أكتوبر 24, 2017
الفئران تستخدم على نطاق واسع لدراسة البيولوجيا الحملي. ومع ذلك، مطلوب إنهاء الحمل لمثل هذه الدراسات التي تستبعد التحقيقات الطولي ويتطلب استخدام عدد كبير من الحيوانات. ولذلك، يصف لنا تقنية غير الغازية للموجات فوق الصوتية عالية التردد للكشف المبكر والرصد لغرس ما بعد أحداث الماوس الحوامل.
الهدف العام من إجراء التصوير بالموجات فوق الصوتية هذا هو الكشف عن الحمل المبكر في الفأر ومراقبته وتوصيفه. يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على أسئلة رئيسية في مجال بيولوجيا التكاثر لدى الفئران، وتحديد نمو الحمول المبكرة في الفئران وتطورها وقابليتها للحياة. وتتمثل الميزة الرئيسية لهذه التقنية في إمكانية توصيف هذه الحمول وتحديد نمطها الظاهري داخل الجسم (in vivo)، دون مقاطعة الحمل لدى الفأر، مما يسمح بجمع البيانات بشكل طولي.
بشكل عام، قد يواجه الأشخاص المبتدئون في هذه الطريقة صعوبة في الحصول على جميع الصور في مستوى واحد، وذلك بسبب الحركات التدريجية الصغيرة والضرورية لمسبار الموجات فوق الصوتية. ابدأ بتجهيز جهاز الموجات فوق الصوتية.
قم بتشغيل المحول ثم قم بتوصيل منصة المحرك ثلاثية الأبعاد بالمحول. بعد ذلك، قم بتثبيت المسبار في مشبك المحول. الآن، ضع الفأر في وضعية الاستلقاء على منصة المراقبة.
قم بتخدير الحيوان عن طريق القمع الأنفي، ثم ثبت جميع قوائمه برفق باستخدام شريط لاصق على وسادات مراقبة معدل ضربات القلب الموجودة على المنصة. بعد ذلك، ضع حوالي 1 أو 2 مل من هلام نقل الموجات فوق الصوتية على البطن. ثم قم بوضع مسبار الموجات فوق الصوتية على أسفل البطن باستخدام منصة المحرك اليدوية.
باستخدام جهاز الموجات فوق الصوتية، حدد موقع المثانة، والتي يجب أن تظهر كدائرة داكنة مملوءة بالغذاء تقع مباشرة في الجهة الرأسية من فتحة المهبل. وبمجرد تحديد موقع المثانة، حرك المسبار ببطء شديد باتجاه الرأس لتصور الرحم الحامل، والذي يجب أن يظهر على شكل أسطواني مع وجود مناطق مستديرة في مواقع الحمل. ويمكن وصف هذا المظهر بأنه يشبه اللآلئ على سلسلة.
الآن، انتقل إلى التصوير ثنائي الأبعاد (2-D imaging). بمجرد تحديد الرحم الحامل، ابدأ من موقع الحمل الأقرب إلى المثانة، ثم تحرك ببطء وبالتتابع باتجاه الرأس (cephalad) لتحديد مواقع جميع أماكن الحمل. احفظ الصورة.
إذا كانت الكلية أو الطحال أو الكبد مرئية، فإن المسح يكون بعيداً جداً باتجاه الرأس (cephalad). أعد وضع المسبار في موضع أقرب إلى المثانة واحفظ الصورة. بعد ذلك، قم بتصوير القرن الرحمي المقابل بنفس الطريقة.
قم بتجميد الصورة عندما يكون إطار الموجات فوق الصوتية في مركز موقع الحمل أو الانغراس، ثم احفظ الصورة لتحليلها. استخدم الصور المحفوظة، الآن أو لاحقاً، لقياس مواقع الانغراس باستخدام تفاعل التقرن شديد الصدى كعلامة دالة. انقر يدوياً على أداة القياس، ثم انقر على موقع موقع الانغراس.
بعد ذلك، قم بسحب المؤشر إلى موقع الزرع التالي وانقر مرة أخرى لرسم خط، حيث يقوم البرنامج بعد ذلك بحساب طول الخط. وبعد قياس جميع مواقع الزرع، استخدم التقنية نفسها وانتقل إلى قياس حجم الكيس الجنيني وحجم القطب الجنيني.
بعد التصوير ثنائي الأبعاد (2-D)، ضع المسبار في منطقة تقع تقريباً في نقطة المنتصف للصورة ثلاثية الأبعاد (3-D) المطلوبة. على سبيل المثال، إذا كان يتم تصوير تفاحة ثلاثية الأبعاد، فيوضع المسبار عند اللب. وبمجرد وضع المسبار بشكل صحيح، قم بإجراء عملية استحواذ ثلاثية الأبعاد (3-D).
