利用视动反应研究斑马鱼的视觉功能

大家好。我叫Mean Jing，来自中国科学技术大学。众所周知，视动反应（Opto kinetic response，简称OKR）是一种行为测试，指动物通过移动眼睛来跟随移动的光栅图案。

围绕它游动。这种行为已被广泛用于评估幼年斑马鱼的视觉功能。

然而，使用标准的固定方法对幼鱼进行固定并不适用于成年鱼。因此在本视频中，我们将向您展示一种新的固定方法，使得记录成年鱼OKR成为可能。同时，为了对比，我们还将演示幼鱼的OKR检测以及成年鱼的OMR检测。

而 OMR 指的是运动反应。现在我将向您展示我们定制的 OKR 应用界面，看起来不错吧？

在此装置中，有一个由电机驱动的光栅底座。光栅管放置在该光栅底座上，并随其一同旋转。光栅底座上方覆盖有一块腔室板，该腔室板不旋转，同时使用一个环形灯对光栅进行照明。

就是这样。只需将鱼皿放在皿板上，我们就可以开始了。大家好，我是 Sui。

大家好，我是W。我们在中国台湾的USPC从事神经发育和ELL方面的研究。今天我们将向大家展示斑马鱼的高通量筛选实验。好的，我们开始吧。

首先，我们将向您展示如何对成年斑马鱼进行OKR测试。现在将海绵放入鱼缸中，并倒入一些水。轻轻挤压海绵以排出其中的气泡。

现在我们将逐步向您展示如何使用大头针固定鱼类标本。首先轻轻摆动鱼体，确保其背鳍向上，拉直尾部使鱼体呈直线。使用动脉夹固定尾鳍，并用油泥将动脉夹固定在观察室内。

固定后，向腔室中倒入更多的水，并向鱼吹入一些水以使其苏醒。现在我们终于完成了准备工作，可以开始真正的实验了，即OKR测试。

请注意，屏幕上方的两个物体仅仅是光栅在针头上的反射。现在让我们看看如何进行幼鱼OKR测试。我们将雄性和雌性鱼放入交配缸中，让它们产卵。

然后收集卵并将其转移到玻璃培养皿中。我们使用甲基纤维素溶液来固定幼鱼。该溶液在加热后必须迅速冷却。

因此，将其放入冰水中并轻轻摇晃，直至变得透明。现在将20毫升甲基纤维素放入培养皿中。确保溶液中无气泡。

将幼虫排成一行放入溶液中。在视野中加入一个微小的1 µL空气气泡，以便观察到分级的反射。这就是野生型斑马鱼幼虫OKR行为的演示。

最后，我们将向您展示如何对成年斑马鱼进行 OMR 测试。首先，抓一条鱼并将其放入鱼 chamber 中。现在将鱼 chamber 放置到位。

然后在实验箱中央安装一个白色圆柱，以防止斑马鱼在测试前通过中心区域。最好让斑马鱼在此光照条件下适应一分钟。好了，这就是成年斑马鱼视动反应（OMR）测试的演示过程。

我们刚刚向您展示了如何在成年斑马鱼上进行OKR测试。在此测试中，我们尝试使用针具固定斑马鱼，而非甲基纤维素。通过该方法，我们成功记录到持续超过四小时的强烈反应。

这将为实验人员提供充足的时间。