يونيو 14, 2024
نقدم بروتوكولات لتقييم كفاءة مسار إصلاح كسر الشريط المزدوج في الخلايا باستخدام مجموعة من ركائز مراسل خارج الكروموسومات القائمة على التلألؤ.
تعمل Artios على تطوير أدوية جديدة مضادة للسرطان تستهدف الاستجابة لتلف الحمض النووي. لتمكين ذلك ، قمنا بتطوير مجموعة من المقايسات الجديدة لقياس نشاط إصلاح الحمض النووي الخلوي. كان لهذه المقايسات تأثير كبير على برامجنا ، مما أدى إلى اختبار أصول المرحلة السريرية في المرضى الذين يعانون من احتياجات طبية عالية غير ملباة.
يعد قياس النشاط الخلوي المستهدف بدقة أمرا ضروريا لتقدم العلاجات المستهدفة الجديدة. كان توليد فحوصات لعوامل إصلاح الحمض النووي مع الخصائص المطلوبة لتغذية حملة اكتشاف الأدوية الفعالة أمرا صعبا ، سواء كانت هناك حاجة إلى إنتاجية عالية ، وإشارة قوية إلى الضوضاء ، وتحول سريع ، ومن الناحية المثالية ، قابلية النقل إلى أنظمة بيولوجية مختلفة. لقد طورنا مجموعة من فحوصات المراسلين القوية والكمية والقابلة للمعايرة لقياس كفاءة أربعة مسارات رئيسية لإصلاح كسر الخيوط المزدوجة ، وإعادة التركيب المتماثل ، والانضمام النهائي غير المتماثل ، والانضمام النهائي بوساطة التماثل الدقيق ، والتلدين أحادي الجديل.
يتم التحقق من صحة فحوصات المراسلين هذه على أنها قراءة للإصلاح المعتمد على المسار ، وهي حساسة للتعديل الدوائي ، ولها وقت استجابة سريع. ركائز الإصلاح التي طورناها هي خارج الكروموسومات ، لذلك يمكن نقلها بشكل عابر إلى نماذج ذات أهمية وتوسيع نطاقها بسهولة إلى تنسيق عالي الإنتاجية. نعتقد أن أنظمة الفحص لدينا لها مكانة مهمة في تمكين اكتشاف أدوية نزع السلاح والتسريح وإعادة الإدماج ، ولكن أيضا في تعزيز فهمنا لبيولوجيا نزع السلاح والتسريح وإعادة الإدماج على نطاق أوسع.
وفي هذا الصدد، نأمل أن تساعد هذه الأساليب في التعجيل بتحديد أهداف دوائية جديدة ومقاضاة مرتكبيها، مما يؤدي إلى توفير أدوية لأمراض مثل السرطان حيث توجد حاجة طبية عالية غير ملباة.
تقدم هذه المقالة بروتوكولات لتقييم كفاءة مسارات إصلاح كسر الشريط المزدوج في الخلايا باستخدام ركائز مراسلة خارج كروموسومية تعتمد على التألق الحيوي. وتعد هذه المقاييس المطورة بالغة الأهمية لفهم استجابة تلف DNA وتسهيل اكتشاف الأدوية في مجال علم الأورام.
تتيح اختبارات المراسل الكمية القائمة على التلألؤ لإصلاح كسر شريطي DNA قياساً عالي الإنتاجية ونوعياً للمسارات لنشاط إصلاح DNA الخلوي، مما يدعم بشكل مباشر التحقق من الأهداف والحد من المخاطر الميكانيكية في اكتشاف أدوية الأورام. وتوفر هذه الاختبارات مخرجات سريعة وقابلة للتكرار والتوسيع، وهي ضرورية لتطوير علاجات استجابة تلف DNA (DDR). كما أن دمج هذه الاختبارات في مسارات الاكتشاف يعزز الثقة التنبؤية وفرز المحافظ الاستثمارية للأصول التي تستهدف DDR.
تأتي هذه المقايسات ضمن سلسلة عمليات الاكتشاف، بدءاً من التحقق المبكر من الهدف وصولاً إلى تحديد المركبات الرائدة والتقييم قبل السريري للعلاجات التي تستهدف استجابة تلف الحمض النووي (DDR).