明暗偏好测试：一种研究斑马鱼焦虑相关行为的方法

- 首先， 创建 a 三边的 封闭装置 左右 的 测试 面积 到 最小化 外部 刺激 那 可能 影响 鱼 行为 设置 向上 弥散 上方 照明 到 避免 水 表面 反射。 接下来， 填充 的 竞技场， 哪个 是 分割 进入 暗 和 光 区域, 与 栖息地 水 维持 在 28 度 摄氏度

放置 的 竞技场 在 的 封闭装置 保持 的 栖息地 储液罐-- 含有 鱼 到 是 测试—— 外部 的 封闭装置 让 的 鱼 适应环境 到 减少 他们的 应激

现在， 轻柔地 净 a 鱼 从 的 栖息地 储液罐 和 位置 它 在 的 测试 罐 位置 的 鱼 垂直的 到 的 长 侧面 的 的 竞技场 到 避免 偏差 朝向 或者 区域 观察 的 行为 的 的 鱼 使用 记录 软件 和 重复 的 测试 用于 的 休息 的 的 鱼 测量 的 平均值 时间 用过的 由 每个 鱼 在 的 光 和 暗 区域。

斑马鱼 趋势 到 花费 更多 时间 在 的 暗 区域 当 他们 是 焦虑的。 在 的 示例 方案 我们 将 执行 a 明暗 测试 到 观察 的 效应 的 乙醇 暴露 开启 斑马鱼 行为

- 获取 a 明暗 竞技场 9 和 1/2 厘米 宽视野 由 55 厘米 长 和 9 和 1/2 厘米 深 与 a 白色 防水 地面 固定 白色 和 黑色 防水的 非反射性 纸张 至 的 内部 壁 的 的 竞技场 使用 魔术贴， 与 一半 的 的 竞技场 覆盖 在 白色 和 一半 覆盖 在 黑色 填充 的 竞技场 至 a 深度 的 5 厘米 与 栖息地 水 在 a 温度 的 25 到 28 度 摄氏度 维持 这 温度 贯穿整个过程 测试。

最小化 外部 视觉 刺激 由 构建 a 白色 三边的 封闭装置 用于 这 竞技场 到 是 放置 英寸 确保 的 测试 面积 有 弥散 上方 照明 那 是否 不 导致 反射 开启 的 水 表面， 然而 是 足够地 明亮的 用于 的 运动 追踪 软件 或 事后检验 手动 定量分析 从 视频 图像 然后 设置 的 记录 和 运动 分析 参数 的 的 行为 追踪 软件 与 a 试验 持续时间 的 5 到 15 分钟， 取决于 在 的 研究 问题。

转运 的 组 的 鱼 到 是 测试 到 的 研究 面积 在 的 栖息地 储液罐 和 位置 它们 外部 的 的 竞技场 封闭装置 允许 的 鱼 到 适应 用于 10 分钟 轻柔地 净 a 鱼 从 的 适当的 组 和 位置 在 的 中心 的 的 明-暗 竞技场， 释放 每个 鱼 当 它 是 定位 平行 至 的 长 轴 的 的 竞技场 到 避免 偏置 的 鱼 到 的 光 或 暗 区域

开始 记录 行为 立即 之后 的 动物 是 释放。 观看 用于 任何 软件 问题 与 追踪 的 鱼 或 用于 鱼 跳跃 或 冷冻 之后 的 试验 具有 末端 轻柔地 净 和 移除 的 鱼 从 的 竞技场 到 a 持握 储液罐 或 栖息地 罐 旋转 的 竞技场 180 度 之后 一半 的 的 受试者 有 已经 测试 到 防止 任何 混杂因素 由于 到 偏差 导致 从 哪个 结束 的 的 竞技场 是 定向的 朝向 的 开放 结束 的 的 封闭装置

开始 分析 由 检测 的 时间 用过的 在 光 与 暗 区域。 对于 每个 组 和 用于 每个 鱼， 获得 的 相对的 时间 用过的 在 的 光 和 暗 区域 和 分析 使用 a 一 样本 t检验 到 确定 如果 组 显著地 优先 一 面积 结束 的 其他。 为了 比较 偏好 计算 a 偏好 索引 由 减去 的 时间 用过的 在 的 光 区域 从 的 时间 用过的 在 的 暗 区域 和 比较 差异 之间 组 使用 t检验 比较 多个 组 与 a 单向 分析 的 方差， 利用 图基法 诚实 显著的 差异 之后 临时的 测试 其中 必要时。