2025年5月16日
本文介绍了一种在小鼠模型中检测和量化捕食性追捕行为的实验方案。该平台为研究小鼠捕食性追捕行为的动态特征及神经机制提供了新的研究范式,并将为追捕行为的研究提供一个标准化的平台。
捕食追击行为涉及多种生理过程,但目前缺乏合适的研究方法。本研究旨在提出一种标准化方法,以探索由感觉刺激引发的动物行为的神经机制,特别是在捕食者-猎物追击过程中的机制。光遗传学、电生理学和脑成像等技术常用于推动该领域的科学研究。光遗传学能够精确控制神经活动,而电生理学可用于记录神经元信号。主要挑战在于活体猎物(如蟋蟀)的不可控性,这使得在标准化实验中难以观察和定义追击行为。捕食行为可分为四个阶段:搜寻、追击、攻击和摄食。近年来,后两个阶段已被广泛研究,而搜寻和追击行为的研究则较少。本实验方案提供了灵活且可控的人工猎物,可用于重复实验和建模,最大程度地模拟自然捕猎过程,并实现实时交互与低延迟响应,同时提供可扩展、成本低且易于使用的硬件与软件系统。
[旁白] 首先,在平台上方的横杆上安装一个网络摄像头,用于实时监测下方实验区域内小鼠和机器人诱饵的位置,并将图像传输至计算机。设计一个直径为800毫米、高300毫米的大型圆形实验区域,底部为方形丙烯酸板,周围由丙烯酸管构成边界。在实验区域的内壁上均匀放置四个图标:正方形、三角形、圆形和十字形,作为视觉线索。在磁铁表面贴上蓝色贴纸,以便于识别和定位。使用带有食物颗粒的圆形钕磁铁作为机器人诱饵。然后,在实验区域下方安装一个有效行程为1,000毫米的二维滑轨。在滑轨的载具上安装另一块钕磁铁,作为牵引磁铁,通过磁力远程移动机器人诱饵。使用由STM32控制板和开关电路控制的伺服电机驱动极性磁铁。编写速度控制模式的程序框图。将伺服电机设置为速度方向模式,其中高电平或低电平信号表示正向或反向运动,PWM波输出的频率表示速度。为将机器人诱饵移至实验区域中心,运行复位程序。使用挡板将小鼠隔离在实验区域边缘。随后,设置实验名称及文件存储路径。然后,在主程序中将机器人诱饵的移动速度设为5厘米每秒。点击“运行”,并在弹出的视频窗口中确认小鼠和机器人诱饵均被稳定识别。移除挡板并启动计时器,观察小鼠的捕食行为持续20分钟。将小鼠放回笼中,并给予24小时恢复期,期间自由获取食物和水。每次适应性试验后,使用75%酒精和水彻底清洁实验区域。通过运行前述复位程序将机器人诱饵移至实验区域中心,并用挡板将小鼠隔离在实验区域边缘。在设置好实验名称、文件路径以及机器人诱饵的移动速度后,点击软件中的“运行”按钮,并观察视频窗口,确保小鼠和机器人诱饵均被稳定检测。移除挡板并启动计时器。若小鼠在60秒内成功捕获机器人诱饵,则关闭主程序,允许小鼠吃完所有食物颗粒后再放回笼中。若小鼠在60秒内未能捕获机器人诱饵,则将其放回笼中,不给予任何奖励或惩罚。捕食任务在不同速度难度下进行,结果显示,随着适应性试验的进行,首次捕获机器人诱饵的时间显著减少,表明小鼠学习速度较快。在15厘米每秒的速度下,小鼠的捕获成功率高于30厘米每秒,表明任务难度具有速度依赖性。然而,无论诱饵速度如何,经过多次试验后,捕食时间均稳定在15秒以下。小鼠的运动模式中还观察到明显的搜索和追击阶段。在不同诱饵速度下均可靠地诱导出追击行为,表现为追击期间距离缩短、速度增加。捕食任务还采用了不同的逃脱策略。然而,β逃脱策略并未影响捕食成功率。在两种逃脱策略下,捕食时间均减少并稳定在15秒以下。小鼠在两种逃脱策略下均表现出一致的追击行为。
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本研究提出了一种检测和量化小鼠捕食追击行为的实验方案。该方法旨在标准化针对此类行为神经机制的研究,推动对捕食者-猎物动态关系的进一步探索。
标准化啮齿类动物对抗性追捕行为的量化方法,填补了行为神经科学和早期发现生物学领域的一项关键空白。该实时交互系统能够对复杂行为背后的神经机制进行可重复、高通量的研究,有助于提高靶点验证的预测可信度,并降低机制研究中的风险。该平台具备良好的可控性和可扩展性,可作为跨职能研发团队在神经行为表型分析和转化模型开发中的可重复利用资源。
该交互式系统可整合到从早期机制研究到临床前模型验证的整个发现流程中,支持以假设为导向的研究和可靠的动物行为表型分析。