新生猪肠道淋巴干的长期插管及淋巴液采集

淋巴管插管是一种重要的技术，用于研究脂质和药物代谢、癌症转移以及免疫功能相关的机制，通过收集来自各种动物模型的大量淋巴液，研究人员能够深入探究这些过程。本视频详细展示了采用腹侧正中入路法对新生仔猪进行肠淋巴干插管的外科手术操作。所有实验程序均已获得加拿大阿尔伯塔大学机构动物护理与使用委员会的批准。

为了进入淋巴管，需打开腹腔。使用电灼器的切割模式切开肌层。放置牵开器以在手术过程中保持腹壁敞开。

通过识别关键腹部器官，有助于定位淋巴管。为更方便地接触小肠和结肠的淋巴管节段，将其外置于身体左侧。通过识别肝脏和门静脉的右腹侧节段来确定淋巴管的位置标志。

新生仔猪的淋巴管较为纤细且容易撕裂，因此需要使用棉签和钝性器械进行细致的解剖操作。此处为肠淋巴管。现在正用钝头镊子将缝线从淋巴管下方穿过。

现在已有三根2-0丝线穿过淋巴管下方。最尾侧的缝线用于扩张血管并将导管固定于血管上。头侧的缝线用于将导管在血管内固定。

在淋巴管上做一个小切口，用钝头镊子扩张血管。将导管插入血管中。此操作必须轻柔进行，以确保淋巴管不会撕裂。

导管需越过最靠近颅侧的缝合处，以确保其位置妥当。使用三根2-0丝线缝合将导管固定于淋巴管内。其中，先使用两根靠近颅侧的缝线将导管固定于管腔内，随后利用最尾侧的缝线对导管进行牵拉固定，以增加稳定性。

在关闭腹腔之前，必须确保淋巴液流动良好。将导管从猪的左侧腰部中段引出体外。使用大型镊子将导管从腹腔内拉出，至猪体侧的外部表面。

使用带圆锥形针的2-0薇乔缝线以间断缝合方式关闭肌层。使用带切割针的2-0薇乔缝线以连续皮下缝合方式关闭皮肤。在导管穿出皮肤的切口处，使用带切割针的2-0尼龙缝线以荷包缝合方式关闭。

这种封闭有助于防止感染沿导管向内蔓延。在猪仍处于麻醉状态时，将装有淋巴收集瓶的外套放置在猪身上。将导管插入收集瓶，并在唤醒猪之前确认淋巴液流动良好。

猪在手术后恢复良好，实验过程中始终维持良好的淋巴液流动。下表列出了从淋巴管收集的淋巴液成分，这些成分包括载脂蛋白B48、甘油三酯和胆固醇。

Western Blot 图显示，在收集的淋巴样本中存在载脂蛋白 B48 以及少量血浆来源的载脂蛋白 B100。尽管在幼猪中进行淋巴管插管在技术上具有挑战性，因为淋巴管既脆弱又易损伤，但本视频表明，在幼猪中采用正确且细致的外科技术，可为研究人员提供一种优良的肠道淋巴收集模型。