studying-membrane-biogenesis-with-luciferase-based-reporter-gene

Studying Membrane Biogenesis with a Luciferase-Based Reporter Gene Assay

To study the coordination of different lipid synthesis pathways during membrane biogenesis it is useful to work with an experimental system where membrane ...

Cell biology. Fats, flies, and palmitate.

Zellbiologie. Fette, Fliegen und Palmitat.

A scintillation proximity assay has been developed to study the endosomal trafficking of radiolabeled cholesterol in living cells. Mouse macrophages were cultured in the presence of tritiated cholesterol and scintillant microspheres. Microspheres were taken up by phagocytosis and stored in phagolysosomes. Absorption of tritium beta particles by the scintillant produces light signals that can be measured in standard scintillation counters. Because of the short range of tritium beta particles and for geometric reasons, scintillant microspheres detect only that fraction of tritiated cholesterol localized inside phagolysosomes or within a distance of approximately 600 nm. By incubating cultures in a temperature-controlled microplate reader, the kinetics of phagocytosis and cholesterol transport could be analyzed in near-real time. Scintillation signals were significantly increased in response to inhibitors of lysosomal cholesterol export. This method should prove a useful new tool for the study of endosomal trafficking of lipids and other molecules.

Real-time analysis of endosomal lipid transport by live cell scintillation proximity assay.

Echtzeit-Analyse von endosomalen Lipid-Transport von lebenden Zellen Scintillation Proximity Assay.

Cells acquire cholesterol in part by endocytosis of cholesteryl ester containing lipoproteins. In endosomes and lysosomes cholesteryl ester is hydrolyzed by acidic cholesteryl ester hydrolase producing cholesterol and fatty acids. Under certain pathological conditions, however, such as in atherosclerosis, excessive levels of cholesteryl ester accumulate in lysosomes for reasons that are poorly understood. Here, we have studied endosomal and lysosomal cholesteryl ester metabolism in cultured mouse macrophages and with cell-free extracts. We show that net hydrolysis of cholesteryl ester is coupled to the transfer of cholesterol to membranes. When membrane cholesterol levels are low, absorption of cholesterol effectively drives cholesteryl ester hydrolysis. When cholesterol levels in acceptor membranes approach saturation or when cholesterol export is blocked, cholesterol is re-esterified in endosomes. These results reveal a new facet of cellular cholesterol homeostasis and provide a potential explanation for cholesteryl ester accumulation in lysosomes of atherosclerotic cells.

Modulation of endosomal cholesteryl ester metabolism by membrane cholesterol.

Die Modulation der endosomalen Cholesterylester Stoffwechsel von Cholesterin Membran.

In the process of membrane biogenesis several dozen proteins must operate in precise concert to generate approximately 100 lipids at appropriate concentrations. To study the regulation of bilayer assembly in a cell cycle-independent manner, we have exploited the fact that phagocytes replenish membranes expended during particle engulfment in a rapid phase of lipid synthesis. In response to phagocytosis of latex beads, human embryonic kidney 293 cells synthesized cholesterol and phospholipids at amounts equivalent to the surface area of the internalized particles. Lipid synthesis was accompanied by increased transcription of several lipogenic proteins, including the low-density lipoprotein receptor, enzymes required for cholesterol synthesis (3-hydroxy-3-methylglutaryl CoA synthase, 3-hydroxy-3-methylglutaryl CoA reductase), and fatty acid synthase. Phagocytosis triggered the proteolytic activation of two lipogenic transcription factors, sterol regulatory element binding protein-1a (SREBP-1a) and SREBP-2. Proteolysis of SREBPs coincided with the appearance of their transcriptionally active N termini in the nucleus and 3-fold activation of an SREBP-specific reporter gene. In previous studies with cultured cells, proteolytic activation of SREBP-1a and SREBP-2 has been observed in response to selective starvation of cells for cholesterol and unsaturated fatty acids. However, under the current conditions, SREBP-1a and SREBP-2 are induced without lipid deprivation. SREBP activation is inhibited by high levels of the SREBP-interacting proteins Insig1 or the cytosolic domain of SREBP cleavage-activating protein. Upon overexpression of these proteins, phagocytosis-induced transcription and lipid synthesis were blocked. These results identify SREBPs as essential regulators of membrane biogenesis and provide a useful system for further studies on membrane homeostasis.

Transcriptional regulation of phagocytosis-induced membrane biogenesis by sterol regulatory element binding proteins.

