2012年1月29日
强迫游泳实验已被验证为一种用于评估啮齿类动物潜在抗抑郁药效的实验方法。将实验动物放入盛水的容器中,量化其与逃脱相关的运动行为。本文描述了该实验小鼠版本的常规操作步骤。
小鼠强迫游泳实验是一种常用于预测抗抑郁药疗效的常见实验方法。本视频演示了小鼠强迫游泳实验的操作流程。小鼠版本与大鼠版本不同,不可互换使用。
在强迫游泳实验中,将小鼠放入盛有水的容器内。小鼠在容器中停留六分钟,在此期间记录其行为表现。
六分钟测试期结束时,将受试动物从水中取出。测试完成后,将视频记录转移至计算机或视频监视器。在分析过程中,观察者需测量小鼠在六分钟测试期的最后四分钟内挣扎所花费的时间。
抗抑郁药物增加了动物挣扎的时间,表现为静止时间缩短。大家好,我是来自马里兰大学医学院Todd Gould博士实验室的Sean。
你好,我是来自同一实验室的Chantelle。在本视频中,我们将向您展示如何实施并评分小鼠强迫游泳实验。小鼠强迫游泳实验用于评估抗抑郁治疗的潜在疗效。
那么,让我们开始吧。我们使用由坚固材料(如有机玻璃)制成的透明圆柱形水箱,水箱的尺寸应选择为防止小鼠逃逸,并确保小鼠无法用脚或尾巴触碰到水箱底部。将水箱注入自来水至预先确定并标记好的水位线处,并调节水温。
温度应保持在23至25摄氏度之间。水箱应按便于录像的方式进行排列。在我们的实验室中,每次在水箱中同时对四到五只受试动物进行强迫游泳实验。
我们放置隔板以防止受试动物相互观察。这些隔板还能为小鼠提供背景对比度。对于白化小鼠,黑色背景可在视频记录中提供良好的对比效果。
对于毛色较深的小鼠品系,应使用白色或乳白色背景。在开始实验前,启动白噪声发生器,并确保其音量不要过大。
它仅应屏蔽任何间歇性噪音。将受试者带入实验房间。适应期通常至少为一小时。
实验室内环境条件应保持恒定,避免噪音、光照强度变化及其他可能的干扰。适应期结束后,即可开始测试。记录会话名称非常重要。首先,抓住小鼠的尾巴,轻柔地将其放入水箱中。
此步骤需缓慢进行,以便动物在接触水面时能够调整自身方向。六分钟测试期结束时,录像记录动物的识别过程,并停止录像。按照开始实验的相同顺序取出小鼠,用纸巾轻轻擦干,然后放回笼中。
水箱中的水不应重复使用。现在我们已完成测试,接下来进入“大鼠强迫游泳实验”的行为评分环节。该实验主要评估的变量是动物在试验期间保持不动状态的时间长短。
通常,在小鼠强迫游泳实验中,对整个6分钟实验过程的最后4分钟进行评分。其原因是,大多数小鼠在实验早期阶段无论是否接受处理均会持续活动,这种活动会掩盖任何潜在的处理效应。
如本视频所示,小鼠在测试初期非常活跃。每只小鼠的活动时间在前两分钟后将逐渐减少。活动情况通过由游戏手柄控制的屏幕计时器进行测量。
另一个秒表倒计时240秒。测试时间内的活动性定义为除维持身体平衡和保持头部高于水面所必需的动作之外的任何移动。现在,让我们来看一个试验评分的示例。
我们首先将不参与评估的其他小鼠盖住,以避免混淆。小鼠通常很容易在水中漂浮,但仍会表现出轻微的动作,以保持身体平衡并使头部维持在水面之上。
这些行为并非试图逃跑,不应记为活动性。此外,即使小鼠在基本静止的情况下,在单次活动后仍可能由于先前获得的动量而在水中发生漂移,此类移动同样不应记为活动性。现在我们来看另一段视频。
视频中的小鼠表现出屏幕标注的活动期和静止期,观察者将记录其活动时间。虽然理论上可以直接测量静止时间,但检测和测量主动运动比判断运动缺失更为容易。传统上通常报告静止时间。
静止时间通过从240秒中减去活动时间来确定。对第四次游泳实验进行评分需要大量的培训和练习。为了达到较高的可靠性,必须建立内部生命标准,并对每位新观察者进行培训,直至其达到较高的可靠性水平。
在本视频中,我们讲解小鼠强迫游泳实验的操作方法。祝您今后的实验顺利成功。
查看完整文字稿并访问数千部科学视频
强迫游泳实验是一种经过验证的用于评估啮齿类动物潜在抗抑郁药效的方法。该实验将小鼠放入盛有水的容器中,通过量化其与逃脱相关的运动行为来进行分析。
小鼠强迫游泳实验是一种广泛使用的临床前行为学检测方法,用于评估抗抑郁药物的有效性,通过量化与逃避相关的活动性,为早期发现阶段的靶点验证和机制去风险提供支持。该实验的标准化操作能够对化合物在类抑郁状态中的作用进行可重复的评估,从而指导抗抑郁药物研发管线中的决策。该方法操作简单且对设备要求较低,便于在药物发现工作流程中大规模实施。
小鼠强迫游泳实验作为一种发现阶段的行为学检测方法,在靶点验证与先导化合物筛选之间起到桥梁作用,可在进入临床前药效学研究之前提供作用机制方面的深入见解。