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Silk Film Culture System for <em>in vitro</em> Analysis and Biomaterial Design

Silk films are promising protein-based biomaterials that can be fabricated with high fidelity and economically within a research laboratory environment ...

We have identified IC53-2, a human homologue of the rat C53 gene from a human placenta cDNA library (GeneBank Accession No.AF217982). IC53-2 can bind to the CDK5 activator p35 by in vitro association assay. IC53-2 is mapped to human chromosome 17q21.31. The IC53-2 transcript is highly expressed in kidney, liver, skeletal muscle and placenta. It is abundantly expressed in SMMC-7721, C-33A, 3AO, A431 and MCF-7 cancer cell lines by RT-PCR assay. Stable transfection of IC53-2 cDNA into the hepatocellular carcinoma SMMC-7721 cell remarkably stimulates its growth in vitro. The above results indicate that IC53-2 is a novel human gene, which may be involved in the regulation of cell proliferation.

Cloning and characterization of human IC53-2, a novel CDK5 activator binding protein.

Klonierung und Charakterisierung von menschlichen IC53-2, a novel CDK5 Aktivator-bindendes Protein.

To successfully induce tissue repair or regeneration in vivo, bioengineered constructs must possess both optimal bioactivity and mechanical strength. This is because cell interaction with the extracellular matrix (ECM) produces two different but concurrent signaling mechanisms: ligation-induced signaling, which depends on ECM biological stimuli, and traction-induced signaling, which depends on ECM mechanical stimuli. In this report, we provide a fundamental understanding of how alterations in mechanical stimuli alone, produced by varying the viscoelastic properties of our bioengineered construct, modulate phenotypic behavior at the whole-cell level. Using a physiologically relevant ECM mimic composed of hyaluronan and fibronectin, we found that adult human dermal fibroblasts modify their mechanical response in order to match substrate stiffness. More specifically, the cells on stiffer substrates had higher modulus and a more stretched and organized actin cytoskeleton (and vice versa), which translated into larger traction forces exerted on the substrate. This modulation of cellular mechanics had contrasting effects on migration and proliferation, where cells migrated faster on softer substrates while proliferating preferentially on the stiffer ones. These findings implicate substrate rigidity as a critical design parameter in the development of bioengineered constructs aimed at eliciting maximal cell and tissue function.

Cell adaptation to a physiologically relevant ECM mimic with different viscoelastic properties.

Um die Reparatur von Gewebe oder Regenerierung in-vivo erfolgreich zu induzieren, m&uuml;ssen biotechnologisch Konstrukte optimale Bioaktivit&auml;t und mechanische Festigkeit besitzen. Dies ist da Zelle Interaktion mit der extrazellul&auml;ren Matrix (ECM) zwei unterschiedliche, aber gleichzeitige Signalisierungsmechanismen erzeugt: Ligaturen induziert signalisieren, welche h&auml;ngt von ECM biologische Reize und Traktion-induzierte signalisieren, die h&auml;ngt von ECM mechanische Reize. In diesem Bericht stellen wir ein grundlegendes Verst&auml;ndnis von, wie &Auml;nderungen in mechanische Reize allein durch Variation der Viskoelastische Eigenschaftendes unserer Konstrukt biotechnologisch hergestellten ph&auml;notypische Verhalten auf ganz-Zellenebene modulieren. Mit einem physiologisch relevanten ECM-Nach&auml;ffer bestehend aus Hyalurons&auml;ure und Fibronektin, fanden wir, dass die Erwachsene menschliche dermale Fibroblasten ihre mechanische Reaktion &auml;ndern, um das Substrat Steifigkeit entsprechen. Genauer gesagt, die Zellen auf steifer Substraten hatte h&ouml;here e-Modul und eine st&auml;rker gedehnt und organisiert Aktin-Zytoskelett (und umgekehrt), die in gr&ouml;&szlig;ere Zugkraft Kr&auml;fte auf dem Substrat &uuml;bersetzt. Diese Modulation der zellul&auml;ren Mechanik hatten gegens&auml;tzliche Auswirkungen auf die Migration und Proliferation, wo migriert Zellen schneller auf weicheren Untergr&uuml;nden und vermehren sich bevorzugt auf den steifer. Diese Erkenntnisse implizieren Substrat Steifigkeit als kritisches Design Parameter bei der Entwicklung von biotechnologisch-Konstrukte, die darauf abzielen, technologieorientierter maximale Funktion von Zellen und Gewebe.