In den Prozess der Membran Biogenese unterh&auml;lt mehrere Dutzend Proteine pr&auml;zise Konzert um ca. 100 Lipide bei geeigneten Konzentrationen zu generieren. Um die Regulierung der Bilayer Versammlung Zellzyklus-unabh&auml;ngig zu studieren, haben wir die Tatsache ausgenutzt, dass Fresszellen Membranen Gehgeschwindigkeit w&auml;hrend Partikel Engulfment in einer schnellen Phase der Lipid-Synthese wieder aufzuf&uuml;llen. In Reaktion auf die Phagozytose von Latex-Perlen synthetisiert menschlichen embryonalen Nierenzellen 293, Cholesterin und Phospholipide in der verinnerlichten Teilchen entspricht der Fl&auml;che bel&auml;uft. Lipid-Synthese wurde begleitet von erh&ouml;hter Transkription von mehreren Lipogenic Proteinen, einschlie&szlig;lich den Rezeptor low density Lipoprotein, Enzyme, die f&uuml;r die Cholesterin-Synthese (3-hydroxy-3-Methylglutaryl-CoA-Synthase, 3-hydroxy-3-Methylglutaryl-CoA-Reduktase) und Fetts&auml;ure-Synthase. Phagozytose l&ouml;ste die proteolytische Aktivierung von zwei Lipogenic Transkriptionsfaktoren, Sterin regulatorischen Element Binding Protein-1a (SREBP-1a) und SREBP-2. Proteolyse von SREBPs fiel mit der Darstellung ihrer transcriptionally aktiv N-Termini im Zellkern und 3-Band-Aktivierung ein SREBP-spezifische-Reporter-gen. In fr&uuml;heren Studien mit kultivierten Zellen wurde als Reaktion auf selektive Hungertod von Zellen f&uuml;r Cholesterin und unges&auml;ttigten Fetts&auml;uren proteolytische Aktivierung von SREBP-1a und SREBP-2 beobachtet. Allerdings sind unter den gegenw&auml;rtigen Bedingungen SREBP-1a und SREBP-2 ohne Lipid Entbehrung ausgel&divide;St. SREBP Aktivierung ist durch hohe Niveaus der SREBP-Interaktion-Proteine Insig1 oder die Zytosolische Dom&auml;ne SREBP Cleavage-Aktivierung Proteins gehemmt. Auf eine &Uuml;berexpression von dieser Proteine wurden Transkription induziert durch Phagozytose und Lipid-Synthese blockiert. Diese Ergebnisse identifizieren SREBPs als wesentliche Regulatoren der Membran Biogenese und bieten ein n&uuml;tzliches System f&uuml;r weitere Studien auf Membran-Hom&ouml;ostase.

Transkriptionelle Regulation der Membran induziert durch Phagozytose Biogenese von Sterin regulatorischen Element bindenden Proteinen.

Fusion of phagosomes with late endocytic organelles is essential for cellular digestion of microbial pathogens, senescent cells, apoptotic bodies, and retinal outer segment fragments. To further elucidate the biochemistry of the targeting process, we developed a scintillation proximity assay to study the stepwise association of lysosomes and phagosomes in vitro. Incubation of tritium-labeled lysosomes with phagosomes containing scintillant latex beads led to light emission in a reaction requiring cytosol, ATP, and low Ca(2+) concentrations. The nascent complex was sensitive to disruption by alkaline carbonate, indicating that the organelles had "docked" but not fused. Through inhibitor studies and fluorescence microscopy we show that docking is preceded by a tethering step that requires actin polymerization and calmodulin. In the docked state ongoing actin polymerization and calmodulin are no longer necessary. The tethering/docking activity was purified to near homogeneity from rat liver cytosol. Major proteins in the active fractions included actin, calmodulin and IQGAP2. IQGAPs are known to bind calmodulin and cross-link F-actin, suggesting a key coordinating role during lysosome/phagosome attachment. The current results support the conclusion that lysosome/phagosome interactions proceed through distinct stages and provide a useful new approach for further experimental dissection.

Differential requirements for actin polymerization, calmodulin, and Ca2+ define distinct stages of lysosome/phagosome targeting.

