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Method for the Isolation and Identification of mRNAs, microRNAs and Protein Components of Ribonucleoprotein Complexes from Cell Extracts using RIP-Chip

As a result of the development of high-throughput sequencing and efficient microarray analysis, global gene expression analysis has become an easy and ...

Analysis of IgE-binding allergens in Culex quinquefasciatus saliva protein in mosquito bite allergic patients.

Analyse der IgE-Bindung Allergene in Culex Quinquefasciatus Speichel Protein in Moskito Bissen allergischen Patienten.

The hospital records of 213 outpatients from Bangkok, Thailand, infected with Strongyloides stercoralis as determined by stool inspections were examined retrospectively for the different clinical presentations ascribed to patients with HIV, those with chronic illness, those who used immunosuppressant drugs and relatively healthy subjects. For HIV patients with strongyloidiasis, the most common symptoms were chronic diarrhea, fever, persistent coughing and loss of weight, but only the first three symptoms were significantly different from other immunocompromised hosts. For healthy patients with strongyloidiasis, acute diarrhea and abdominal pain were the most frequent symptoms. Moreover, the peripheral eosinophil blood count was significantly lower (P=0.004) in the HIV patients than in any of the other subsets. Males were more common than females across all categories. While the average age of all subjects was 48.3+/-16.4 years, the strongyloidiasis patients with chronic illness were significantly older (56.8+/-13.5 years) than those in the other groups. This study may suggest that strongyloidiasis is commonly found in geriatric males, and that the patients most at risk for S. stercoralis infection are HIV patients. This is the first report of the different clinical presentations of intestinal strongyloidiasis in various groups of patients with impaired immunity.

Immunocompromised group differences in the presentation of intestinal strongyloidiasis.

Die Krankenhaus-Datens&auml;tze von 213 ambulant aus Bangkok, Thailand, infiziert mit Zwergfadenw&uuml;rmern Strongyloides, festgelegt durch Hocker Inspektionen wurden r&uuml;ckwirkend untersucht, f&uuml;r die verschiedenen klinischen Pr&auml;sentationen zugeschrieben Patienten mit HIV, chronische Krankheit, wer Immunsuppressiva und relativ gesunden Probanden verwendet. F&uuml;r HIV-Patienten mit Strongyloidiasis die h&auml;ufigsten Symptome sind chronischer Durchfall, Fieber, anhaltende Husten und Gewichtsverlust, aber nur die ersten drei Symptome waren wesentlich von anderen immungeschw&auml;chten Gastgeber. Bei gesunden Patienten mit Strongyloidiasis waren akuten Durchfall und Bauchschmerzen die h&auml;ufigsten Symptome. Dar&uuml;ber hinaus die peripheren Eosinophil Blutbild deutlich niedriger war (P = 0,004) in der HIV-Patienten als in jedem anderen Untergruppen. In allen Kategorien waren M&auml;nner h&auml;ufiger als Frauen. W&auml;hrend das Durchschnittsalter aller Fachgebiete 48.3+/-16.4 Jahre war, waren die Strongyloidiasis Patienten mit chronischen Krankheiten deutlich &auml;lter (56,8 +/-13,5 Jahre) als in den anderen Gruppen. Diese Studie kann vorschlagen, dass Strongyloidiasis findet sich h&auml;ufig in geriatrischen M&auml;nner, und dass die Patienten am meisten gef&auml;hrdeten f&uuml;r S. Zwergfadenw&uuml;rmern Infektion HIV-Patienten. Dies ist der erste Bericht der verschiedenen klinischen Pr&auml;sentationen der intestinale Strongyloidiasis in verschiedene Gruppen von Patienten mit gest&ouml;rter Immunit&auml;t.

Immungeschw&auml;chten Gruppe Unterschiede in der Darstellung des intestinale Strongyloidiasis.

