تقييم منهجي لرفاهية في الفئران للإجراءات باستخدام التخدير العام

الهدف العام من هذا البروتوكول هو تقييم رفاهية الفئران بعد خضوعها لإجراءات بما في ذلك التخدير العام وتوفير بيانات سليمة علميا لدعم تصنيف الشدة وفقا لتوجيه الاتحاد الأوروبي 2010/63. يمكن أن يساعد هذا البروتوكول في الإجابة على الأسئلة الرئيسية حول رعاية في مجال علوم المختبر مثل درجة الضيق الناجم عن الإجراءات التي تنطوي على التخدير العام. الميزة الرئيسية لهذا البروتوكول هي أنه يتم تقييم رفاهية كل فأر على حدة بطريقة علمية قائمة على ويمكن بسهولة تكييف هذا البروتوكول ودمجه في الدراسات الأخرى المخطط لها.

خطرت لنا فكرة هذا البروتوكول لأول مرة عندما تكهننا أنه إذا تسبب التخدير المتكرر في إجهاد فئران المختبر أكثر من التعرض الفردي ، فستكون البيانات العلمية مفقودة. في هذه الخطوة ، قم بإعداد صندوق زجاجي بمساحة أرضية تبلغ حوالي 220 ملم × 290 ملم وارتفاع 390 ملم. قم بتغطية الأرضية بحوالي 0.5 سم من مواد الفراش.

ثم نثر حفنة من مواد الفراش المستخدمة من قفص المنزل فوق مادة الفراش الجديدة لتقليل الضيق الناجم عن البيئة الجديدة. وفر الطعام والماء. انقل الماوس برفق إلى قفص المراقبة واترك الماوس يعتاد على البيئة الجديدة لمدة 30 دقيقة على الأقل.

بالنسبة لمقياس تجهم الماوس ، استخدم كاميرا عالية الدقة للتصوير الفوتوغرافي. التقط باستمرار حوالي 30 إلى 40 صورة لكل نقطة زمنية في غضون دقيقة إلى دقيقتين. لاختبار سلوك الحفر وفقا ل Deacon و Jirkof ، قم بإعداد الجحور عن طريق وضع 140 جراما من كريات الطعام في زجاجة ماء بلاستيكية قياسية غير شفافة.

بعد ذلك ، ضع زجاجة الماء البلاستيكية المملوءة بحبيبات الطعام بالتوازي مع الجدار الخلفي لقفص المراقبة. بعد ساعتين ، قم بوزن كريات الطعام المتبقية في الجحر. قم بإجراء الاختبار مرتين قبل يومين من الإجراء كخط أساس.

في هذه الخطوة ، قم بإعداد قفص به مواد فراش جديدة لفترة المراقبة التي تبلغ 24 ساعة حيث يتم إيواء الفئران بشكل فردي. تبدأ فترة المراقبة على مدار 24 ساعة بعد مقياس تجهم الفأر وسلوك الاختباء. يتم تقليل مدة السكن الفردي إلى الحد الأدنى.

في غضون ذلك ، يتم قياس نشاط القفص المنزلي ، وتناول الطعام ، وسلوك بناء العش ، ومستويات مستقلبات الكورتيكوستيرون البرازية. بعد ذلك ، نثر حفنة من مواد الفراش المستخدمة بدون براز من قفص المنزل فوق المادة الجديدة لتقليل الضيق. توفير عش قطني مربع موحد بوزن محدد كإثراء بيئي فقط.

بعد ذلك ، قم بتركيب مستشعر الأشعة تحت الحمراء أعلى القفص لقياس نشاط القفص المنزلي. توفير الكريات الغذائية القياسية والماء المجاني وضع الماوس في القفص. في صباح اليوم التالي ، سجل العش وفقا لمقياس النقاط الخمس من قبل Deacon بعد ساعتين تقريبا من تشغيل الضوء.

بالإضافة إلى ذلك ، قم بوزن أي قطعة nestlet غير ممزقة تمثل 5٪ على الأقل من وزن nestlet الأولي. بعد ذلك ، ضع قفصا شبكيا في القفص بزاوية 45 درجة على الجانب الأطول من القفص. ابدأ المؤقت وقم بتسجيل الفئران أو الفيديو لمدة 10 دقائق من مسافة 1.5 متر تقريبا.

لاحظ جميع الأوقات التي يصعد فيها الماوس إلى قمة القفص مع جميع الكفوف الأربعة على الجزء العلوي من القفص أو يترك الجزء العلوي من القفص بمخالب واحدة أو أكثر على أرضية القفص متبوعا بالتحليل. زادت تجربة التخدير الفردية وكذلك التخدير المتكرر من درجات فرق مقياس كشر الفأر مقارنة بالمجموعة الضابطة بعد 30 دقيقة من التعرض. بعد 150 دقيقة من التخدير الأخير ، عادت درجات فرق مقياس تجهم الفأر لجميع الفئران إلى مستويات التحكم.

بالنسبة لسلوك الحفر ، قلل التخدير المتكرر فقط بشكل كبير من النسبة المئوية لوزن كريات الطعام التي أخرجتها الفئران من الجحر مقابل السيطرة. بالنسبة لسلوك بناء العش ، لم تكن هناك فروق ذات دلالة إحصائية في درجات العش بين تجربة واحدة للتخدير والتخدير المتكرر والتحكم. في النموذج الاستكشافي الحر ، قلل التخدير المتكرر بشكل كبير من عدد الاستكشافات مقارنة بالتحكم والمدة الإجمالية للاستكشاف مقابل تخدير واحد بعد يوم واحد من التخدير الأخير.

بعد ثمانية أيام من التخدير الأخير ، لم تعد هناك اختلافات بين مجموعات الدراسة. أثناء محاولة هذا البروتوكول ، من المهم أن تتذكر التعامل مع الفئران عن طريق النفق و / أو طرق الحجامة. يمكن أن يؤدي التقاط الفئران من الذيل إلى التوتر والقلق مما يؤثر بدوره على الرفاهية ويمكن أن يؤثر أيضا على نتائج البروتوكول.

يمكن تكييف هذا البروتوكول بسهولة مع الدراسات المخطط لها ودمجه في الدراسات المخطط لها لتقييم تأثير الإجراء على رفاهية الفئران. اعتمادا على الإجراء وتصميم الدراسة ، يجب اختيار الاختبار الأنسب لهذا البروتوكول. بعد مشاهدة هذا الفيديو ، سيكون لديك فهم جيد لكيفية تقييم رفاهية الفئران التي خضعت لعملية التخدير العام.

يساعد البروتوكول على تصنيف شدة الإجراء بطريقة علمية قائمة على.