Zelle Anpassung an eine physiologisch relevanten ECM-Nach&auml;ffer mit verschiedenen viskoelastische Eigenschaften.

Diese Studie wurde entwickelt, um die Dihydrouracil (UH(2)) zu messen / Uracil (U)-Verh&auml;ltnis im Plasma als Surrogat-Marker f&uuml;r Dihydropyrimidin-Dehydrogenase (DPD)-Aktivit&auml;t und die Beziehungen der UH (2) / u-Verh&auml;ltnisse im Plasma mit der Toxizit&auml;ten von 5-Fluorouracil (5-FU)-basierte adjuvante Chemotherapie und 5-FU-Plasmakonzentrationen bei Darmkrebs-Patienten.

Die Dihydrouracil/Uracil-Verh&auml;ltnisse in Plasma und Toxizit&auml;ten auf der Basis von 5-Fluorouracil adjuvante Chemotherapie bei Darmkrebs-Patienten.

This study was designed to measure the dihydrouracil (UH(2))/uracil (U) ratio in plasma as a surrogate marker for dihydropyrimidine dehydrogenase (DPD) activity and to investigate the relationships of the UH(2)/U ratios in plasma with the toxicities of 5-fluorouracil (5-FU)-based adjuvant chemotherapy and 5-FU plasma concentrations in colorectal cancer patients.

The dihydrouracil/uracil ratios in plasma and toxicities of 5-fluorouracil-based adjuvant chemotherapy in colorectal cancer patients.

Wachstumsfaktor-Rezeptor gebundene Protein 2 (Grb2) ist ein ausgiebig studiert Adapterprotein beteiligt Zelle signalisieren. Grb2 ist ein hochflexibles Protein, bestehend aus einer einzelnen, flankiert von zwei SH3-Dom&auml;nen SH2-Dom&auml;ne. Das evolution&auml;r konservierte Serin/Threonin-Kinase, AMP-aktivierte Proteinkinase (AMPK), fungiert als eine zellul&auml;re Tankanzeige, die Stoffwechselwege in Glukose und Fetts&auml;ure-Stoffwechsel und Protein-Synthese regelt. AMPK reguliert die Aktivierung des TSC2 durch TSC2 PHOSPHORYLIEREND. Hier berichten wir zum ersten Mal auf der Wechselwirkung von Grb2 mit AMPK. SH2-Dom&auml;ne Grb2 und KIS-Dom&auml;ne des AMPK sind sowohl f&uuml;r die Kombination von Grb2 und AMPK erforderlich. Dar&uuml;ber hinaus Grb2 fungieren als ein Faktor, der Phosphorylierung von AMPK am Thr172 vermittelt und potenziell im Stoffwechsel-Wege und AMPK-TSC2-mTOR Zelle Wachstum Weg durch Regulierung der Aktivierungs von AMPK beinhaltet.

Die Funktion-Studie &uuml;ber die Wechselwirkung zwischen Grb2 und AMPK.

Growth factor receptor-bound protein 2 (Grb2) is an extensively studied adaptor protein involved in cell signaling. Grb2 is a highly flexible protein composed of a single SH2 domain flanked by two SH3 domains. The evolutionarily conserved serine/threonine kinase, AMP-activated protein kinase (AMPK), functions as a cellular fuel gauge that regulates metabolic pathways in glucose and fatty acid metabolism and protein synthesis. AMPK regulates the activation of TSC2 by phosphorylating TSC2. Here we report for the first time on the interaction of Grb2 with AMPK. SH2 domain of Grb2 and KIS domain of AMPK are both required for the combination of Grb2 and AMPK. Furthermore, Grb2 function as a factor which mediates phosphorylation of AMPK at Thr172, and potentially involves in metabolism pathways and AMPK-TSC2-mTOR cell growth pathway through regulating the activation of AMPK.

The function study on the interaction between Grb2 and AMPK.