ستتحرك منصة المحرك ثلاثية الأبعاد هذه المسافة عبر الرحم في سلسلة من الخطوات أو الإطارات. وأثناء الحصول على المسح، تأكد من التقاط الهياكل المستهدفة بالكامل في المسح. وبعد جمع المسح، قم بتحميله لمعالجة الصور.
اختر الطرق المتوازية والدورانية للمعالجة، والتي ستعمل على تحميل جميع إطارات الصور ثلاثية الأبعاد في صندوق ثلاثي الأبعاد واحد. بعد ذلك، اختر حجم خطوة قدره 0.08 millimeters، ثم ابدأ من أحد طرفي كتلة الصور وقم بالتمرير عبر جميع الإطارات للتعرف على البيانات. بعد ذلك، ابدأ من أحد طرفي المجموعة وقم بتتبع المخطط الخارجي للجسم المراد دراسته يدويًا.
بعد ذلك، انتقل إلى الإطار التالي وقم بتتبع الخط الخارجي للجسم يدويًا مرة أخرى. استمر في هذه العملية حتى يتم تعليق جميع الإطارات يدويًا. وبمجرد الانتهاء، انقر فوق "إنهاء" للحصول على صورة ثلاثية الأبعاد وحساب لحجم الجسم.
بالنسبة للصورة، اختر بين تراكب شبكي أو تراكب صلب. بعد ذلك، اختر الإبقاء على معلومات الصورة المحيطة أو إزالتها من أجل الوضوح. يمكن للموجات فوق الصوتية عالية التردد الكشف عن تطور موقع الانغراس في وقت مبكر يصل إلى 5.5 days بعد الإخصاب.
باستخدام بطانة الرحم القرارية ذات الصدى المرتفع والأكثر فاتحة اللون كعلامة لمواقع الانغراس، يتم تحديد عدد مواقع الانغراس والمسافات بين هذه المواقع وقياسها كمياً في اليوم 6.5 بعد الإخصاب. ومع تقدم الحمل إلى اليوم 7.5 بعد الإخصاب، يصبح كل من الكيس الجنيني والقطب الجنيني، وكلاهما ذو صدى منخفض وأكثر دكنة، قابلين للتحديد بسهولة. وقد أُجريت عمليات إعادة بناء ثلاثية الأبعاد لرحم الفأر في اليوم 6.5 بعد الإخصاب، وذلك بتنسيقي التراكب الشبكي والتراكب الصلب.
في اليوم 7.5 بعد الإخصاب، كانت عملية المسح ثلاثي الأبعاد (3-D) كاشفة بالقدر ذاته. بعد مشاهدة هذا الفيديو، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية الحصول على صور دقيقة بالموجات فوق الصوتية بنظامي 2-D و3-D، لتوصيف الحمل دون انقطاع. ويبلغ إجمالي الوقت اللازم لعملية الحصول على صور الموجات فوق الصوتية، بنظامي 2-D و3-D، ما يقرب من 10 إلى 20 دقيقة على يد مستخدم خبير.
عند محاولة تنفيذ هذا الإجراء، من المهم تذكر الحفاظ على حركات صغيرة وتدريجية. لقد مهدت هذه التقنية الطريق للباحثين لاستكشاف الأنماط الظاهرية للحمل الطبيعي وغير الطبيعي في الفأر.
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية
تصف هذه المقالة تقنية تصوير بالموجات فوق الصوتية عالية التردد وغير جراحية لمراقبة الحمل المبكر في الفئران. تسمح هذه الطريقة بإجراء دراسات طولية دون إنهاء الحمل، مما يسهل جمع بيانات تكاثرية حيوية.
يتيح التصوير بالموجات فوق الصوتية عالي التردد (HFUS) ثلاثي الأبعاد مع إعادة البناء ثلاثي الأبعاد توصيفاً طولياً غير جراحي للحمل المبكر في النماذج الفأرية، مما يلغي الحاجة إلى مقاطعة الحمل. وتعزز هذه القدرة من الثقة التنبؤية في التنميط الظاهري التناسلي وتدعم الاستمرارية الترجمية في الأبحاث قبل السريرية. ويعد هذا النهج ذا صلة استراتيجية لفرق الأدوية الحيوية التي تستخدم الفئران المعدلة وراثياً لتقليل المخاطر المتعلقة بالأهداف الرحمية والجنينية.
تندمج طريقة التصوير هذه ضمن التسلسل الممتد من مرحلة الاكتشاف وصولاً إلى المرحلة قبل السريرية، مما يدعم اختبار الفرضيات، والتحقق من الأهداف، والأبحاث الانتقالية في علم الأحياء التكاثري.