Der Apicomplexan Parasiten Cryptosporidium ist eine bedeutende Ursache von Durchfallerkrankungen Krankheit weltweit. Zuvor berichteten wir, dass eine Cryptosporidium Parvum Subtilisin-wie Serin-Protease-Aktivit&auml;t mit Furin-Typ Spezifit&auml;t Splei&szlig;ungen gp40/15, ein Glykoprotein, das spaltet verarbeitet wird, in gp40 und gp15, die bei der Vermittlung von Infektion der Wirtszellen verwickelt sind. Weder der Enzyme(s) verantwortlich f&uuml;r die Protease-Aktivit&auml;t im C. Parvum Lysates, noch diejenigen, die gp40/15 zu verarbeiten sind bekannt. Es gibt keine Furin oder andere proprotein-Konvertase-Gene in das Genom von C. Parvum. Ein Gen, das f&uuml;r CpSUB1, ist ein Subtilisin-&auml;hnlichen Serinproteasen jedoch vorhanden. In dieser Studie genomische Sequenz CpSUB1 geklont und ausgedr&uuml;ckt und die rekombinante prodomain gereinigt. Reverse Transkriptase-PCR-Analyse von RNA aus C. Parvum-infizierten HCT-8 Zellen ergab, dass im gesamten Infektion in-vitro-CpSUB1 ausgedr&uuml;ckt wird. Immunoblots offenbarte Antiserum zu den rekombinanten CpSUB1 prodomain zwei gro&szlig;e Bands, von etwa 64 kDa und etwa 48 kDa, C. Parvum Lysates und Proteine &quot;Schuppen&quot;, w&auml;hrend Excystation. Immunofluoreszenz Proben reagierte das Antiserum mit der apikalen Region Sporozoites und Merozoiten. Die rekombinanten prodomain gehemmt Protease-Aktivit&auml;t und die Verarbeitung von rekombinanten gp40/15 von C. Parvum Lysates aber nicht von Furin. Da Prodomains oft selektive Inhibitoren ihre Verwandten Enzyme sind, diese Ergebnisse weisen darauf hin, dass CpSUB1 m&ouml;glicherweise ein aussichtsreicher Kandidat f&uuml;r die Protease-Aktivit&auml;t im C. Parvum und f&uuml;r die Verarbeitung von gp40/15. Wichtig ist, hemmte die rekombinante prodomain C. Parvum Infektion der HCT-8 Zellen. Diese Studien zeigen, dass CpSUB1 spielt eine bedeutende Rolle in der Infektion der Wirtszellen durch den Parasiten und schlagen vor, da&szlig; dieses Enzyms als Ziel f&uuml;r Intervention dienen kann.

Rolle des CpSUB1, eine Protease Subtilisin-wie Cryptosporidium Parvum Infektion in-vitro.

The apicomplexan parasite Cryptosporidium is a significant cause of diarrheal disease worldwide. Previously, we reported that a Cryptosporidium parvum subtilisin-like serine protease activity with furin-type specificity cleaves gp40/15, a glycoprotein that is proteolytically processed into gp40 and gp15, which are implicated in mediating infection of host cells. Neither the enzyme(s) responsible for the protease activity in C. parvum lysates nor those that process gp40/15 are known. There are no furin or other proprotein convertase genes in the C. parvum genome. However, a gene encoding CpSUB1, a subtilisin-like serine protease, is present. In this study, we cloned the CpSUB1 genomic sequence and expressed and purified the recombinant prodomain. Reverse transcriptase PCR analysis of RNA from C. parvum-infected HCT-8 cells revealed that CpSUB1 is expressed throughout infection in vitro. In immunoblots, antiserum to the recombinant CpSUB1 prodomain revealed two major bands, of approximately 64 kDa and approximately 48 kDa, for C. parvum lysates and proteins "shed" during excystation. In immunofluorescence assays, the antiserum reacted with the apical region of sporozoites and merozoites. The recombinant prodomain inhibited protease activity and processing of recombinant gp40/15 by C. parvum lysates but not by furin. Since prodomains are often selective inhibitors of their cognate enzymes, these results suggest that CpSUB1 may be a likely candidate for the protease activity in C. parvum and for processing of gp40/15. Importantly, the recombinant prodomain inhibited C. parvum infection of HCT-8 cells. These studies indicate that CpSUB1 plays a significant role in infection of host cells by the parasite and suggest that this enzyme may serve as a target for intervention.

Article	Year
Analysis of IgE-binding allergens in Culex quinquefasciatus saliva protein in mosquito bite allergic patients. Annals of allergy, asthma & immunology : official publication of the American College of Allergy, Asthma, & Immunology\| PubMed ID: 17304892	2007
Immunocompromised group differences in the presentation of intestinal strongyloidiasis. Japanese journal of infectious diseases\| PubMed ID: 18219126	2008
Role of CpSUB1, a subtilisin-like protease, in Cryptosporidium parvum infection in vitro. Eukaryotic cell\| PubMed ID: 19168760	2009

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