The Bcl-2 family of proteins is the key regulators of cell apoptosis at the mitochondria level. The BH3-only pro-apoptotic member BclGs was unique among the family due to its highly specific expression in human testis and has been demonstrated to induce apoptosis dependent on the BH3 domain. However, the molecular mechanism of BclGs-induced apoptosis remains unclear. Here we show that overexpression of BclGs could induce Bax expression upregulation and translocation to mitochondria, cytochrome c release and activation of caspase-3. Moreover, we identified JAB1 as a novel BclGs-specific binding protein through a yeast two-hybrid screening in a human testis cDNA library. BclGs interacts with JAB1 both in vitro and in vivo. N-terminal region of BclGs (aa 1-67) was required for the interaction. Importantly, JAB1 and BclGs co-expression synergistically induces apoptosis. JAB1 could compete with Bcl-XL/Bcl-2 to bind to BclGs; thus, promote the apoptosis. RNAi-mediated knock-down of JAB1 results in the reduced proapoptotic activity of BclGs. Taken together, our results provided the first evidence that JAB1 is involved in the regulation of mitochondrial apoptotic pathway through specific interaction with BclGs.

JAB1 accelerates mitochondrial apoptosis by interaction with proapoptotic BclGs.

Die Familie Bcl-2 Proteine ist die wichtigen Regulatoren der Zelle Apoptosis Ebene der Mitochondrien. Das nur-BH3-Pro-apoptotischen Mitglied BclGs war einzigartig unter der Familie wegen seiner sehr spezifischen Ausdruck in menschliche Hoden und nachgewiesen um zu induzieren Apoptose der BH3-Dom&auml;ne abh&auml;ngig. Der molekulare Mechanismus der BclGs-induzierten Apoptose bleibt jedoch unklar. Hier zeigen wir, dass eine &Uuml;berexpression von BclGs veranlassen k&ouml;nnte, Bax Ausdruck Hochregulation und Translokation und Mitochondrien, Cytochrom-C-Freisetzung und Aktivierung von Caspase-3. Dar&uuml;ber hinaus haben wir JAB1 als Roman BclGs-spezifische verbindliches Protein durch ein Hefe-zwei-Hybrid-Screening in einer menschlichen Hoden cDNA Bibliothek identifiziert. BclGs interagiert mit JAB1 in vitro und in vivo. N-terminalen Region BclGs (aa 1-67) war f&uuml;r die Interaktion erforderlich. Wichtiger ist, induziert JAB1 und BclGs Koexpression synergistisch Apoptosis. JAB1 konnte im Wettbewerb mit Bcl-XL/Bcl-2 an BclGs gebunden; So f&ouml;rdern Sie die Apoptose. RNAi-vermittelte Knock-Down von JAB1 f&uuml;hrt der reduzierte Proapoptotischen Aktivit&auml;t des BclGs. zusammengenommen, unsere Ergebnisse zur Verf&uuml;gung gestellt des ersten Beweis, dass JAB1 bei der Regulierung der mitochondrialen Apoptotic Weg durch spezifische Interaktion mit BclGs beteiligt ist.

JAB1 beschleunigt die mitochondrialen Apoptose durch Interaktion mit Proapoptotischen BclGs.

The Ras-MAPK and PI3K-AKT pathways are conserved in metazoan organisms, which involve a series of signaling cascades and form the basis for numerous physiological and pathological processes. Here we report on yeast two hybrid screening results of a protein interaction network around the known components of human Ras-MAPK/PI3K pathways. A total of 42 independent cDNA library screenings resulted in 200 protein-protein interaction (PPI) pairs among 180 molecules. Most of the proteins formed a large cluster that contains 193 PPIs between 169 proteins. Seventy-four interactions indicate high-confidence according to bioinformatics analysis. The prey list contains high enrichment genes with specific Gene Ontology (GO) terms such as response to stress and response to external stimulus. Most interactions link the Ras signaling pathway with various cellular processes. Five interactions were validated by coimmunoprecipitation and colocalization assays in mammalian cells to confirm their in vivo interactions. This protein interaction network provides further insights into the molecular mechanism of Ras-MAPK/PI3K signaling pathways.

Protein interaction data set highlighted with human Ras-MAPK/PI3K signaling pathways.

