一种用于测量抑郁小鼠模型中嗅觉享乐偏好的嗅觉偏好测试

情绪加工中的负性偏倚是抑郁症的主要特征之一。这一偏倚对于深入理解疾病的病理生理机制具有重要意义。本文提出了一种可靠的实验方案，用于评估抑郁小鼠模型（包括雄性和雌性）对具有不同效价的气味的先天嗅觉价值判断。

评估小鼠模型中的享乐性偏倚至关重要，这不仅有助于更准确地评价所诱导的抑郁样表型，也可作为研究这些价值判断改变背后神经机制的工具。总体而言，本方案为转化研究提供了新的途径，以深入理解抑郁症的发病机制及治疗效果。未来，我们将致力于解析这些情感处理异常背后的脑环路机制，探索潜在的性别特异性机制，以及抗抑郁药物对这些通路的作用。

首先，使用一个尺寸为45厘米×50厘米×25厘米的双区实验装置，其侧壁为灰色有机玻璃，底部为白色。用一块37厘米×25厘米的灰色有机玻璃墙将装置均分为两个25厘米×45厘米的区域。将带孔的培养皿用胶固定，并分别置于每个区域隔板底部。

然后使用双面胶或蓝丁胶将每个培养皿垂直固定在实验区域的壁上。接着，在实验区域上方两米处放置一台摄像机，用于记录动物的行为，并实现整个实验过程中其运动轨迹的自动追踪。现在将小鼠分为至少两个实验组：对照组小鼠和实验组小鼠。

实验开始前30分钟，将每只小鼠转移至行为测试室。使用照度计将测试 arena 内的光照强度调节至约40 lux，并确认光照分布均匀。随后，在 arena 内的两个培养皿中各放入一张尺寸为42.5毫米的洁净滤纸。

在第一天，将同一饲养笼中的所有小鼠轻柔地共同放入实验区域，持续10分钟，以减少其对新环境的恐惧。在测试当天，在化学通风橱中用玻璃小瓶配制所需气味剂，并使用正确的稀释比例。根据气味剂的化学性质，用矿物油或蒸馏水进行稀释。

每次测试小鼠前，在通风橱内使用带滤芯吸头的微量移液器吸取200微升气味溶液。将溶液滴加至其中一个培养皿中的滤纸上。另一个培养皿中的滤纸保持未处理状态。

将培养皿转移至测试室，然后垂直固定在实验区域的壁上。将每只小鼠单独放置于两个隔间之间的中心位置。

使用上方摄像头记录行为10分钟。观察期结束后，将小鼠从实验区域中移除。将气味培养皿从实验区域中移除。

然后使用70%乙醇消毒液清洁实验区域，并彻底擦干。丢弃已使用的滤纸，为下一只小鼠准备下一个气味样品。使用自动追踪软件记录小鼠在测试过程中的位置。

在实验区域内定义用于分析的不同区域。在适应阶段，所有小鼠在气味区和对照区均停留至少50秒，表明其对任务的参与程度充分。重要的是，接受UCMS处理的小鼠在气味区停留的时间与对照组小鼠相同。

尽管在其他区域也可观察到一些差异。在暴露于雄性小鼠尿液时，对照组雌性小鼠的活动显著多于UCMS雌性小鼠，但在适应期或TMT暴露期间则无此差异。所有快感反应的检测指标均显示对照组与UCMS雌性小鼠之间存在显著差异或统计学趋势。

这种效应也可通过全局气味探索指数（Global Odor Exploration Index）观察到，该指数是享乐反应和运动反应的综合指标。在雌性小鼠中，气味探索指数与雄性尿液和TMT的情绪性评分均呈正相关。在雄性小鼠中，习惯化阶段或测试过程中的总移动距离均未观察到差异。

与对照组相比，UCMS小鼠在气味区域的停留时间显著减少，对雌性尿液和TMT的探索也显著降低。UCMS小鼠进入气味区域的次数明显减少或有此趋势，并且对雌性尿液和TMT的偏好指数均显著降低。与对照组相比，UCMS小鼠的气味探索指数显示出对雌性尿液和TMT的行为反应呈负向偏移，且该指数倾向于与动物的情绪性评分呈正相关。