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将麻醉后的大鼠固定于立体定位仪框架上,并暴露其颅骨。
大鼠颅骨上有一个钻孔,硬脑膜已被刺穿,颈部有切口,并在其胡须垫上连接了刺激电极。
将脑电图(EEG)蜘蛛电极用导电膏涂抹后固定在颅骨上,注意保持颅骨钻孔处清洁通畅。
蜘蛛电极用于测量表面脑电图(EEG),反映其下方皮层区域的整体神经元活动。
将线性多通道微电极安装到显微操作器上。
通过颅骨钻孔将微电极插入大脑皮层,深度达1500微米。
微电极测量局部场电位(LFP),反映皮层神经元活动。
将脑电图(EEG)和局部场电位(LFP)参考电极置于颈部切口内。
将记录电极和参考电极连接到与数据采集单元相连的前置放大器。
对胡须垫施加电刺激,并调整微电极的深度以最大化诱发出的局部场电位(LFP)幅度。记录共定位的脑电图(EEG)和局部场电位(LFP)信号。
在此步骤中,使用棉签清洁并擦干颅骨钻孔周围的区域。将导电脑电膏小心地涂抹在脑电蜘蛛电极的平坦一侧。在蜘蛛电极上留出一小块未涂脑电膏的区域,以便多层微电极穿过该区域时不会接触到脑电膏和蜘蛛电极。
将蜘蛛电极与颅骨上的钻孔对齐,使脑电膏面向颅骨。轻轻将蜘蛛电极按压至颅骨上,确保与颅骨牢固接触。 通过 脑电图导电膏
使用注射器上的针头清除遮挡钻孔的导电膏,并去除蜘蛛电极周边多余的脑电膏,使蜘蛛电极与颅骨的接触范围严格限制在电极大小范围内。然后,将脑电膏涂抹在脑电参考电极上,并将其牢固地置于大鼠颈部后方切口内。
接下来,将脑电图电极连接到前置放大器 通过 用于低阻抗信号的被动信号分路器。在此阶段,测试脑电图探头的电阻,确保其低于五千欧姆。若不符合要求,则需添加更多脑电图导电膏,并确保蜘蛛电极与颅骨良好接触。
随后,将显微操作臂安装到立体定位仪框架上。将一根线性16通道微电极连接至16通道急性头端放大器,并将其牢固地夹在显微操作臂上。然后,在微电极的参考电极上涂抹脑电图导电膏,再将其牢固地放置于脑电图参考电极附近的切口内。调整显微操作臂的角度,使微电极垂直于皮层表面。
现在,在显微镜下降低微电极,使微电极的尖端对准颅骨钻孔底部的小开口,直至最上方的电极刚好穿透皮层表面。必须注意避免将微电极强行压向硬脑膜表面,否则会损坏电极。
将微电极插入皮层表面,深度为1500微米。通过向胡须垫施加一串刺激,并在电脑显示器上观察16通道诱发电位局部场电位(LFP),从而微调插入深度。仔细旋转显微操作器的z轴旋钮,直至诱发电位局部场电位的幅度达到最高,此时电极位于皮层的第4层。