Die Ras-MAPK und PI3K-AKT-Wege sind konserviert, indem Organismen, die eine Reihe von Kaskaden Signalisierung umfassen und bilden die Grundlage f&uuml;r zahlreiche physiologische und pathologische Prozesse. Hier berichten wir &uuml;ber Hefe zwei Hybrid screening Ergebnisse ein Protein-Interaktion-Netzwerk rund um die bekannten Komponenten der menschlichen Ras-MAPK/PI3K-Bahnen. Insgesamt 42 unabh&auml;ngige cDNA Bibliothek Vorf&uuml;hrungen lieferte 200 Protein-Protein Interaktion (PPI) Paare unter 180 Molek&uuml;le. Die meisten Proteine, bildete eine gro&szlig;e Gruppe, die 193 EPI zwischen 169 Proteine enth&auml;lt. Vierundsiebzig Wechselwirkungen zeigen hohe-Vertrauen nach Bioinformatik-Analyse. Die Beute-Liste enth&auml;lt hohe Anreicherung Gene mit spezifischen Gene Ontology (GO) Begriffe wie Stressbew&auml;ltigung und Reaktion auf &auml;u&szlig;eren Reiz. Die meisten Interaktionen verkn&uuml;pfen die Ras Signalisierung Weg mit verschiedenen zellul&auml;ren Prozesse. F&uuml;nf Interaktionen wurden validiert durch Coimmunoprecipitation und Kolokalisation Assays in den S&auml;ugetier-Zellen, ihre in-vivo-Interaktionen zu best&auml;tigen. Dieses Protein-Interaktion-Netzwerk bietet weitere Einblicke in die molekularen Mechanismen der Ras-MAPK/PI3K Signalwege.

Protein Interaktion-Datensatz mit menschlichen Ras-MAPK/PI3K Signalwege hervorgehoben.

The effects of exposure of human dermal fibroblasts to rutile and anatase TiO(2) nanoparticles are reported. These particles can impair cell function, with the latter being more potent at producing damage. The exposure to nanoparticles decreases cell area, cell proliferation, mobility, and ability to contract collagen. Individual particles are shown to penetrate easily through the cell membrane in the absence of endocytosis, while some endocytosis is observed for larger particle clusters. Once inside, the particles are sequestered in vesicles, which continue to fill up with increasing incubation time till they rupture. Particles coated with a dense grafted polymer brush are also tested, and, using flow cytometry, are shown to prevent adherence to the cell membrane and hence penetration of the cell, which effectively decreases reactive oxygen species (ROS) formation and protects cells, even in the absence of light exposure. Considering the broad applications of these nanoparticles in personal health care products, the functionalized polymer coating can potentially play an important role in protecting cells and tissue from damage.

Adverse effects of titanium dioxide nanoparticles on human dermal fibroblasts and how to protect cells.

Die Auswirkungen der Gef&auml;hrdung der menschlichen dermalen Fibroblasten Rutil Anatas TiO(2) Nanopartikel werden gemeldet. Diese Teilchen k&ouml;nnen die Zelle-Funktion, wobei der letztere st&auml;rker auf die Herstellung von Sch&auml;den beeintr&auml;chtigen. Die Exposition mit Nanopartikeln verringert Zellfl&auml;che, Zellproliferation, Mobilit&auml;t und F&auml;higkeit, Kollagen Vertrag. Einzelnen Partikel sind leicht durch die Zellmembran in Ermangelung der Endozytose, einzudringen, w&auml;hrend einige Endozytose f&uuml;r gr&ouml;&szlig;ere Partikel Cluster beobachtet wird angezeigt. Einmal sind die Teilchen im Inneren, in Vesikeln, Kohlenstoff, die weiterhin f&uuml;llen sich mit zunehmender Inkubationszeit, bis sie aufbrechen. Partikeln beschichtet mit einem dichten Aufgepfropfte Polymer-Pinsel werden auch getestet, und mit Hilfe der Durchflusszytometrie, werden gezeigt, um zu verhindern, dass die Einhaltung der Zellmembran und somit Eindringen in die Zelle, die effektiv verringert reaktive Sauerstoff Spezies (ROS) Bildung und sch&uuml;tzt Zellen, sogar in Ermangelung der Lichtexposition. In Anbetracht der breiten Anwendungen diese Nanopartikel in pers&ouml;nlichen health care Produkte spielt die funktionalisierten Polymer-Beschichtung potenziell eine wichtige Rolle beim Schutz der Zellen und Gewebe vor Sch&auml;den.

