小鼠回肠环模型:一种用于研究小鼠肠道通透性的外科手术模型

0 次观看4:58 分钟 • July 8th, 2025

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在病理条件下,上皮和内皮屏障的破坏会增加肠道通透性,导致肠内容物渗漏至周围的血管系统和腹腔。可使用回肠袢模型来模拟肠道通透性。

首先,将小鼠麻醉并置于仰卧位。在腹部正中做一切口。用适当缓冲液浸湿的无菌棉纱布覆盖手术区域,以保持器官在手术过程中的湿润。

将回肠——肠道的远端部分——外置,并铺展于纱布上以暴露肠系膜。在回肠的肠系膜上选择两个间距适当且无重要血管穿行的结扎位点。随后穿刺肠系膜,在已确定的位点处施加结扎线。

接下来,解剖回肠以构建一个具有完整血液供应和肠系膜膜的隔离回肠袢。随后,向肠袢内注入适当的缓冲液以冲洗其中的废物内容物。

现在,结扎回肠袢的开放端。使用注射器将趋化因子(一种趋化性蛋白质悬液)注入肠袢内,使其膨胀。然后将器官放回腹腔。

缝合切口。让小鼠恢复。最终,趋化因子分子穿过回肠壁进入邻近的血管,引起炎症和白细胞浸润。

达到外科麻醉平面后,开始用酒精棉片或浸有70%乙醇的纱布海绵擦拭腹部中线的毛发。避免用酒精浸湿大面积毛发,以防低体温。使用剪刀行正中剖腹术。在腹部中部做一横向切口,暴露腹膜,注意不要损伤腹腔内器官。

将预先剪好的湿润棉纱布覆盖在暴露的腹腔上。使用湿润的棉签游离并外置盲肠,并小心地将其放置在湿润的棉纱布上。然后,游离并轻柔地外置回肠。在不破坏肠系膜血管和血液供应的情况下,将至少6厘米的末端回肠展平于湿润的棉纱布上。

始终用预热的HBSS保持暴露组织的湿润。在靠近盲肠的肠系膜处识别出供应回肠的主要动脉。然后,在肠系膜上找到两个无重要血管的结扎位点。用钝头组织镊牢固夹住回肠末端,用精细尖头镊子在肠系膜上开窗,注意避开血管。

将丝线缝合线穿过穿孔处并打外科结,完成第一处结扎。使用直尺测量距离第一处结扎4厘米的位置,进行第二处结扎。用精细剪刀在每处结扎旁小心剪断,以分离出一段4厘米长的回肠袢,同时保持血液供应及肠系膜完整。

使用连接在10毫升注射器上的柔软黄色喂养管,以温热的HBSS轻轻冲洗回肠袢段内容物。确保将管腔内容物冲洗出腹腔,以保持手术部位清洁。用丝线结扎已冲洗的回肠袢的两个切断端。

使用带有30号针头的1毫升注射器,缓慢向肠腔内注射250微升试剂(如FITC-葡聚糖或趋化因子)。回肠袢将膨胀,导致黏膜出现中度扩张。

使用持针器、解剖镊和带反向切割针的3.0不可吸收丝线缝合腹壁。将动物擦干以防止低体温后,将其放入温度可控的麻醉恢复舱中,进行孵育期观察。

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最后更新:22 八月 2026