منهجية محسنة لدراسة تكوين العظم بعد الولادة عن طريق التعظم الغشائي في نموذج إصابة نخاع عظم الفئران

يركز بحثنا على فهم آليات إصلاح العظام باستخدام نموذج إصابة نخاع العظم. نهدف إلى الكشف عن كيفية تنظيم التعظم داخل الغشاء أثناء الشفاء ، واستكشاف الأساليب العلاجية التي يمكن تسخيرها لتعزيز تجديد العظام. أثبتت الدراسات الحديثة في هذا المجال علامات سطحية تحدد الخلايا الجذعية والهيكلية السلفية ، مما يكشف عن أدوارها الحاسمة في نمو العظام وإصلاحها.

يتيح بروتوكولنا التحقيق في مساهمات هذه الخلايا أثناء التعظم داخل الغشاء، مما يسمح لنا باستكشاف تنظيمها وإمكانية استهدافها العلاجي أثناء إصلاح العظام. يعالج بروتوكولنا الفجوة في فهم إصلاح العظام فقط من خلال التعظم الغشائي في سياق ما بعد الولادة ، باستخدام نموذج ذي صلة سريريا. على عكس نماذج الإصابات الأخرى المستخدمة لدراسة التعظم داخل الغشائي ، يوفر بروتوكولنا بيئة أكثر تحكما واستجابات إصابة قابلة للتكرار ، وتحديدا في العظام الطويلة.

في المستقبل ، سيستخدم مختبرنا نموذج إصابة نخاع العظم جنبا إلى جنب مع الأساليب الدوائية الموضعية لتعديل المنظمين اللاجينية لتكوين العظم بشكل عابر. هدفنا هو تعزيز تجديد العظام والشفاء من خلال الأساليب العلاجية الجديدة. للبدء ، قم بإعداد وتطهير جميع أسطح العمل باستخدام منظف مطهر من الدرجة السريرية.

قم بتغطية منصة التدفئة بوسادة جراحية معقمة. اجمع ورتب جميع الأدوات المعقمة وكذلك الكواشف. الآن ، قم بوزن الماوس باستخدام ميزان دقيق.

بناء على التركيبة المتاحة من البوبرينورفين ، احسب الحجم المطلوب للإعطاء المسكن. بعد تخدير الماوس ، قم بإزالته بعناية من غرفة الحث. ضع على الوسادة الجراحية المعقمة في وضع ضعيف وقم بوضع مخروط الأنف فوق رأس الفأر.

قم بإزالة الفأر لفترة وجيزة من مخروط الأنف وحقن الجرعة المحسوبة من مسكن البوبرينورفين الممتد عبر الطريق تحت الجلد. ثم ضع الماوس بعناية مرة أخرى في وحدة التخدير المخروطية للأنف. املأ حقنة سعة ثلاثة ملليلتر مزودة بإبرة قياس 26 بمحلول ملحي معقم ، وضعها على الجانب.

قم بإزالة الفراء من الطرف الخلفي حيث سيتم تنفيذ الإجراء باستخدام مقصات كهربائية أو تعمل بالبطارية. باستخدام أدوات تطبيق معقمة ذات رؤوس قطنية ، ضع مقشر بوفيدون اليود بنسبة 10٪ على موقع الجراحة ، متبوعا بتطبيق مقشر كحول الأيزوبروبيل بنسبة 70٪ واترك المنطقة تجف تماما. الآن ضع الماوس على ظهره وثني ركبة الساق المنطوقة.

أمسك الساق باليد غير المهيمنة بحيث تنحني الركبة فوق الإصبع الأوسط. يقع الإصبع الثاني على عظم الفخذ ويستقر الإبهام على الساق. باستخدام مشرط ، قم بعمل شق أفقي صغير ضحل أسفل الرضفة مباشرة.

حدد مساحة المفصل مع وضع الإبرة أفقيا عبر الركبة المثنية واشعر بالمسافة بين عظم الفخذ والساق. استخدم هذا الدليل التشريحي للحفر يدويا في عظم الفخذ البعيد من الركبة باتجاه الجانب القريب بإبرة قياس 25. أدخل الإبرة من خلال الرضفة أو حولها.

تأكد من وضع الإبرة بشكل صحيح في التجويف النخاعي بالأشعة السينية ، مع التأكد من أنها قريبة من المركز قدر الإمكان. بعد إزالة الإبرة قياس 25 ، أدخل على الفور إبرة قياس 26 في نفس الفتحة داخل تجويف النخاع. قم بإعادة تشكيل جوانب التجويف النخاعي بحركة دائرية خمس مرات على الأقل حتى تشعر بالنعومة.

ثم قم بإزالة الإبرة قياس 26 ، واغسل التجويف ب 1.5 إلى 2 مل من المحلول الملحي حتى يصبح التدفق العكسي واضحا. تخلص من المحقنة والإبرة بأمان في حاوية مخصصة. بعد ذلك ، أغلق الجرح الجلدي باستخدام خياطة لاصقة موضعية.

بعد الجراحة مباشرة، قم بتطبيق الجرعة المتبقية من البوبرينورفين طويل المفعول كما تم حسابه سابقا. راقب على وسادة التدفئة بحثا عن علامات التنفس الطبيعي دون عائق.