2019年1月7日
本文旨在为开发和使用VX2癌兔肝癌模型提供基础指导。
这种临床前肝肿瘤模型有助于解答介入放射学和介入肿瘤学领域关于局部区域治疗的关键问题。该技术的主要优势在于,通过原位同种异体移植可实现可靠的肿瘤诱导。在实施肿瘤移植时,首先需确认动物对足底反射无反应。
确认后,将实验动物置于麻醉状态。确认达到适当的麻醉深度后,对腹部进行无菌准备并铺巾。麻醉后,使用15号刀片从剑突开始,作一长度为3至4厘米的垂直正中皮肤切口。
牵拉皮肤以辨认腹白线,这是一条沿中线向下走行的具有反光性的白色结缔组织带。采用钝性与锐性分离相结合的方法切开腹白线,暴露腹膜,注意避免穿破下方的肠组织。仔细分离腹腔内组织以定位肝脏,必要时使用止血钳将皮肤、肌肉和腹膜的中线切口向下延长1至2厘米。
辨认位于中线处中叶的下外侧的左叶。在切口下缘放置一块干燥的纱布,以防止肝脏回缩至腹腔内。将一块新的湿纱布覆盖在取出的肝脏上。
使用镊子选取一块一至二立方毫米的肿瘤组织。用11号刀片以45度角在肝组织上刺入,形成一个深约0.5厘米的囊袋,注意不要穿透肝包膜的背侧。轻轻将刀片向腹侧抬起,在肝床中形成一个小囊袋,然后将肿瘤组织放入该囊袋中。
在肿瘤窝处放置止血剂以促进止血,并防止肿瘤组织脱出。确认止血完全后,将肝脏复位至腹腔内。随后使用带圆锥形针的3-0聚对二氧环己酮缝线,以连续单纯缝合法缝合腹壁。
使用带切割针的4-0聚甘醇酸910缝线,以连续皮下缝合方式关闭皮肤。为确认肿瘤植入成功,触诊腹股沟区的股部沟,沿该沟做2至3厘米的直线切口。通过钝性分离,定位并游离包含股静脉、股动脉和神经的股部血管神经束,并用钝性分离法将股动脉从束内其他结构中分离出来。
将动脉置于手术刀柄上方进行分离,采用塞丁格技术,使用三法式导引套件将穿刺针插入血管。将导丝插入动脉,然后撤出穿刺针,小心地将三法式鞘管推进血管内。
撤出鞘管中的扩张器和导丝,完成血管通路的建立。在荧光透视引导下,将导管插入位于第 T12 水平的腹腔干,并经由肝总动脉和肝固有动脉,将导管推进至左肝动脉。当导管到达左肝动脉后,注入造影剂以确认是否存在富血供肿瘤,随后可对该肿瘤实施选择性的动脉内治疗。
然后移除导管。使用3-0丝线,在鞘管插入点的近端和远端结扎股动脉,注意在撤出鞘管时,近端结扎的线结要扎紧,以防止出血。随后使用4-0聚乙醇酸910缝线,配合切割针采用皮内缝合法关闭腹股沟切口。
植入后三到四周,可在兔子的左股四头肌处肉眼观察到肿瘤。如本实验所示,通过血管造影并注射造影剂,可用来确认肿瘤植入成功。在进行剖检时,成功植入的肿瘤应能清晰可见。
自该技术问世以来,为介入放射学和介入肿瘤学领域的研究人员探索小动物模型中肝肿瘤局部区域治疗开辟了道路。
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本文介绍了用于肝癌研究的VX2癌兔模型的建立与使用基础。该临床前模型有助于深入了解介入放射学和肿瘤学中的局部区域治疗。
兔VX2肝肿瘤模型为介入肿瘤学和放射学领域中的局部区域治疗提供了可靠的临床前研究平台。该模型具有可重复的肿瘤诱导特性以及便于血管造影操作的优势,能够支持从基础发现到临床前验证的转化研究。此模型通过在具有疾病相关性的系统中评估介入技术,助力企业研发工作的开展。
VX2兔模型被整合到肿瘤学发现连续过程的临床前阶段,支持从早期发现向干预疗法的先导识别及临床前验证的过渡。