Verschmelzung von Phagosomen mit sp&auml;ten endocytic Organellen unbedingt zellularen Verdauung von mikrobiellen Krankheitserregern, alternde Zellen und Apoptotic K&ouml;rper retinale &auml;u&szlig;ere Segment Fragmente. Um die Biochemie des Prozesses gezielt weiter zu erhellen, entwickelten wir ein Szintillation-N&auml;he-Assay um die schrittweise Vereinigung der Lysosomen und Phagosomen in-vitro-Studie. Inkubation von Tritium-beschrifteten Lysosomen mit Phagosomen mit Scintillant Latex Beads f&uuml;hrte zur Lichtemission im Zytosol, ATP und niedrigen Konzentrationen der Ca(2+) Reaktion. Der entstehende Komplex war empfindlich auf St&ouml;rungen durch Alkali Carbonat, darauf hinweist, dass die Organellen &quot;angedockt&quot; hatte, aber nicht verschmolzen. Durch Hemmer Studien und Fluoreszenz Mikroskopie zeigen wir, dass Andocken ein Anbindehaltung Schritt vorangestellt, die Aktin-Polymerisation und Calmodulin erfordert. In die angedockten Zustand laufenden Actin sind Polymerisierung und Calmodulin nicht mehr notwendig. Die Anbindehaltung/Andocken-Aktivit&auml;t wurde gereinigt, um Homogenit&auml;t von Rattenleberzellen Zytosol nahe. Wichtige Proteine in der aktiven Br&uuml;che enthalten Calmodulin, Aktin und IQGAP2. IQGAPs sind bekannterma&szlig;en Calmodulin binden und sich vernetzen F-Actin, schl&auml;gt einen koordinierende Rolle w&auml;hrend Lysosom/Phagosom Anlage Schl&uuml;ssel. Die aktuelle Ergebnisse st&uuml;tzen die Schlussfolgerung, dass Lysosom/Phagosom Interaktionen unterscheidbare Stufen durchlaufen und einen n&uuml;tzlichen neuen Ansatz f&uuml;r weitere experimentelle Dissektion bieten.

Differenzielle Anforderungen f&uuml;r Aktin-Polymerisation, Calmodulin und Ca2 + definieren Lysosom/Phagosom auf mehreren Stufen.

An important role of IgG antibodies in the defense against microbial infections is to promote the ingestion and killing of microbes by phagocytes. Here, we developed in vivo and in vitro approaches to ask whether opsonization of particles with IgG enhances intracellular targeting of lysosomes to phagosomes. To eliminate the effect of IgG on the ingestion process, cells were exposed to latex beads at 15-20 degrees C, which allows engulfment of both IgG-coated and uncoated beads but prevents the fusion of lysosomes with phagosomes. Upon shifting the temperature to 37 degrees C, phagosomes containing IgG beads matured significantly faster into phagolysosomes as judged by colocalization with lysosomal markers. The IgG effect was independent of other particle-associated antigens or serum factors. Lysosome/phagosome attachment was also quantified biochemically with a cytosol-dependent scintillation proximity assay. Interactions were enhanced significantly in reactions containing cytosol from mouse macrophages that had been exposed to IgG-coated beads, indicating that IgG signaling modulates the cytosolic-targeting machinery. Similar results were obtained with cytosol from primary human monocytes, human U-937 histiocytic lymphoma cells and from Chinese hamster ovary (CHO) cells transfected with a human IgG (Fcgamma) receptor. IgG-induced activation is shown to affect the actin-dependent tethering/docking stage of the targeting process and to proceed through a pathway involving protein kinase C. These results provide a rare example of an extracellular signal controlling membrane targeting on the level of tethering and docking. We propose that this pathway contributes to the role of antibodies in the protection against microbial infections.

Immunoglobulin G signaling activates lysosome/phagosome docking.

