一种用于小鼠真菌性脓毒症模型尾静脉注射的现代保温/固定装置

加热与固定装置为成功实施静脉尾静脉注射提供了一种简化的技术，可在受控环境中提供加热，并实现有效的操作以完成静脉尾静脉注射。在尝试该技术之前，熟悉操作方案并使用生理盐水注射进行练习至关重要。视频演示有助于展示操作技巧和注意事项，以辅助该操作的顺利进行。

我实验室的博士后 Junko Yano 将负责安装设备，我将演示操作流程。启动加热装置时，先将加热单元放置在干净、平整的实验台面上，接通电源，确保恒温器的电源指示灯亮起绿色。然后在加热室内放入垫料，以保持内部干燥并保存热量。

安装固定装置时，将固定单元放置在加热单元旁边，并为动物选择合适的锥形管尺寸。手动调节柔性铝制锥形管的底部宽度，以确保对动物进行充分固定。或者，可更换为定制的适配模型，以适应不同体型的动物。

使用控制旋钮将恒温器设定至所需温度，确保加热指示灯亮起红灯且灯泡已开启。在灯泡亮起期间，密切监控内部温度显示。当达到目标温度后，设备将自动启动。

使用高度调节旋钮将固定平台锥形部分的高度调整至适合使用者的最佳位置。当达到目标温度后，轻轻地将动物从饲养笼中转移到加温室中。加温室最多可安全容纳四到六只小鼠或一只大鼠，最长持续时间为20至30分钟。

加热处理5至10分钟足以诱导血管扩张并增强尾静脉的可见性。需密切监测动物是否出现急性热应激迹象，例如呼吸急促、精神萎靡或试图跳跃逃离的行为。通过提起动物尾根部将其从加热舱中取出，并将其放置于固定装置的锥形开口处。

当动物用前肢抓住锥体远端边缘时，轻轻向后拉尾巴，并将尾巴穿过开口的狭缝。固定从锥体中伸出的任意一条后肢，使侧静脉位于12点钟位置清晰可见。用非优势手的拇指和食指夹住尾巴的中段至三分之二处，对侧静脉施加轻微张力，以维持尾巴的位置并促进血管扩张。

用70%酒精浸湿的纱布或棉垫擦拭注射部位的皮肤。用惯用手握住注射器，将针头与尾部平行放置。以10至25度的角度沿血流方向刺入皮肤，并穿透2至4毫米，进一步进入静脉管腔内。

缓慢注射溶液。若遇到阻力或注射部位上方出现白色水疱，应立即拔出针头，并在原进针位置上方另选一处进行第二次注射。若一侧耳缘静脉注射失败，可将动物翻转至对侧，尝试在对侧静脉继续注射。

取下针头，用拇指紧压注射部位，以防止注入的溶液或血液回流。继续用干净的纱布或纸巾轻轻按压，直至出血停止。将动物放回笼中，观察五分钟，确保动物恢复正常活动且无继续出血。

启动保温室的加热器后，灯泡散发的热量会在前5至15分钟内迅速升高内部温度，具体时间取决于目标温度。当检测到的内部温度超过设定温度时，加热器会自动关闭灯泡。随后，设备会自动重复加热循环，以维持内部温度恒定。

在导致败血症的血流性念珠菌病小鼠模型中，通过尾静脉注射白色念珠菌（Candida albicans）可使Swiss Webster小鼠迅速发生败血症并出现病原体播散，导致在三至四天内出现高死亡率。相比之下，若预先用无毒力的都柏林念珠菌（Candida dubliniensis）菌株对动物进行免疫或疫苗接种，则可在致死剂量的白色念珠菌静脉攻击后实现超过95%的存活率。未接种疫苗的动物在致死性感染后表现出显著加重的败血症相关病态，而接种疫苗组在致死性攻击后仅表现出轻微症状。

在四次独立实验中，均一致获得了疾病进展性死亡率与疫苗介导保护作用之间的结果。将动物固定于固定锥中时需谨慎操作，确保正确调整针头角度以进入静脉，将针头置入静脉并进行静脉注射。该简化技术为尾静脉注射提供了一种高效且有效的方法，有助于提升研究人员的科学实验结果。