清醒大鼠运动皮层的经颅电刺激

从一只颅骨内植入螺丝的麻醉大鼠开始。

大鼠胸部植入了一个对侧电极，并通过皮下隧道式导线固定在颅骨嵌入螺钉中的一个上。

将电缆焊接到连接器上。

将经颅电刺激（tES）电极插座粘附于颅骨上运动皮层上方。

用胶水密封组件，然后用牙科水泥固定。

重新放置皮肤，并让大鼠恢复。

用生理盐水填充插座。

拧紧包含刺激电极的经颅电刺激（tES）电极帽。

将刺激设备连接到连接器。

将大鼠放入一个允许自由活动的笼子中。

启动阳极刺激，在运动皮层产生电场，从而促使电压门控离子通道开放、正离子内流及神经元去极化。

这会增强突触活性，触发ATP释放，从而激活小胶质细胞，后者在免疫反应中起关键作用。

神经元和小胶质细胞的激活凸显了经颅电刺激（tES）的神经治疗潜力。

首先用手术刀将颅骨表面的骨膜（颅骨上的结缔组织）向两侧刮除，并用棉签彻底擦拭干净。用鳄鱼夹在切口的四个角固定结缔组织，并使其向侧方悬垂，以保持手术视野开放。

接着，使用棉签将0.9%生理盐水涂抹于骨表面及组织以进行清洁。然后用3%过氧化氢清洁骨表面。当骨膜残留物变得可见时，使用棉签将其清除。由于固定螺钉可提高装置的稳定性，应选择与螺钉尺寸匹配的钻头。使用手钻预钻孔，在两块不同的骨板上各制备一个环钻孔，然后通过骨钻施加轻微的垂直压力完成钻孔。

如果植入对侧电极（如本视频所示），则在右侧顶骨后部钻第三个孔，用于将来固定穿隧道的电缆。将塑料螺钉插入钻孔中并拧紧，直至感觉到首次出现摩擦阻力，随后再额外拧紧三圈，每圈180度。

使用镊子检查螺钉的稳定性，若不够牢固，则再拧紧一圈。打开电烙铁，预热约5分钟。将从枕部组织隧道穿出的导线缠绕在右侧顶骨螺钉上，然后剪断导线，缠绕后保留约1厘米的导线长度。

使用手术刀小心剥离电缆末端的绝缘层，然后用氰基丙烯酸盐胶水将盘绕的电缆固定在螺钉和骨头上。接着，在连接器和对电极电缆的裸露导线上各涂少量无铅锡焊料，并将两者预先对准后短暂压合，同时用焊笔接触直至锡焊料熔化，完成连接。

立即移除焊笔头，以避免电缆金属过度加热导致后续组织损伤。刺激运动皮层时，使用直径为4毫米的插座。用带锯齿状弯曲尖端的镊子夹取定制的经颅电刺激（tES）电极插座，并在插座底部边缘涂上一层薄薄的氰基丙烯酸盐胶水。

植入套管的内侧内缘应正对矢状缝终止，尾侧内缘应终止于前囟的高度。然后将套管短暂按压在骨面上，直至胶水硬化。使用光源检查，确保套管区域内的颅骨表面无任何反光的胶水残留。

在套管就位且未来的刺激区域无胶水后，用少量氰基丙烯酸盐胶水将套管的侧边与邻近组织密封，以避免形成可能导致此处电流分流的液体桥。然后用氰基丙烯酸盐胶水覆盖所有螺丝。

接下来，将两种组分的牙科丙烯酸水泥在小型硅胶管或玻璃器皿中混合。一旦混合物变得黏稠，立即使用牙科刮刀将其涂抹于骨组织上，以封闭套管剩余的边缘。最后，用牙科丙烯酸水泥覆盖整个颅骨螺钉、对照电极导线以及套管的三分之一部分。待所有骨组织均被覆盖且水泥完全硬化后，移除血管夹，并将皮肤复位。

首先，用0.9%的生理盐水填充tES电极插座的一半，并去除气泡。在进行阴极tDCS刺激前，检查氯化情况；如有需要，对银-氯化银电极重新进行氯化处理。在进行阳极tDCS刺激前，使用砂纸去除之前刺激可能残留的过量氯化银沉积物，以确保刺激期间具有良好的导电性。然后，将tES电极帽拧紧安装。

将电缆连接到头部的两个连接器上。然后，将啮齿类动物放入实验笼中，电缆连接到笼子上方的旋转连接器，以允许动物自由活动。打开刺激器并调整刺激参数。最后，在刺激结束后，断开电缆连接，拧下头部的电极帽，并用棉签清洁并擦干插座。