Sch&auml;dliche Auswirkungen von Titandioxid-Nanopartikeln auf menschlichen dermalen Fibroblasten und Zellen zu sch&uuml;tzen.

Cellular traction forces, resulting in cell-substrate physical interactions, are generated by actin-myosin complexes and transmitted to the extracellular matrix through focal adhesions. These processes are highly dynamic under physiological conditions and modulate cell migration. To better understand the precise dynamics of cell migration, we measured the spatiotemporal redistribution of cellular traction stresses (force per area) during fibroblast migration at a submicron level and correlated it with nuclear translocation, an indicator of cell migration, on a physiologically relevant extracellular matrix mimic. We found that nuclear translocation occurred in pulses whose magnitude was larger on the low ligand density surfaces than on the high ligand density surfaces. Large nuclear translocations only occurred on low ligand density surfaces when the rear traction stresses completely relocated to a posterior nuclear location, whereas such relocation took much longer time on high ligand density surfaces, probably due to the greater magnitude of traction stresses. Nuclear distortion was also observed as the traction stresses redistributed. Our results suggest that the reinforcement of the traction stresses around the nucleus as well as the relaxation of nuclear deformation are critical steps during fibroblast migration, serving as a speed regulator, which must be considered in any dynamic molecular reconstruction model of tissue cell migration. A traction gradient foreshortening model was proposed to explain how the relocation of rear traction stresses leads to pulsed fibroblast migration.

Traction stresses and translational distortion of the nucleus during fibroblast migration on a physiologically relevant ECM mimic.

Zellul&auml;re Traktion Kr&auml;fte, was zu Zell-Substrat physikalischen Interaktionen, generiert durch Aktin-Myosin-komplexe und an der extrazellul&auml;ren Matrix durch fokale Adh&auml;sionen &uuml;bertragen. Diese Prozesse sind hochdynamische unter physiologischen Bedingungen und Zellmigration modulieren. Um die genaue Dynamik der Zellmigration besser zu verstehen, wir die raumzeitliche Umverteilung der zellul&auml;ren Traktion Spannungen (Kraft pro Fl&auml;che) w&auml;hrend der Migration der Fibroblasten auf Submikron Ebene gemessen und es mit nuklearen Translokation, ein Indikator f&uuml;r die Zellwanderung auf eine physiologisch relevanten extrazellul&auml;ren Matrix-Nach&auml;ffer. Wir fanden, dass diese nukleare Translokation in Impulsen aufgetreten sind, deren Ausma&szlig; auf die niedrigen Ligand Dichte Oberfl&auml;chen als auf den hohen Ligand Dichte Fl&auml;chen gr&ouml;&szlig;er war. Gro&szlig;e nukleare Translokationen trat nur auf niedrige Ligand Dichte Oberfl&auml;chen bei der hinteren Traktion betont komplett in einer hinteren nukleare Lage verlegt w&auml;hrend solche Verlagerung viel l&auml;ngere Zeit auf hohe Ligand Dichte Oberfl&auml;chen, wahrscheinlich aufgrund gr&ouml;&szlig;erer Tragweite der Traktion Spannungen nahmen. Nukleare Verzerrung wurde auch als die Traktion betont verteilt beobachtet. Unsere Ergebnisse legen nahe, dass die Verst&auml;rkung des Traktion Spannungen um den Atomkern sowie die Lockerung der nuklearen Verformung sind wichtige Schritte bei der Fibroblast Migration als ein Geschwindigkeitsregler, die in jedem Modell dynamische Molekulare Wiederaufbau Gewebe Zelle Migration ber&uuml;cksichtigt werden muss. Ein Farbverlauf Verk&uuml;rzungen Traktion-Modell wurde vorgeschlagen, zu erkl&auml;ren, wie die Verlagerung der hinteren Traktion Spannungen zu gepulsten Fibroblast Migration f&uuml;hrt.

