان وافحص الحبال الصوتية بمنظار الحنجرة الحيواني الصغير المتوافق مع القسطرة التوجيهية. ثم أدخل قنية التنبيب الوريدي عيار 20 برفق في القصبة الهوائية بزاوية داخلية.

بعد ذلك ، ضع الماوس في وضع الاستلقاء الجانبي الأيمن وقم بتوصيل القنية بجهاز التنفس الصناعي. راقب الصدر للحكم على إدخال القناة في القصبة الهوائية. اضبط ضغط الشهيق على 12 سم من الماء واضبط معدل التنفس على 120 نفسا في الدقيقة.

الآن ، نظف الجلد المكشوف بثلاثة مقشرات متناوبة على الأقل من البيتادين و 70٪ من الإيثانول. ثم ابدأ الجراحة بشق بضع الصدر الخلفي الوحشي من سنتيمترين إلى ثلاثة سنتيمترات في الفضاء الوربي الخامس. اخترق العضلات باستخدام مقص نويز الربيعي.

بعد ذلك ، قم بعمل شق 1.5 سم لكشف الرئة اليسرى. حسب الحاجة طوال الجراحة ، استخدم الكي بدرجة حرارة عالية لوقف النزيف. بعد ذلك ، ارفع 1/3 من فص الرئة الأيسر من الصدر باستخدام ملقط حاد ، واستخدم قطعة قطن لسحب الرئة اليسرى بالكامل.

الآن ، حدد الشريان الرئوي والشعب الهوائية في فص الرئة الأيسر ، وقم بربط القصبات الهوائية والأوعية الدموية بإحكام في النقير بخياطة جراحية مبللة. بعد ذلك ، قم بقطع فص الرئة الأيسر من ثلاثة إلى أربعة ملليمترات من الربط ، مع الحرص على عدم قطع الخيط ، مما قد يؤدي إلى استرواح الصدر. بعد ذلك ، أغلق جدار الصدر بخياطة واحدة.

بعد ذلك ، قم بخياطة طبقة العضلات وطبقة الجلد بالتتابع ، باستخدام خمس إلى ست خيوط متقطعة مع فجوات من ثلاثة إلى أربعة ملليمترات. تأكد من إبقاء إبرة الخياطة الجراحية بعيدا عن القلب. البزل القلبي قاتل.

أخيرا ، قم بتطهير المنطقة الجراحية باستخدام بوفيدون اليود. ثم ضع الماوس على وسادة حرارية 38 درجة مئوية. استمر في استخدام جهاز التنفس الصناعي حتى يعود التنفس التلقائي.

قم بإجراء العملية الموصوفة سابقا ، ولكن بعد إزالة الرئة مباشرة ، استعد لإدخال الطرف الاصطناعي. باستخدام ملقط ضعيف ، أمسك مركز بدلة السيليكون الإهليلجي. بعد ذلك ، أثناء إمساك الضلع بالملقط لفضح التجويف الصدري ، أدخل الطرف الاصطناعي برفق شديد.

أدخل بزاوية 45 درجة بين المستوى الأمامي للطرف الاصطناعي والسطح الصدري. باستخدام ملقط غير حاد ، تأكد من أن الطرف الاصطناعي داخل التجويف الصدري الفارغ الأيسر. الآن ، أغلق الصندوق وراقب الماوس كما هو موضح سابقا.

في هذا الإجراء ، قم بتجميع أنبوب نفخ مخصص يتكون من مكبس تمت إزالته من ماصة مصلية سعة 10 مليلتر ، وأنبوب مرن بطول 40 سم مع محول إبرة ، وصمام تحكم في معدل التدفق ، وإبرة قياس 18. بمجرد تجميعها ، قم بتثبيت الماصة في خزانة جانبية بشريط لاصق. يجب ألا تقل المسافة بين الجزء العلوي من الماصة والمقعد عن 30 سم.

بعد القتل الرحيم للفأر عن طريق حقن التخدير ، قم بتثبيته على لوح معقم وافتح الصدر بعناية لقطع القص وفضح فصوص الرئة. ثم كشف القصبة الهوائية. بعد ذلك ، املأ أنبوب النفخ بنسبة 4٪ PFA الطازج وقم بإزالة جميع الفقاعات من الأنبوب.

ثم أدخل الإبرة في القصبة الهوائية. لتجنب التسرب ، قم بقص القصبة الهوائية بمشابك الأوعية الدموية. الآن ، قم بتضخيم الرئة بمثبت عند ضغط رئوي ثابت يبلغ 25 سم من الماء.

احتضان الرئتين في درجة حرارة الغرفة لمدة ساعتين للتمدد الكامل. بعد التضخم ، لاحظ إزاحة حجم التثبيت. الآن ، قم بربط القصبة الهوائية وتشريح الرئتين سليمتين برفق من الأنسجة الضامة المحيطة.

استخدم المقص وكن لطيفا جدا. بعد ذلك ، احتضان الرئتين في أنبوب مخروطي سعة 50 مليلتر مملوء بنسبة 4٪ PFA لمدة 12 ساعة عند أربع درجات مئوية مع رج لطيف على شاكر. ثم تابع المعالجة والتلوين كما هو موضح في بروتوكول النص.

لتحديد كمية MLI ، استخدم صور العامل المستخدم في الأقسام التي تم جمعها تحت المجال الساطع بتكبير 20x. من بين ثلاثة أقسام مختلفة للرئة ، حدد بشكل عشوائي ما مجموعه 15 عرضا غير متداخلة ، كل منها حوالي ملليمتر مربع واحد ، ثم قم بالتنفيس عنها. استخدم فقط المناطق الخالية من الشرايين والأوردة أو الشعب الهوائية الرئيسية أو القنوات السنخية.

للتحليل، ارسم شبكة 10 × 10 فوق كل منطقة محددة باستخدام أداة المسطرة. وبالتالي فإن خطوط الشبكة على بعد حوالي 100 ميكرون. بعد ذلك ، للعثور على تقاطع على طول الخط كطول بين ظهارتين سنخيتين متجاورتين.

على سبيل المثال ، توضح الأسهم ذات الرأسين الأطوال. احسب كل هذه الأطوال على طول كل خط شبكة، ويعد MLI هو متوسط قيمة أطوال الاعتراض. باستخدام البروتوكولات الموصوفة ، تمت مقارنة الفئران المعالجة ب PNX مع الفئران المزروعة الاصطناعية.

كانت الفئران المستخدمة من ذكور CD-1 البالغين من العمر ثمانية أسابيع ، وتم استئصال فصوص الرئة اليسرى. يحاكي الطرف الاصطناعي حجم وشكل فص الرئة الأيسر ويتم إدخاله في الصدر بعد إزالة فص الرئة الأيسر. بعد 14 يوما من الجراحة ، تم استخدام أنبوب نفخ مخصص لتحديد الحجم الداخلي للرئة اليمنى المتبقية.

كان متوسط حجم الرئة اليمنى في الفئران الخمسة المعالجة ب PNX حوالي 1.4 مليلتر ، وهو أكبر بكثير ، 1.05 مل للفئران الخمسة المزروعة بأطراف اصطناعية. كانت قيم MLI في الرئتين اليمنتين المتبقيات أكبر بكثير أيضا. باستخدام هذه المعلمات ، تم حساب مساحة سطح الرئة الداخلية ووجد أنها أصغر بكثير في الفئران المزروعة بأطراف اصطناعية.

بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية حساب مساحة سطح الرئة الداخلية لنموذج فأر التجديد السنخي الناجم عن القوة الميكانيكية.