Eine wichtige Rolle von IgG-Antik&ouml;rpern bei der Verteidigung gegen mikrobielle Infektionen ist die Einnahme und T&ouml;tung von Mikroben durch Fresszellen zu f&ouml;rdern. Hier haben wir in-vivo und in vitro Ans&auml;tze um zu Fragen, ob Opsonization Teilchen mit IgG erh&ouml;ht die intrazellul&auml;re Ausrichtung der Lysosomen zu Phagosomen entwickelt. Um die Wirkung der IgG auf der Aufnahme-Prozess zu beseitigen, wurden Zellen Latex Perlen bei 15-20 Grad C, ausgesetzt, die erm&ouml;glicht Engulfment IgG-beschichtete und unbeschichtete Perlen aber verhindert, dass die Fusion von Lysosomen mit Phagosomen. Nach Umstellung der Temperatur auf 37 Grad C, Phagosomen mit IgG-Beads deutlich schneller zu gereift Phagolysosomes wie von Kolokalisation mit lysosomalen Markern beurteilt. Der IgG-Effekt war unabh&auml;ngig von anderen Teilchen-assoziierte Antigene oder Serum Faktoren. Lysosom/Phagosom Anlage war auch biochemisch mit einem Zytosol abh&auml;ngigen Szintillation-N&auml;he-Assay quantifiziert. Interaktionen wurden erheblich verbessert, in Reaktionen mit Zytosol von Maus-Makrophagen, die ausgesetzt waren, zu IgG-beschichtete Perlen, darauf hinweist, dass IgG signalisieren die Zytosolische Zielversionen Maschinerie moduliert. &Auml;hnliche Ergebnisse wurden erzielt mit Zytosol von prim&auml;ren menschlichen Monozyten, menschliche U-937-Histiozyt&auml;re-Lymphom-Zellen und aus chinesischer Hamster Eierstock transfected Zellen (CHO) mit einem menschlichen IgG (Fcgamma)-Rezeptor. IgG-induzierte Aktivierung ist die Aktin-abh&auml;ngige Anbindehaltung/Andocken Phase gezielt zu beeinflussen und durch einen Weg mit Proteinkinase C. Vorgehen dargestellt. Diese Ergebnisse liefern ein seltenes Beispiel f&uuml;r eine extrazellul&auml;re Signal Steuern Membran Zielgruppenadressierung auf der Ebene der Anbindehaltung und Andocken. Wir schlagen vor, dass dieser Weg f&uuml;r die Rolle der Antik&ouml;rper in den Schutz vor mikrobiellen Infektionen beitr&auml;gt.

Immunglobulin G Signalisierung aktiviert Lysosom/Phagosom andocken.

Phagocytes, such as macrophages, neutrophils, and dendritic cells, play important roles in the innate immune system through their ability to engulf, kill, and digest invading microbes. In cooperation with the humoral adaptive immune system, coating of substrates with immunoglobulin G (IgG) antibodies enhances several aspects of phagocytosis, including the recognition of substrates by cell surface IgG (Fcgamma) receptors, particle internalization, generation of microbicidal oxygen species, and targeting of lysosomes to phagosomes. We describe a cell-free scintillation proximity assay developed to study the mechanisms of lysosome targeting to phagosomes and the regulation of this process by IgG. The approach involves the use of isolated phagosomes containing scintillant latex beads and lysosomes labeled with a tritiated marker. Scintillation results only when lysosomes and phagosomes come into immediate contact and requires supplementation of reactions with adenosine triphosphate and cytosol; addition of cytosol from IgG-conditioned cells enhances this signal. The method is useful for investigating the biochemistry and regulation of the early tethering and docking steps of lysosome and phagosome interactions.

A cell-free scintillation proximity assay for studies on lysosome-to-phagosome targeting.

Fresszellen, Makrophagen, neutrophile und Makrophagen, spielen wichtige Rollen des angeborenen Immunsystems durch ihre F&auml;higkeit, zu verschlingen, wie t&ouml;ten, und eindringende Mikroben zu verdauen. In Zusammenarbeit mit dem humorale adaptive Immunsystem verbessert die Beschichtung von Substraten mit Immunglobulin G (IgG) Antik&ouml;rper verschiedene Aspekte der Phagozytose, einschlie&szlig;lich der Anerkennung von Substraten durch Zellrezeptoren Oberfl&auml;che IgG (Fcgamma), Partikel Internalisierung, Erzeugung von Mikrobizide Sauerstoffsorte und Ausrichtung der Lysosomen zu Phagosomen. Wir beschreiben ein zellfreier Szintillation-N&auml;he-Assay entwickelt, um die Mechanismen der Lysosom-targeting Phagosomen und die Verordnung dieses Prozesses zu studieren durch IgG. Die Methode umfasst die Verwendung von isolierten Phagosomen mit Scintillant Latex Perlen und Lysosomen mit tritiiertem Marker beschriftet. Szintillation Ergebnisse nur dann, wenn Lysosomen und Phagosomen in unmittelbare Ber&uuml;hrung kommen und erfordert eine Supplementierung von Reaktionen mit Adenosintriphosphat und Zytosol; Zusatz von Zytosol von IgG konditionierten Zellen verbessert dieses Signal. Die Methode eignet sich f&uuml;r die Biochemie und die Verordnung &uuml;ber die fr&uuml;hen Anbindehaltung untersuchen und Andocken Schritte Lysosom und Phagosom Interaktionen.