Traktion betont und translational Verzerrung des Kerns bei der Migration der Fibroblasten auf eine physiologisch relevanten ECM-Nach&auml;ffer.

The purpose of this paper is to investigate logistics activities in Singapore hospitals. It defines various types of activities handled by a logistics division. Inventory management policy and the use of information and communication technologies (ICT) for logistics purposes are also discussed. The study identifies the nature of strategic alliances in Singapore's health care industry.

Logistics in hospitals: a case study of some Singapore hospitals.

Ziel dieses Beitrages ist Logistik-Aktivit&auml;ten in Singapur Krankenh&auml;usern untersuchen. Es definiert die verschiedenen Arten von T&auml;tigkeiten, die von einem Unternehmensbereich Logistik behandelt. Inventar-Management-Richtlinien und die Verwendung von Informations- und Kommunikationstechnologien (IKT) f&uuml;r Zwecke der Logistik werden ebenfalls behandelt. Die Studie identifiziert die Art der strategische Allianzen in Singapurs Gesundheitspflegeindustrie.

Logistik in Krankenh&auml;usern: eine Fallstudie &uuml;ber einige Krankenh&auml;user von Singapur.

Fibronectin (FN) is required for embryogenesis, morphogenesis, and wound repair, and its Arg-Gly-Asp-containing central cell-binding domain (CCBD) is essential for mesenchymal cell survival and growth. Here, we demonstrate that FN contains three growth factor-binding domains (FN-GFBDs) that bind platelet-derived growth factor-BB (PDGF-BB), a potent fibroblast survival and mitogenic factor. These sites bind PDGF-BB with dissociation constants of 10-100 nM. FN-null cells cultured on recombinant CCBD (FNIII(8-11)) without a FN-GFBD demonstrated minimal metabolism and underwent autophagy at 24 hours, followed by apoptosis at 72 hours, even in the presence of PDGF-BB. In contrast, FN-null cells plated on FNIII(8-11) contiguous with FN-GFBD survived without, and proliferated with, PDGF-BB. FN-null cell survival on FNIII(8-11) and noncontiguous arrays of FN-GFBDs required these domains to be adsorbed on the same surface, suggesting the existence of a mesenchymal cell-extracellular matrix synapse. Thus, fibroblast survival required GF stimulation in the presence of a FN-GFBD, as well as adhesion to FN through the CCBD. The findings that fibroblast survival is dependent on FN-GFBD underscore the critical importance of pericellular matrix for cell survival and have significant implications for cutaneous wound healing and regeneration.

Fibronectin growth factor-binding domains are required for fibroblast survival.

Fibronektin (FN) ist erforderlich f&uuml;r die Embryogenese, Morphogenese und Wunde Reparatur und seine Arg-Gly-Asp-haltigen zentrale Zelle-bindende Dom&auml;ne (CCBD) f&uuml;r Mesenchymale Zellen &uuml;berleben und Wachstum unerl&auml;sslich. Hier zeigen wir, dass FN drei Wachstumsfaktor bindenden Dom&auml;nen (FN-GFBDs) enth&auml;lt, die Platelet derived Growth Factor-BB (PDGF-BB), ein potenter Fibroblast &uuml;berleben und mitogenen Faktor zu binden. Dieser Sites binden PDGF-BB Dissoziation Konstanten von 10-100 nM. FN-Null-Zellen kultiviert auf rekombinante CCBD (FNIII(8-11)) ohne eine FN-GFBD minimalen Stoffwechsel zeigte und unterzog sich Autophagy bei 24 Stunden, gefolgt von Apoptosis 72 Stunden, auch in Gegenwart von PDGF-BB. Im Gegensatz dazu FN-Null Zellen plattiert auf FNIII(8-11) mit FN-GFBD &uuml;berlebte ohne und mit PDGF-BB vermehren. FN-Null-Zelle &Uuml;berleben auf FNIII(8-11) und nicht zusammenh&auml;ngende Arrays von FN-GFBDs ben&ouml;tigt, diese Dom&auml;nen, die auf der gleichen Oberfl&auml;che, was auf die Existenz einer mesenchymal Zelle-extrazellul&auml;ren Matrix-Synapse adsorbiert werden. Fibroblast &uuml;berleben ben&ouml;tigt somit GF Stimulierung in Anwesenheit einer FN-GFBD sowie Haftung auf FN durch die CCBD. Die Ergebnisse, dass Fibroblasten &uuml;berleben FN-GFBD abh&auml;ngt unterstreichen die entscheidende Bedeutung von Pericellular Matrix f&uuml;r Zelle &uuml;berleben und haben erhebliche Auswirkungen auf die kutane Wundheilung und Regeneration.

