2023年5月26日
本方案描述了一种用于体外循环(CPB)的新生仔猪模型,通过循环和心脏停搏来研究由体外循环引起的严重脑损伤及其他继发性并发症。
近年来,随着心脏外科手术的进步,先天性心脏病患儿的死亡率已显著降低。然而,共病情况仍然极为常见,而这也正是我们实验室的研究目标。我们的目标是深入研究这些共病问题,揭示其潜在病因,并开发相应的预防措施。
目前,我们正在研究心脏手术后出现的神经异常。该方案提供了一种可行且可重复的动物模型,用于模拟小儿心脏手术。研究人员可以此为基础,测试多种不同的实验条件以及各种其他假设。
在我们的模型中,猪体外循环的外周插管技术既实用又经济。此外,与传统的中心插管技术相比,该方法能够更可靠地评估术后结果。本模型具有良好的灵活性,有助于推动未来在先天性心脏病及合并症研究领域的进一步工作。
例如,我们实验室目前正在计划扩展该模型,以研究脑部参数的实时监测,如氧合状态和脑血流量。首先,将4至6日龄的麻醉仔猪置于仰卧位。使用带套囊的气管导管进行经口插管后,听诊肺底以确认气管导管位置正确。
建立机械通气,并在手术期间通过心率、血压和血氧饱和度持续监测麻醉深度。根据需要调整通气和镇静参数。随后将一根 3 法式导管插入股动脉,再将一根 4 法式导管插入股静脉。
接下来,通过缩短体外循环(CPB)管路来启动体外循环(CPB)回路的组装,同时保持动物与机器之间的足够距离。建立一段管路桥梁,以连接膜式氧合器的流出端与泵的流入端。当所有连接点均密封后,用300微升肝素化生理盐水溶液和300毫升新鲜供体猪血冲洗整个回路,随后加入碳酸氢钠、肝素和葡萄糖酸钙。
当体外循环管路准备就绪后,暴露左侧颈内静脉,并将套管针插入该静脉。同样,暴露右侧颈总动脉以备插管。一旦见到回血,即小心地将导丝插入血管。
将扩张器沿导丝插入血管,然后取出扩张器。缓慢将一根8 French的静脉导管插入血管约4厘米,随后撤出导丝,确保导管保持在原位。
然后,如先前演示的那样,通过扩张将一根6法式小儿动脉导管插入右侧颈动脉。最后,通过新放置的动脉导管静脉推注肝素。在建立通路后,使用3-0可吸收缝线将两根导管固定于动物,并用胶带固定以防止意外脱落。
将套管连接到体外循环(CPB)管路,确保在连接处加入肝素化生理盐水,以防止管路中混入空气。初始流量设定为每分钟每千克80至85毫升。为诱导心脏停搏,给予9毫当量的氯化钾。
心脏停搏后,将动物与体外循环系统分离,同时维持体外循环系统以1,500转/分钟继续运转。在达到理想的 cardiac arrest 状态后,通过重新连接仔猪至体外循环通路,开始体外心肺复苏。经外周动脉通路给予3毫升葡萄糖酸钙和6毫升碳酸氢钠,必要时可追加剂量。
血管插管并结合心脏停搏的体外循环在实验中取得了92%的成功率。与对照组相比,进行体外循环并伴随心脏停搏的动物在磁共振成像(MRI)中显示出明显的早期脑损伤征象。急性扩散张量成像技术比其他常规MRI序列更能清晰识别梗死征象。
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本方案描述了一种用于心肺转流术(CPB)的新生猪模型,该模型结合了循环和心脏停搏,旨在研究与CPB相关的严重脑损伤及其并发症。
经过验证的儿科动物模型对于降低先天性心脏病转化研究的风险至关重要,特别是在理解心脏手术后神经系统并发症方面。该新生仔猪模型在长时间循环停止后采用体外心肺复苏技术,可实现严格的假设检验,并为临床前神经保护策略提供可靠的预测依据。其可重复性和可适应性使其成为儿科心脏研发领域中项目筛选和机制性风险评估的基础工具。
该模型连接了早期发现与临床前验证,支持在小儿心脏外科背景下开展假设驱动型研究和定量结果测量。