2019年7月31日
本文介绍了一种使用温控显微镜载物台的实验方案,该载物台可将样品容器安装在直立显微镜上。
该装置可用于将样品固定在垂直显微镜载物台上,以便观察重力对目标样品的作用以及在样品上的操作。将此装置安装到载物台上,可在垂直方向上观察样品的动态行为,并允许观察样品随温度变化的行为特征。制作铝板时,使用激光加工设备在一块150 × 200 × 2毫米的铝板中心切割出一个101毫米的孔,该铝板将用作前部板。
在平板外缘的八个点处制作爪形凸起,以便将两条橡皮筋固定在平板的长度或宽度方向上。接下来,在一块150 × 200 × 5毫米的铝板中心切割一个直径为130毫米的孔,该铝板用作中上层板,并在边缘制作八个缺口,以便可在平板的长度或宽度方向上放置两条橡皮筋。然后,在一块150 × 200 × 4毫米的铝板中心切割一个直径为130毫米的孔,该铝板用作中下层板;再在一块150 × 200 × 1.5毫米的铝板中心切割一个直径为30毫米的孔,该铝板用作底板。
制备基座时,在直径为100毫米、厚度为3毫米的铝板中心切割一个30毫米的孔,并在铝板一侧制作一个宽42毫米、深30毫米的缺口。然后,在直径为100毫米、厚度为4毫米的铝板中心切割一个30毫米的孔,并从铝板中心起,在相距25毫米处钻三个直径为3毫米的孔,各孔之间相隔120度。制备压缩软木圆盘时,使用水射流切割机在直径为100毫米、厚度为2毫米的压缩软木圆盘中心切割一个20毫米的孔,并在圆盘的每一侧各制作一个宽42毫米、深30毫米的缺口,以及一个宽4毫米、深5毫米的缺口。
接下来,在一个直径为100毫米、厚度为1毫米的压制软木圆盘中心切割一个20毫米的孔,并在圆盘两侧各制作一个42毫米宽、30毫米深的凹槽和一个4毫米宽、40毫米深的凹槽。然后,从一个直径为100毫米的圆盘上切割出一块42毫米宽、30毫米深的压制软木板。为制备硅橡胶加热器,使用带有内置镍铬合金丝的直径100毫米、厚2.5毫米的硅橡胶圆盘,在其中心切割一个20毫米的孔。
然后按照图示将制备好的部件堆叠组装,并根据需要使用螺丝或粘合剂固定相应的部件。使用专用电缆连接橡胶加热器和控制器外壳中的加热器,将显微镜载物台接入系统,并通过控制器接入Wi-Fi信号并调控橡胶加热器的电流。系统搭建完成后,将热敏电阻导线连接至控制器外壳上的传感器端口,接收热敏电阻测得的温度信号。
使用控制器上的旋钮调节设定温度。然后通过互联网将控制器上的测量温度、设定温度以及测量时的时间信息传输至服务器。为分析样品,将样品放置在垂直于地面的显微镜载物台上,并使用四个纵向卡爪和两条橡胶带固定样品。
使用控制器将温度设置为 40 摄氏度,并在显示屏上检查温度。然后按下旋钮以启动温度控制。蓝色 LED 灯将亮起,表示开始供热。
在这些图中,展示了橡胶加热器的典型温度分布。橡胶加热器的表面温度在每个设定温度下均保持均匀。此处展示了测量温度对设定温度变化响应性的一个示例。
橙色线条表示设定温度,蓝色线条显示样品温度的变化。如果设备组装正确,测量值相对于设定值变化的超调通常较小,且跟踪速度较快。在本实验中,成功记录了硅藻的温度依赖性垂直运动,从而能够检测硅藻垂直运动的轨迹。
通过直接观察,可以直观地展示热对流对硅藻细胞垂直漂浮现象的影响。当传感器与样品断开连接,或微控制器无法正常工作时,应检查微控制器是否已切断对加热器的供电。利用该方法,可观察温度变化对水中生物体垂直运动的影响。
由于连接显微镜的载物台部分结构较为复杂,未来的研究将致力于简化该结构。若需将样品冷却至室温以下,则需要复杂的冷却装置,此类装置也正在考虑作为后续工作的研究方向。
查看完整文字稿并访问数千部科学视频
本文介绍了一种使用温控显微镜载物台的实验方案,该载物台可将样品容器安装在垂直显微镜上。此装置便于在重力和温度变化影响下观察样品的动态过程。
带有集成温度控制的垂直显微镜载物台可实现对样品重力和温度依赖性行为的直接观察,有助于在早期发现阶段降低机制性风险。该功能可提高生物制药团队在生理相关条件下研究动态生物现象(如细胞运动性或聚集)时的预测可信度。系统的远程监控和数据记录功能进一步促进了研发工作流程中的跨地点协作与可重复性。
该垂直式载物台系统通过实现对重力和温度调节下样品动态的可控、定量研究,融入了从发现到临床前研究的连续过程。