Fibronektin Wachstumsfaktor bindenden Dom&auml;nen sind f&uuml;r Fibroblasten &uuml;berleben erforderlich.

Kalzium, ein wichtiger Regulator der Zelle &uuml;berleben, ist auch wichtig bei der Regulierung der Apoptose. Obwohl das Chemotherapeutikum Taxol Apoptose zu Zelltod induzieren besch&auml;ftigt, ist der genaue Mechanismus der wie es Apoptose und die Rolle von Kalzium dabei induziert unklar. Das wichtigsten intrazellul&auml;ren Calcium-Lagerhaus, dem Endoplasmatischen Retikulum, wurde als neue wichtige Gateway in Apoptosis, identifiziert m&ouml;glicherweise ein Ziel f&uuml;r Taxol. Das Ziel dieser Studie war zu untersuchen, ob Kalzium-&Auml;nderungen mit dem Endoplasmatischen Retikulum verbunden wurden direkt oder indirekt durch generiert Taxol in klinisch relevanten Dosierungen mit Bezug zu Taxol-induzierten Apoptose in Brustkrebs-Zellen Zeit verfallen Bildgebungsverfahren, gefolgt von einem Endoplasmatisches Reticulum ausgerichtete Konstrukt, Cameleon D1ER, wurden zur Zytosol--Endoplasmatisches Reticulum Kalzium Dynamik im MDA-MB-468 (Bcl-2 negativ) und MCF-7 (Bcl-2-positiven) Brust-Karzinom-Zellen eingesetzt. Apoptose wurden mit Annexin V und Propidium Jodid (PI) mit Durchflusszytometrie gemessen. In beiden Zelllinien wurde Taxol bei 2.5&mu;M (&sim;10(-6) M) beobachtet, um erhebliche interne Kalzium &Auml;nderungen, erste hervorzurufen, die eine schnelle Endoplasmatisches Reticulum-Kalzium-Version und eine vor&uuml;bergehende cytosolic Kalzium nach Taxol Zusatz zu erh&ouml;hen. Nach mehreren Stunden Taxol Behandlung im endoplasmatischen Reticulum-Kalzium-Store wurde allm&auml;hlich ersch&ouml;pft und eine nachhaltige cytosolic Kalzium-Erhebung wurde vor erheblichen Induktion von Apoptose beobachtet. Hemmung dieser &Auml;nderungen Kalzium verringert Taxol-induzierten Apoptose-Ebenen. Im Gegensatz dazu 0.2&mu;M Taxol (&sim;10(-7)M) induziert nur eine leichte zellul&auml;re Kalzium-Ver&auml;nderung, nicht genug, um Apoptosis zu regulieren. Unsere Ergebnisse zeigen, dass Endoplasmatisches Reticulum Kalzium speichert das unmittelbare Ziel Taxol-Aktion und sind wichtig f&uuml;r die Induktion von Apoptose, unabh&auml;ngig von Bcl-2-Status. Dar&uuml;ber hinaus zeigen unsere Ergebnisse zum ersten Mal, dass die Rolle von Kalzium im endoplasmatischen Reticulum-vermittelter Apoptose induziert durch Taxol Taxol Dosierung abh&auml;ngig ist.

Taxol induziert direkt Endoplasmatisches Reticulum-assoziierte Kalzium-&Auml;nderungen, die Apoptose in Brustkrebszellen f&ouml;rdern.

