2026年4月3日
本方案建立了一种利用无标记跑台实验结合深度学习驱动的多关节轨迹自动标注技术的大鼠后肢运动学评估流程,可实现可重复的运动量化分析。
我们开发了一种由人工智能驱动的跑步机来追踪大鼠的运动,从而帮助我们精确评估脊髓损伤的恢复情况。与传统的足迹分析方法(该方法意味着复杂的关节运动学)不同,我们的人工智能系统可直接追踪多关节运动。首先,打开工业个人计算机,并启动视频采集与分析软件。
将相机镜头垂直于跑台的纵轴放置,以获得严格的侧视图像,并保持与跑带平面15厘米的水平工作距离。接下来,使用电子天平记录每只大鼠的体重。仅纳入体重相近的大鼠,以尽量减少体型差异的影响。
戴上手套,轻轻抓住大鼠。将弹性胸部绑带绕过前腋窝,并将其连接到可调节的滑轨上。然后调节绑带,使一根手指能够插入而不影响呼吸。
在触摸控制屏幕上,将速度设置为 150 毫米每秒,倾斜角度设置为零度。进行为期 10 分钟的适应性训练,使大鼠适应体重支持水平,同时监测大鼠是否出现应激和疲劳的迹象,例如不愿移动和长时间排便。当大鼠能够持续、均匀地迈步至少 60 秒,且无足部拖拽现象、尾巴自然下垂时,表明适应性训练成功。
在最长适应期后,排除不符合这些标准的动物。在触摸屏上输入正式实验的参数。依次输入所需的速度和坡度,然后选择跑带运行方向。
稳定后,选择“开始录制”以开始数据采集。持续采集至少五个完整的步态周期。每次试验结束时,将速度降至每秒零毫米。
解开胸带,将大鼠放回相应的笼子中。截取包含目标步态的约10秒视频片段,其中应至少包含10个稳定的步态周期。记录大鼠信息,包括编号、分组及实验条件。
将 MOV 文件导入分析软件中。将每个步态周期从 0% 到 100% 进行归一化处理,以标准化周期长度。生成代表性图像以展示步态动力学特征。
将每个关节随时间变化的空间位置坐标导出为 CSV 文件,以供进一步分析。完成动物建模后,植入电生理记录装置。进行脑信号记录时,将电极放置于颅骨表面、硬膜外腔或大脑皮层,以记录脑信号。
进行脊髓记录时,将记录电极插入椎间孔的硬膜外腔。进行肌电图记录时,将双极银丝电极埋入目标肌肉以记录肌肉电活动。动物植入电极后需恢复5至7天。
在跑台测试前,每天检查伤口和步态,确保无感染或疼痛迹象。在同步实验前,准备好设备和动物。然后将电生理数据采集与运动视频同步,确保两者具有相同的时间戳。
在分析过程中将神经信号与相应的视频帧对齐,以可视化不同步态阶段的电生理模式。脊髓损伤大鼠表现出明显的摆动相缺失和不规则的髂骨位移曲线。与健康大鼠相比,脊髓损伤大鼠的关节角度波动增加。
关节活动范围热图显示,与健康大鼠相比,脊髓损伤大鼠的颜色标度广泛降低;而轨迹活动图则显示出各关节活动范围显著减小,并伴有运动连续性的受损。对于脊髓损伤大鼠,点云图显示其质心分布更加分散,且质心位置向左偏移。高度瀑布图显示,两组间在x轴方向上呈双峰分布,运动中段的整体高度差异下降。
在 y 轴上,运动开始时观察到差异下降。整体差异分布呈无序状态,表明脊髓损伤大鼠与健康大鼠相比存在异常的运动时相。脊髓损伤大鼠脚趾的垂直高度峰值分布向右偏移。
速度范围图显示,损伤组每帧的综合速度范围变窄。此外,脊髓损伤大鼠还表现出相位平面面积、估算的峰值推进力指数以及运动平滑性指标的下降。本系统可使研究人员实时精确测量多关节运动轨迹、力量分布及运动平滑性。
一个重要的考虑因素是让大鼠充分适应跑台系统,以确保步态模式的稳定并进行分析。我们可以将该系统与肌电图(EMG)或脑电图(EEG)同步,以解析该运动背后机制的信号。
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本文介绍了一种无标记、基于跑步机的啮齿类动物步态分析系统,该系统利用定制的深度学习算法,实现对下肢关节运动学的实时、多维度追踪。该系统可在多种实验条件下对步态参数进行客观、高通量的量化分析,并通过脊髓损伤(SCI)模型验证了其在神经肌肉研究中的灵敏性和应用价值。
对啮齿类动物后肢运动学进行客观、高通量的定量分析,对于转化神经科学和神经肌肉药物研发至关重要。这一基于深度学习的无标记步态分析系统可实现对运动功能的多维度、无偏倚评估,有助于在临床前模型中进行可靠的作用靶点验证和机制性风险排除。该系统整合了同步的神经活动与生物力学数据,可在关键的药物发现和临床前研究转折点上提升预测的可信度。
该系统通过提供客观、定量的啮齿类动物模型运动表型分析,将早期发现、先导物识别和临床前验证连接起来。