术后肠梗阻小鼠模型
2024年7月12日
我们描述了一种通过肠道操作建立的小鼠术后肠梗阻模型。在手术后24小时评估了胃肠道传输功能、病理变化以及免疫细胞的活化情况。
本研究的范围是肠道免疫。我们旨在阐明术后肠麻痹（POI）损伤的病理生理学机制，以促进新型疗法的开发。其中一个挑战是建立稳定且可重复的小鼠POI实验模型。
这涉及控制手术技术等变量以及动物护理的评估方案，以尽量减少实验组之间的差异。另一个挑战是在小鼠中阐明 POI 的潜在病理生理机制。我们的方案旨在建立一个可重复且变异最小的模型，用于研究 POI 的病理生理学并评估新的抗炎策略。
我们的目标是弥合小鼠模型中获得的临床前研究结果与人类临床相关性之间的差距，从而提高实验成果转化为有效治疗原发性卵巢功能不全（POI）的可能性。首先，将麻醉后的小鼠置于手术平台上。使用电动剃毛器去除腹部的毛发。
然后用生理盐水浸湿的棉球擦去腹部所有松散的毛发。充分伸展四肢以暴露腹部，并调整小鼠头部位置以保持呼吸道通畅。接着用浸有75%酒精的棉球对术区皮肤进行两次消毒。
随后，使用干燥的无菌医用纱布擦去腹部多余的酒精。接着，切开皮肤。用镊子提起腹部正中的腹直肌，并沿中线做一小切口。
确保切口上缘距胸骨剑突6至8毫米，下缘距外生殖器6至8毫米。然后将预先用生理盐水浸湿的纱布放置在腹壁切口两侧，用止血钳分别固定切口上下边缘的纱布，以暴露切口。
固定纱布后，用两个浸有生理盐水的棉签轻轻按压腹壁两侧。然后从切口处挤出少量肠管，并将其置于纱布上以暴露肠管。找到盲肠。
用生理盐水浸湿的棉签取出肠道，直至距胃部前两厘米处，以避免触碰胰腺。将肠道从胰十二指肠韧带的近端延伸至回盲部的远端。然后从近端至远端沿整个小肠施加均匀压力，持续五分钟，直至出现小的出血点。
随后，使用预先润湿的棉签小心地将全部小肠放回腹腔内。然后隔着纱布和腹壁轻轻按摩腹部 3 至 5 秒，以确保肠道位置正常，防止术后发生梗阻或扭转。接下来，向腹腔内注射 100 µL 生理盐水，以补充丢失的体液并润滑腹腔组织。
然后移除纱布，对腹部切口进行两层缝合。缝合后，用干燥的无菌医用纱布轻轻擦拭腹部切口周围区域，以保持切口干燥清洁，避免血液、组织液或生理盐水残留。在切口及周围涂抹少量医用切口粘合剂，以防止术后切口裂开。
待粘合剂干燥后，将小鼠置于37.5摄氏度的加热毯上，并持续监测小鼠状态，直至其完全恢复。
概述
本研究介绍了一种通过肠道操作建立的小鼠术后肠梗阻（POI）模型。该研究旨在深入理解肠道免疫及POI的病理生理机制，以开发新的治疗方法。
关键研究组成部分
科学领域
- 神经科学
- 胃肠病学
- 免疫学
背景
- 术后肠梗阻是手术后常见的并发症。
- 在小鼠中建立可重复的实验模型具有挑战性。
- 控制外科手术技术和动物护理方案对于研究至关重要。
- 理解术后肠梗阻的潜在机制对于治疗策略的开发至关重要。
研究目的
- 阐明术后肠梗阻（POI）损伤的病理生理机制。
- 开发新型抗炎策略。
- 建立稳定可靠的POI研究模型。
使用的方法
- 通过肠道操作在小鼠中诱导术后肠麻痹（POI）。
- 评估胃肠道传输功能。
- 病理学改变的评价。
- 术后24小时免疫细胞活化的分析。
主要结果
- 成功建立小鼠POI模型。
- 记录了胃肠道传输功能的变化。
- 确定了与POI相关的病理改变。
- 观察到手术干预后免疫细胞的活化。
结论
- 该模型为研究POI机制提供了平台。
- 它有助于评估新的治疗策略。
- 需要进一步研究以探讨研究发现的意义。
常见问题
行业应用价值
可重复的小鼠术后肠梗阻（POI）模型对于降低针对术后胃肠功能障碍的抗炎和促动力治疗药物在早期发现阶段的风险至关重要。该模型能够对参与POI的神经、上皮和免疫通路进行机制性研究，从而为转化研究的可预测性提供支持。稳定的实验结果有助于对候选干预措施进行项目筛选和优先级排序，以促进胃肠道功能恢复。
生物制药研发中的战略应用
早期发现与靶点验证
- 能够系统性地研究术后肠梗阻（POI）的病理生理机制及可靶向的作用通路。
- 支持对参与肠道动力和炎症过程的候选靶点进行功能验证。
- 通过分离神经元、上皮细胞和免疫成分在POI中的作用，促进机制层面的风险评估。
- 为基于假设的新治疗策略提供研究平台。
筛选与检测方法开发
- 提供一种标准化的体内系统，用于定量评估胃肠道传输功能及组织病理学变化。
- 可重复地测量免疫细胞浸润程度和上皮屏障完整性。
- 支持在具有疾病相关性的背景下，开发用于筛选抗炎或促动力化合物的检测方法。
- 有助于在临床前化合物评价中实现跨研究的可比性和可扩展性。
转化与临床前研究
- 将临床前研究结果与临床POI机制相对应，增强转化连续性。
- 支持在相关体内模型中已证明有效性的候选药物进行基于风险评估的推进。
- 促进胃肠道损伤与恢复相关生物标志物的发现与验证。
- 架起小鼠模型机制研究与人类治疗开发之间的桥梁。
流程与工作流整合
该小鼠POI模型可整合到从发现到临床前研究的连续过程中，支持胃肠道治疗药物的靶点验证、先导化合物筛选及转化医学研究。
- 发现生物学：为POI的假设检验和机制阐明提供受控系统。
- 筛选：提供胃肠道转运和免疫激活的定量读出，用于化合物评估。
- 分析：实现对干预措施在胃肠动力和组织病理学方面效应的统计学比较。
- 转化研究：促进POI临床前疗效与临床终点的对接。
- 企业级复用：作为可重复使用的平台，用于针对POI的多种治疗方式的迭代测试。
运营与企业影响
- 科学价值：提高对靶点研究的预测可信度，降低机制上的模糊性。
- 操作价值：标准化实验流程，增强不同研究间的可重复性。
- 战略价值：为决策提供依据，优化胃肠道治疗项目中的资源分配。
- 项目组合影响：支持基于风险调整的候选项目优先排序与推进，促进具有转化潜力的项目发展。
实施注意事项
- 需要具备小鼠手术技术和术后护理的专业知识。
- 需要具备荧光检测、组织学和流式细胞术的基础设施。
- 需要在不同团队之间对手术和评估方案进行严格标准化。
- 可能需要根据不同的小鼠品系或实验终点进行调整。
- 必须严格控制操作变量，以尽量减少组间差异。