Calcium, a key regulator of cell survival, is also important in regulating apoptosis. Although the chemotherapeutic agent Taxol employs apoptosis to induce cell death, the exact mechanism of how it induces apoptosis and the role of calcium in this process remains unclear. The main intracellular calcium storehouse, the endoplasmic reticulum, was identified as a new important gateway in apoptosis, possibly providing a target for Taxol. The goal of this study was to investigate whether calcium changes associated with the endoplasmic reticulum, were directly or indirectly generated by Taxol at clinically relevant doses, and related to Taxol-induced apoptosis in breast cancer cells. Time-lapsed imaging techniques followed by an endoplasmic reticulum-targeted construct, cameleon D1ER, were used to monitor cytosol--endoplasmic reticulum calcium dynamics in MDA-MB-468 (Bcl-2 negative) and MCF 7 (Bcl-2 positive) breast carcinoma cells. Apoptosis levels were measured with Annexin V and Propidium Iodide (PI) using flow cytometry. In both cell lines, Taxol at 2.5Î¼M (âˆ¼10(-6) M) was observed to induce significant internal calcium changes, first a rapid endoplasmic reticulum calcium release and a transient cytosolic calcium increase upon Taxol addition. After several hours of Taxol treatment, the endoplasmic reticulum calcium store was gradually depleted, and a sustained cytosolic calcium elevation was observed before significant induction of apoptosis. Inhibition of these calcium changes decreased Taxol-induced apoptosis levels. In contrast, 0.2Î¼M Taxol (âˆ¼10(-7)M) induced only a slight cellular calcium change, not enough to regulate apoptosis. Our findings demonstrate that endoplasmic reticulum calcium stores provide a direct target for Taxol action and are important for induction of apoptosis, independent of Bcl-2 status. Furthermore, our results show for the first time, that the role of calcium in Taxol-induced endoplasmic reticulum-mediated apoptosis is dependent on Taxol dosage.

Taxol directly induces endoplasmic reticulum-associated calcium changes that promote apoptosis in breast cancer cells.

Untersuchen die Beziehung der Leberenzyme mit Hyperglyk&auml;mie in einer gro&szlig;en Population in Shanghai und identifizieren die Zuordnung zwischen Leberenzyme und Insulinresistenz.

Konzentrationen der Leberenzyme sind eng verwandt mit Prediabetes: Ergebnisse der Shanghai-Diabetes-Studie II (SHDS II).

To investigate the relationship of liver enzymes with hyperglycemia in a large population in Shanghai and identify the association between liver enzymes and insulin resistance.

Article	Year
Cloning and characterization of human IC53-2, a novel CDK5 activator binding protein. Cell research\| PubMed ID: 12737517	2003
Cell adaptation to a physiologically relevant ECM mimic with different viscoelastic properties. Biomaterials\| PubMed ID: 17049594	2007
The dihydrouracil/uracil ratios in plasma and toxicities of 5-fluorouracil-based adjuvant chemotherapy in colorectal cancer patients. Chemotherapy\| PubMed ID: 17308379	2007
The function study on the interaction between Grb2 and AMPK. Molecular and cellular biochemistry\| PubMed ID: 17849173	2008
JAB1 accelerates mitochondrial apoptosis by interaction with proapoptotic BclGs. Cellular signalling\| PubMed ID: 18006276	2008
Protein interaction data set highlighted with human Ras-MAPK/PI3K signaling pathways. Journal of proteome research\| PubMed ID: 18624398	2008
Adverse effects of titanium dioxide nanoparticles on human dermal fibroblasts and how to protect cells. Small (Weinheim an der Bergstrasse, Germany)\| PubMed ID: 19197964	2009
Traction stresses and translational distortion of the nucleus during fibroblast migration on a physiologically relevant ECM mimic. Biophysical journal\| PubMed ID: 19450499	2009
Logistics in hospitals: a case study of some Singapore hospitals. Leadership in health services (Bradford, England)\| PubMed ID: 20690464	2007
Fibronectin growth factor-binding domains are required for fibroblast survival. The Journal of investigative dermatology\| PubMed ID: 20811396	2011
Taxol directly induces endoplasmic reticulum-associated calcium changes that promote apoptosis in breast cancer cells. The breast journal\| PubMed ID: 21073601	2011
Liver Enzymes Concentrations Are Closely Related to Prediabetes: Findings of the Shanghai Diabetes Study II (SHDS II). Biomedical and environmental sciences : BES\| PubMed ID: 22424624	2012

Zhi Pan

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