富血小板血浆注射治疗膝骨关节炎的制备、操作流程及疗效评估

膝骨关节炎在骨科门诊中十分常见。本文详细介绍了采用富血小板血浆注射治疗膝骨关节炎的完整治疗流程，包括治疗前准备、操作步骤及疗效评估。

膝骨关节炎（KOA）是骨科门诊中最常见的疾病之一。65岁以上人群中，有30%至50%会罹患此病，然而现有的非手术治疗方法对软骨修复和骨再生的作用有限。富血小板血浆（PRP）是一种自体生物活性物质，可有效修复软骨损伤并加速骨再生。

目前，富血小板血浆（PRP）在骨骼与关节疾病中的应用正受到越来越多的关注。临床上使用PRP的生物学依据包括其对生长因子局部递送的作用、对炎症反应的调节，以及对细胞增殖与分化的促进作用。然而，临床研究中关于PRP制备方案的报告存在高度不一致的情况。

而且大多数研究并未提供足够的信息，导致该方案无法被重复。手动法所需设备最少，操作方便，成本低，且易于实施。首先，我们通过手动双次离心制备PRP。

从外周血中提取富血小板血浆（PRP）层，随后利用该层进行膝关节腔注射。最后，对该方法的评估包括血小板浓度检测及临床效果评价。

本文介绍了一种可重复的PRP制备方法及采用PRP关节腔内注射治疗膝骨关节炎（KOA）的方案。通过疗效评估，整个治疗过程耗时不到30分钟，且PRP中的血小板浓度已证实可达到标准化水平。通过密切随访期间的疗效评估，证实了该治疗方法的有效性。

在温度和湿度适宜的无菌层流手术室内，将患者置于仰卧位。抽取0.2毫升肝素钠。润湿一支50毫升注射器。

绑扎止血带。对肘部进行消毒。从肘静脉抽取30毫升外周血。

进行第一次离心。将外周血等分至两个50毫升无菌离心管中。将两支离心管置于水平转子中，然后在无菌条件下放入离心机。

以800 G离心力离心6分钟。取出水平转子。佩戴无菌手套。

然后取出离心管，观察分层情况，确保外周血分为两层。从一个离心管中收集上清液至另一个干净的离心管中。

对另一只离心管重复此步骤。将上清液加入同一离心管中。进行第二次离心。

在另一支干净的离心管中加入等量的无菌水或生理盐水。将离心管放入水平转子中。用胶带标记含有上清液的离心管。

在1400 G离心力下离心5分钟。取出水平转子。选择标记的试管。

通过观察分层情况，确认标记试管中的液体分为三层。使用10毫升注射器从中层颗粒细胞层（即富血小板血浆层）及部分下层上清液中抽取4毫升液体。若中层液体量充足，仅从中层抽取4毫升即可。

取0.4 mL液体置于无菌抗凝管中用于检测，注射器内剩余3.6 mL液体。让患者仰卧于手术台上，膝关节屈曲至90度。穿刺部位位于髌骨内侧缘，距髌骨外侧韧带1厘米处。

佩戴无菌手套，使用碘伏对穿刺部位进行三次皮肤消毒。覆盖无菌洞巾。将注射器与胫骨平台平行放置，然后以45度角进行穿刺。

针头应完全插入皮肤。将注射器中的3.6 mL PRP注入膝关节腔内。用无菌纱布覆盖穿刺部位，并用胶带固定。

对伤口施加压力持续10分钟。观察30分钟，注意有无严重不良反应。整个治疗过程共包括三次注射，每次间隔一个月。

评估PRP中血小板的浓度。我们使用抗凝管中的0.4 mL PRP。采用全自动血细胞分析仪分析PRP中的血小板浓度。

通过在三次治疗前各进行一次术前咨询，评估PRP注射的术后效果，并在每次治疗后一天、每次治疗后三天、每次治疗后一周、第三次治疗后一个月、第三次治疗后三个月以及第三次治疗后六个月对患者进行进一步随访。采用视觉模拟评分法、西安大略和麦克马斯特大学骨关节炎指数（WOMAC）、膝关节协会评分（Knee Society Score）和Lysholm膝关节功能评分量表评估术后疗效。

JoVE 视频中制备的富血小板血浆（PRP）血小板计数达到了每微升 1121 × 10³ 的标准浓度水平。我们对一名 55 岁患有早期 KAO 的男性患者进行了方案中所述的 15 次随访调查，关节腔内注射 PRP 后早期疗效明显满意，但中期疗效略差。

观察到显著的镇痛效果。KSS膝关节评分高于KSS功能评分，表明富血小板血浆（PRP）对主观症状的改善效果优于对客观症状的改善。Lysholm膝关节功能评分结果表明，本方法在改善软骨损伤和软组织损伤症状方面具有明确疗效。

总体而言，我们采用的PRP方案具有显著的治疗效果。人们普遍认为，PRP中的血小板浓度应达到约每微升一百万个，即正常浓度的三到五倍。因此，本方案的最低要求是PRP的血小板浓度处于这一范围之内。

为了获得更高浓度的血小板，我们采用两次离心法。血液血小板的收集率与离心力和离心时间相关。通过我团队的探索，我们确定了双次离心的最佳离心时间，即第一次离心6分钟，第二次离心5分钟。

分别采用800和1400 G的离心力制备PRP。最后，在评估患者治疗效果时，我们使用了多种量表。综上所述，关节腔内注射PRP是治疗膝骨关节炎的有效方法。

本研究报告详细提供了完整的治疗流程，包括高质量PRP的制备、标准注射操作程序的引入，以及科学且实用的评估方案。