2023年12月22日
艾灸实验平台能够无束缚地固定大鼠,使大鼠在清醒状态下接受多穴位艾灸,既保障大鼠福利,保护操作人员安全,又确保治疗效果,提高实验效率。
我们研究了隔药饼灸对慢性肾衰竭大鼠的影响。本实验旨在探讨隔药饼灸的作用机制。该方案的优点在于,大鼠在非束缚、无麻醉的条件下接受艾灸,使动物实验更接近临床实际。
艾灸平台的应用不仅保护了大鼠的动物福利,还简化了艾灸操作流程,节省了操作人员的时间和精力,在一定程度上推动了动物艾灸实验的发展。未来,本实验室将进一步拓展该平台的使用范围,探索实验大鼠的针灸效应,在使用大鼠并保持相同条件的情况下,开展利用该装置与其他艾灸方法在大鼠身上进行艾灸效果的对比研究。
开始制作设备时,使用抗压板材料和木板。构建机架时,用白色表面的抗压板制作设备底座,尺寸为52厘米×23.5厘米。用实木制作高60厘米的抬高平台。
在 elevated platform 上方设置五个放置槽。使用间隔板将放置槽分隔开,间隔距离对应大鼠直立时前肢与后肢之间的距离。接着,在放置槽顶部固定两条不锈钢条,每条不锈钢条上设有15个用于固定组件的孔。
固定条上的三个孔对应每个插槽,用于固定 plum 柄螺丝和移动软管。相邻孔之间的距离为七厘米。每个放置插槽的上端连接一个可升降的隔热网,隔热网周围由镀锌板框架包围。
将可调节的梅花手柄螺钉安装在由304钢制成的隔热网两端。在隔热网中部插入304不锈钢圆形网状材料。使用不锈钢固定条将不锈钢可动软管的底端固定,上端则与管夹连接板相连。
将不锈钢艾灸夹连接到管夹连接板上,可同时固定8至10根艾条进行艾灸。开始时,将大鼠放置于实验台上,用非优势手佩戴橡胶手套轻轻罩住大鼠头部。
然后用优势手确定大鼠背部的穴位。找到双侧第二腰椎旁的肾俞穴(B23)以及双侧第11胸椎棘突下旁开的脾俞穴(B20)。用彩色标记笔标出这些穴位。
接下来,用惯用手的拇指和手指轻轻捏住大鼠背部和颈部的皮肤。同时,用非惯用手的拇指和食指轻轻捏住大鼠的尾巴。保持此姿势将大鼠提起,并缓慢向前移动。
将大鼠的头部对准艾灸平台上的放置槽。确保大鼠的前爪靠近放置槽边缘,使大鼠能够爬入槽内。随后,用双手的拇指和食指分别按住隔热网两端的梅花螺钉。
拧开梅花螺钉,将隔热网降至靠近大鼠背部的适当位置,然后拧紧螺钉以固定大鼠。将含有药饼的模具放置在隔热网上,使其位置对应于脾俞穴和肾俞穴。
然后将艾炷平稳地放置在药饼上。接着用打火机点燃艾炷,开始进行艾灸,直至艾炷完全燃尽,余热自然散去。通过检查湿润的药饼是否已完全干燥,确认操作完成。
更换烧尽的艾柱和药饼,继续进行艾灸,直至艾柱燃尽、药饼变干。操作完成后,将艾柱和药饼放入盛有水的废物缸中熄灭。在大鼠前方放置一个空的饲养笼,靠近艾灸平台放置槽的下端,并保持笼体静止。
轻轻拍打大鼠臀部,使其从放置槽移动至喂食笼。待大鼠进入后,放下笼子。用惯用手抓住大鼠背部的毛发。
牢固地抓住大鼠,将其放置在实验台上。观察大鼠是否有呼吸急促、情绪是否稳定,以及皮肤表面是否有烫伤。若无异常,将大鼠放回笼中。
经过隔药饼灸治疗后,治疗组大鼠的肾脏在大小、颜色和质地方面与对照组大鼠相似,而慢性肾功能衰竭大鼠的肾脏则出现白色纤维化。此外,与慢性肾功能衰竭大鼠相比,治疗组大鼠的Bcl-2表达上调,而PERK和Caspase-3表达下调,表明细胞凋亡减少。同时,H&E染色显示,治疗组炎性细胞浸润较慢性肾功能衰竭大鼠减少。
同样,Masson染色显示胶原纤维沉积减少,表明该操作具有抗纤维化作用,因此可用于治疗肾功能衰竭。
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本研究探讨了隔药饼灸对大鼠慢性肾衰竭的影响。该实验平台可在确保动物福利和操作者安全的同时,实现多穴位艾灸。
能够紧密模拟临床操作的创新动物模型对于早期治疗研究的转化可信度至关重要。所描述的艾灸平台可在非麻醉状态下对慢性肾衰竭大鼠模型进行多穴位干预,既支持可重复的机制研究,又优先保障动物福利。该方法可提高传统医学疗法及器械辅助干预措施在临床前评估中的预测价值。
该平台融入临床前研究的发现流程,连接早期的机制研究与针对器械辅助干预的转化验证。