Ein zellfreier Szintillation-N&auml;he-Assay f&uuml;r Studien &uuml;ber Lysosom-Phagosom-Ausrichtung.

Phagocytosis of microorganisms, senescent cells, apoptotic bodies, and effete tissue material is an important process in host defense and tissue homeostasis. A method is described to measure, in living macrophages, the kinetics of particle engulfment and lysosome/phagosome targeting. Plasma membranes or lysosomes are labeled with tritiated lipids, followed by exposure of cells to scintillant microbeads. Because of the short range of tritium beta-particles, geometric factors, and the confinement of lipids to membranes, scintillation can only be elicited by tracer molecules in membranes immediately vicinal to the scintillant. When the plasma membrane.is labeled with [(3)H]cholesterol, a signal is produced on bead-cell contact and engulfment and then reaches steady state within 45 min. When lysosomes are labeled with nonhydrolyzable [(3)H]cholesterol oleyl ether, scintillation requires intracellular lysosome/phagosome attachment or fusion, and steady state is attained only after several hours. The live-cell scintillation proximity approach is useful for examining the effects of pharmacological and genetic manipulations on particle uptake and on lysosome/phagosome targeting.

Studying phagocytosis by live-cell scintillation proximity assay.

Phagozytose von Mikroorganismen, alternde Zellen, Apoptotic K&ouml;rper und schlaffer Gewebematerial ist ein wichtiger Prozess in Host-Verteidigungs- und Gewebe-Hom&ouml;ostase. Eine Methode wird beschrieben, in lebenden Makrophagen, die Kinetik der Partikel Engulfment und Lysosom/Phagosom targeting zu messen. Plasma Membrane oder Lysosomen werden mit tritiiertem Lipide, gefolgt von Aussetzung Zellen, Scintillant Microbeads beschriftet. Wegen der kurzen Tritium Beta-Teilchen, geometrische Faktoren und die Beengtheit der Lipide, Membranen kann Szintillation nur von Tracer-Molek&uuml;le in Membranen sofort zu den Scintillant vicinal hervorgerufen werden. Wenn der Plasma-membrane.is mit [(3) H] Cholesterin bezeichnet, wird ein Signal auf Perlen-Zell-Kontakt und Engulfment und Steady-State innerhalb 45 min erreicht. Wenn Lysosomen mit Nonhydrolyzable [(3) H] Cholesterin Oleyl &Auml;ther beschriftet sind, Szintillation erfordert intrazellul&auml;r Lysosom/Phagosom Anlage oder Fusion und Steady-State wird erst nach mehreren Stunden erreicht. Der Leben-Zelle Szintillation N&auml;he Ansatz eignet sich f&uuml;r die Pr&uuml;fung der Auswirkungen der pharmakologischen und genetische Manipulationen auf Partikel Aufnahme und auf Lysosom/Phagosom Zielgruppenadressierung.

Phagozytose durch Leben-Zelle Szintillation N&auml;he Probe zu studieren.

Lipid metabolism in mammals is orchestrated by a family of transcription factors called sterol regulatory element-binding proteins (SREBPs) that control the expression of genes required for the uptake and synthesis of cholesterol, fatty acids, and triglycerides. SREBPs are thus essential for insulin-induced lipogenesis and for cellular membrane homeostasis and biogenesis. Although multiple players have been identified that control the expression and activation of SREBPs, gaps remain in our understanding of how SREBPs are coordinated with other physiological pathways.

Identification of novel genes and pathways regulating SREBP transcriptional activity.

Lipidstoffwechsel bei S&auml;ugetieren ist eine Familie von Transkriptionsfaktoren genannt Sterin regulatorischen Element-bindende Proteine (SREBPs), die Steuern, die Expression von Genen, die f&uuml;r die Aufnahme und die Synthese von Cholesterin, Fetts&auml;uren und Triglyceride erforderliche arrangierte. SREBPs sind daher unerl&auml;sslich f&uuml;r Insulin-induzierte Lipogenese und zellul&auml;ren Membran-Hom&ouml;ostase und Biogenese. Obwohl mehrere Spieler identifiziert wurden, die Ausdruck und Aktivierung von SREBPs steuern, bleiben L&uuml;cken in unserem Verst&auml;ndnis der wie SREBPs mit anderen physiologischen Wege koordiniert werden.

Identifizierung der neuartige Gene und Wege, die Regulierung SREBP transkriptionelle Aktivit&auml;t.

