使用袖套法进行小鼠主动脉移植模型的建立——教学视频

在此操作中，将供体的主动脉置于正位，并在供血血管上进行浅层缝合。通过面罩使用1.5体积％异氟烷和100％氧气的混合气体对小鼠进行麻醉。将小鼠仰卧位放置于操作平台上，并用胶带将四肢固定于手术台上。

在眼睛上涂抹眼膏以防止手术过程中眼睛干燥。通过捏后肢检查反射，确认小鼠已充分麻醉。去除腹部所有毛发。

涂抹脱毛膏或使用剃须刀。在无菌条件下进行操作。对腹部进行消毒。

为取出供体主动脉，做腹正中切口，并用手将肠管向右侧牵开。使用无粉手套轻轻将肠管手动推向一侧。将肠管置于用生理盐水浸湿的纱布上，以保持其湿润。

使用镊子进行钝性解剖，非常小心地将腹主动脉从周围组织中分离出来。用镊子解剖肾动脉与下腔静脉分叉之间的主动脉节段。使用11-0单丝缝线结扎该节段的所有细小分支。

在取出主动脉之前，向下腔静脉注入0.5毫升含有50单位肝素的生理盐水溶液。在切除主动脉节段前，使供体动物完全放血。用生理盐水充分冲洗移植物，随后立即将其置于盛有冰冻生理盐水的容器中。

为准备受体动物，通过面罩麻醉动物，去除毛发并按上述方法进行消毒，然后使用手术刀从剑突至骨盆做正中切口。用拉钩牵开腹壁。将肠管用生理盐水浸湿的纱布包裹，并轻柔地向动物右侧移位。

用镊子从近端的肾动脉至远端的分叉处游离腹主动脉下段。使用11-0单丝单缝线结扎该段的所有细小分支。通过6-0单股丝线缝合夹闭主动脉的近端和远端部分。

在夹子之间的中点处切开主动脉，并用肝素化生理盐水冲洗断端，以保持管腔通畅。将移植物置于正位。采用套筒技术，使用11-0单股缝线进行吻合。

采用此方法，将供体血管的末端插入受体血管中。将腹主动脉受体远端（肾下段）的末端置于供体主动脉的近端内。以相同方式完成远端吻合。

将供体主动脉的远端置于受体主动脉的远端内。注意避免主动脉发生扭转，确保供体与受体主动脉完全对齐。松开血管夹的时刻是该手术过程中的关键步骤，必须谨慎操作。

确认吻合口无异常后，松开夹钳。先轻轻松开远端夹钳，再松开近端夹钳。这样可在高压侧释放前，利用低压使管壁保持贴合。

立即灌注移植物，可见脉搏。轻轻去除丝线残余物。将腹腔内容物放回腹腔内，并使用连续的3-0聚乙醇酸缝线关闭切口。

在终止麻醉前，向小鼠给予0.05毫克/千克的丁丙诺啡。我们展示了移植后六周移植物的尸检图片及其三维超声和B型超声图像。这些图片显示了移植物的通畅性。

移植物未显示管腔尺寸的任何变化。此外，我们未发现狭窄或动脉瘤样结构。通过组织学和免疫组织化学染色，未观察到移植主动脉中存在任何显著病变。

细胞核经DAPI复染。总之，这种非常快速的吻合方法可用于研究基因工程小鼠中的血管疾病。