طريقة MALDI-ToF MS لتوصيف البوليمرات الاصطناعية ذات التشتت والمجموعات النهائية المتفاوتة

نريد أن نعرف كيف تتفاعل البوليمرات. لهذا ، نستخدم قياس الطيف الكتلي ، لأنه أداة رائعة لدراسة كل من التفاعلات المتوقعة والتفاعلات الجانبية الأخرى. في السنوات العشر الماضية ، تقدم MALDI-ToF MS للحصول على المزيد من الدقة والتجزئة داخل MS / MS.

نصف مجموعة واسعة من التفاعلات ، بما في ذلك العينات الأحادية المشتتة ، والمشتتة بشكل معتدل ، والمشتتة للغاية ، وتلك ذات الدقة النظيرية المميزة. على سبيل المثال ، البوليمرات ذات المجموعات المهلجنة أو تلك المعرضة لتكوين أيونات غير مستقرة. للبدء ، قم بإعداد محلول اكتساب المادة المراد تحليلها عن طريق إضافة محاليل مخزون الكاتيون والتحليل والمصفوفة إلى الأنبوب A ، ودوامة الأنبوب للخلط.

ثم أضف محاليل مخزون الكاتيون والمعايرة والمصفوفة في الأنبوب B واخلطها جيدا. الآن ، ماصة 0.5 ميكرولتر من خليط عينة الكاتيون والتحليل والمصفوفة من الأنبوب A إلى لوحة الهدف MALDI-ToF MS ، باستخدام طريقة القطرات المجففة. ثم ماصة 0.5 ميكرولتر من مزيج المعايرة من الأنبوب B إلى بقعة مجاورة على اللوحة المستهدفة.

سجل موقع الصف والعمود الدقيق لكل بقعة كمرجع أثناء الحصول على البيانات. أدخل لوحة الهدف MALDI-ToF MS في الجهاز وقم بإرساء اللوحة المستهدفة باستخدام برنامج التحكم في الأداة. حدد ملف طريقة وافتحه في برنامج التحكم في الأجهزة.

اختر إما الطريقة الموجبة أو الإيجابية الخطية العاكسة بناء على نطاق كتلة المادة المراد تحليلها. بعد ذلك ، اضغط على زر البدء في برنامج التحكم في الجهاز لبدء الحصول على بيانات MALDI-ToF MS. اسمح للاكتساب بالاكتمال تلقائيا أو اضغط على إيقاف عند الرغبة.

ثم انقر فوق إضافة لنقل الطيف الفردي MALDI-ToF MS إلى المخزن المؤقت لمجموع الطيف. أعد وضع ليزر MALDI-ToF MS من خلال عرض موجز الكاميرا والنقر في أي مكان داخل نفس البئر المحدد لاستهداف موضع جديد. كرر الاستحواذ على MALDI-ToF MS لمواصلة إضافة الأطياف حتى تصبح النتائج مرضية.

الآن ، حدد عينة المعايرة على اللوحة المستهدفة MALDI-ToF MS وقم بإجراء عملية استحواذ جديدة باتباع خطوات الحصول على البيانات الموضحة سابقا. انتقل إلى علامة التبويب المعايرة في برنامج التحكم في الجهاز وافتح قائمة التحكم في الكتلة المناسبة التي تتوافق مع المعايرة المحددة. قم بمطابقة قمم المعايرة في طيف كتلة MALDI-ToF المكتسب مع الكتل المرجعية المدرجة في قائمة التحكم في الكتلة.

في قائمة التحكم في الكتلة ، حدد الكتلة المقابلة لذروة المعايرة الأولى التي لوحظت في طيف الكتلة MALDI-ToF. اضبط الذروة المرجعية بالنقر على يسار إشارة المعايرة بحيث يتم تحديد الذروة. ثم انقر فوق تطبيق لتعيين إشارة المعايرة ككتلة مرجعية.

كرر الإجراء لجميع قمم المعايرة الإضافية عن طريق تحديد الكتلة التالية ذات الأهمية في قائمة التحكم في الكتلة، ومحاذاة ذروة المعايرة المقابلة، وتطبيق الإعداد المرجعي. للحصول على عينة تحليل البوليمر المعايرة ، حدد موقع وحدد البئر الذي يحتوي على خليط الكاتيون والتحليل والمصفوفة باستخدام برنامج التحكم في الأجهزة. قم بإجراء الحصول على بيانات MALDI-ToF MS باستخدام الطريقة المعايرة ، كما هو موضح سابقا.

أضف اسم ملف مناسب واحفظ طيف كتلة التحليل المعاير لمزيد من التحليل. أظهر طيف MALDI-ToF MS من Tris G1 6 ذروة واحدة عند 505.239 دالتون ، مطابقة لكتلتها النظرية وتؤكد إلغاء الحماية الكاملة. أظهرت بوليمرات PDMP مع مجموعات نهاية الكلوريد والبروتون ذروة رئيسية عند 859.426 دالتون ، جنبا إلى جنب مع المتغيرات الدورية المستبدلة بالصوديوم.

امتد توزيع PDMP الكامل من 600 إلى 1 600 دالتون ، بمتوسط وحدات متكررة 100.056 دالتون. أظهرت بوليمرات البولي إيثيلين النحاس الخطية أنواعا من ألفا هيدروكسي أوميغا بروبارجيل وألفا بروبارجيل أوميغا بروبارجيل وألفا هيدروكسي أوميغا هيدروكسي في ثلاثة توزيعات. أظهرت بوليمرات البولي إيثيلين الكرنب الخطية الوظيفية بالأزيد قمم ألفا أزيدو أوميغا أزيدو ، وألفا بروبارجيل أوميغا بروبارجيل ، وألفا بروبارجيل أوميغا أزيدو ، بالإضافة إلى الأيونات غير المستقرة.

كشفت بوليمرات المشط عن حالات أكسدة مع 16 فاصل دالتون ، وتحولات K plus القريبة التي تؤكد الأكسدة الرباعية. سيظل Methoxy PEG ، بدون مجموعة propargyl 539 و 583 غير متفاعل ويزداد بمجرد أن تشكل غالبية مجموعات propargyl هذه أوزانا جزيئية أعلى.