Bilayer synthesis during membrane biogenesis involves the concerted assembly of multiple lipid species, requiring coordination of the level of lipid synthesis, uptake, turnover, and subcellular distribution. In this review, we discuss some of the salient conclusions regarding the coordination of lipid synthesis that have emerged from work in mammalian and yeast cells. The principal instruments of global control are a small number of transcription factors that target a wide range of genes encoding enzymes that operate in a given metabolic pathway. Critical in mammalian cells are sterol regulatory element binding proteins (SREBPs) that stimulate expression of genes for the uptake and synthesis of cholesterol and fatty acids. From work with Saccharomyces cerevisiae, much has been learned about glycerophospholipid and ergosterol regulation through Ino2p/Ino4p and Upc2p transcription factors, respectively. Lipid supply is fine-tuned through a multitude of negative feedback circuits initiated by both end products and intermediates of lipid synthesis pathways. Moreover, there is evidence that the diversity of membrane lipids is maintained through cross-regulatory effects, whereby classes of lipids activate the activity of enzymes operating in another metabolic branch.

Coordination of lipid metabolism in membrane biogenesis.

Bilayer Synthese w&auml;hrend der Membran Biogenese umfasst die konzertierte Assembly mehrere Lipid-Arten, die Koordinierung des Niveaus der Lipid-Synthese, Aufnahme, Umsatz, und subzellul&auml;re Verteilung. In diesem Bericht besprechen wir einige der wichtigsten Schlussfolgerungen hinsichtlich der Koordinierung der Lipid-Synthese, die von der Arbeit in den S&auml;ugetier- und Hefe-Zellen entstanden sind. Die wichtigsten Instrumente der globalen Kontrolle sind eine kleine Anzahl von Transkriptionsfaktoren, die als Ziel eine Vielzahl von Genen, die Codierung der Enzyme, die in einem bestimmten Stoffwechselweg t&auml;tig sind. Kritisch in den S&auml;ugetier-Zellen sind Sterin-regulatorische Element-Binding-Proteine (SREBPs), die Expression von Genen f&uuml;r die Aufnahme und Synthese von Cholesterin und Fetts&auml;uren stimulieren. Von der Arbeit mit Saccharomyces Cerevisiae hat viel &uuml;ber Phosphoglyceride und Ergosterin Verordnung &uuml;ber Ino2p/Ino4p und Upc2p Transkriptionsfaktoren, bzw. erfahren wurde. Lipid-Versorgung ist durch eine Vielzahl von Gegenkopplung Schaltungen initiiert von End- und Zwischenprodukte der Lipid-Synthese-Bahnen abgestimmt. Dar&uuml;ber hinaus gibt es Hinweise, dass die Vielfalt der Membrane Lipide durch Kreuz-regulatorische Effekte, aufrechterhalten wird, wobei Klassen von Lipiden aktivieren die Aktivit&auml;t der Enzyme, die in einem anderen metabolischen Zweig t&auml;tig.

Article	Year
Cell biology. Fats, flies, and palmitate. Science (New York, N.Y.)\| PubMed ID: 11988558	2002
Real-time analysis of endosomal lipid transport by live cell scintillation proximity assay. Journal of lipid research\| PubMed ID: 15314094	2004
Modulation of endosomal cholesteryl ester metabolism by membrane cholesterol. The Journal of biological chemistry\| PubMed ID: 15657032	2005
Transcriptional regulation of phagocytosis-induced membrane biogenesis by sterol regulatory element binding proteins. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America\| PubMed ID: 16141315	2005
Differential requirements for actin polymerization, calmodulin, and Ca2+ define distinct stages of lysosome/phagosome targeting. Molecular biology of the cell\| PubMed ID: 16452628	2006
Immunoglobulin G signaling activates lysosome/phagosome docking. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America\| PubMed ID: 17110435	2006
A cell-free scintillation proximity assay for studies on lysosome-to-phagosome targeting. Science's STKE : signal transduction knowledge environment\| PubMed ID: 17595222	2007
Studying phagocytosis by live-cell scintillation proximity assay. Methods in molecular biology (Clifton, N.J.)\| PubMed ID: 18369943	2008
Identification of novel genes and pathways regulating SREBP transcriptional activity. PloS one\| PubMed ID: 19381295	2009
Coordination of lipid metabolism in membrane biogenesis. Annual review of cell and developmental biology\| PubMed ID: 19575637	2009

Axel Nohturfft

Biography

JoVE Journal Publications

Other Publications