新型碱木质素微/亚微米颗粒的绿色合成、表征、包封及其释放潜力测定

本研究的目的是建立一种简单且环境友好的工艺，用于制备小型木质素颗粒。研究旨在分析这些颗粒的物理、化学和结构特性，并考察其在模拟胃肠道环境中包封和释放生物类黄酮的能力。我们的方法采用廉价且环保的溶剂合成基于木质素的颗粒。

该过程简便快速，所需设备少，且使用无毒物质。同时，该方法可简单地对难溶于水的生物活性化合物进行表征、包封率测定以及体外释放潜力分析。这种创新的生物聚合物微粒由于引起胃部刺激的风险较低，适用于口服给药。

由于亚微米颗粒粒径小且具有显著的释放潜力，可被用作注射剂型。首先，将125毫克碱木质素加入25毫升超纯水中，并使用磁力搅拌器溶解。随后，将1毫升96%乙醇缓慢加入碱木质素溶液中。

将混合物置于磁力搅拌器上，以500转/分钟的速度搅拌3分钟。然后将0.5克柠檬酸溶于超纯水中，定容至50毫升，配制1%柠檬酸溶液。使用注射器向混合物中加入7毫升1%柠檬酸溶液。

继续搅拌混合物10分钟，直至澄清的棕色溶液转变为浑浊的浅棕色悬浮液。随后，使用超声波均质器对微粒进行均质处理，共进行两个循环，每个循环持续4分钟，强度为96%。然后将微粒在冷冻干燥机中于-64 °C温度下进行冷冻干燥，并将其储存在干燥器中以供后续使用。为制备天然类黄酮包封的木质素微米或亚微米颗粒，称取0.04 g槲皮素。

将产物溶于1毫升乙醇中，并将此乙醇溶液加入碱木质素水溶液中。首先，启动自动细胞计数器，以测定所制备样品的粒径及粒径分布。取1微升超纯水中的颗粒悬液，加入计数板的小孔中。

检测悬浮液中每毫升的颗粒数量，以及颗粒的数量和粒径分布。称取0.04克未负载或包封黄酮类化合物的木质素颗粒。将称量好的颗粒转移至锥形瓶中。

然后加入10毫升0.1摩尔的盐酸。将烧瓶置于设定为250转/分钟的磁力搅拌器上。接着，用0.1摩尔的氢氧化钠标准溶液填充50毫升滴定管。

使用台式pH计，在开始滴定前测量锥形瓶中溶液的初始pH值。现在开始滴定过程，每加入0.5毫升滴定剂后，测量被分析溶液的pH值。将实验数据记录在表格中，注明所加入滴定剂的体积及对应的pH值。

当观察到随着滴定剂溶液体积的增加，pH值趋于基本恒定时，停止滴定。以零阶、一阶和二阶导数微分滴定曲线的形式绘制实验数据。配制60毫升0.1摩尔的氯化钠水溶液。

取五个带塞锥形瓶，向每个锥形瓶中加入九毫升 0.1 摩尔的氯化钠溶液。分别将 pH 值调节至初始值 2、4、7、10 和 12。

然后加入额外的氯化钠溶液，将总体积精确调整至10毫升。现在，向每个烧瓶中加入40毫克干燥的木质素颗粒，并盖紧瓶盖。

将烧瓶直立固定在轨道摇床中，振荡24小时。静置烧瓶使其平衡30分钟，然后测定每个烧瓶中上清液的最终pH值。

将最终的 pH 值对相应的初始 pH 值作图。首先，在配备机械搅拌器的玻璃间歇反应器中加入 50 毫升模拟的无酶胃液介质，然后向其中加入 25 毫克黄酮类化合物包封的微粒或亚微米颗粒。

将反应器置于设定为约 37 摄氏度恒温的水浴中。将搅拌器浸入液面下至液体体积的三分之二深度，以确保固相和液相充分混合。每 10 分钟从反应器中取出 1 毫升样品，直至第 90 分钟，并立即向反应器中加入 1 毫升新鲜的模拟流体溶液，以维持总体积并确保汇相条件。

在无酶条件下，研究了桑色素（Morin）和槲皮素（Quercetin）在模拟胃液、小肠液和结肠液中的体外释放情况。小肠介质中黄酮类化合物的释放量是结肠的两倍，是胃部的三倍。槲皮素在pH 7.4的小肠液中释放量最高，于70至90分钟时达到34%，高于其在胃液以及pH 6.8小肠液中的释放量。