Morphometrische Analysen von Netzhautschnitte

Hallo, ich bin Regina aus dem Labor für neurodegenerative Erkrankungen am Institut für Anatomie der Universität Hongkong. Heute zeige ich Ihnen, wie man die Fortschrittsanalyse der Netzhautpräparation durchführt. Beginnen wir. Bevor Sie mit einer Analyse beginnen, muss eine Netzhautprobe entnommen und vier Myofaszien einer H&E-Färbung unterzogen werden.

Anschließend wird die Netzhautsitzung in vier Bereiche unterteilt. Diese sind der obere periphere Bereich, der obere zentrale Bereich, der untere zentrale Bereich und der untere periphere Bereich. Nach der Definition der Bereiche wird jeweils ein Bild jedes Bereichs mit einer 10×40-Vergößerung unter dem Hellfeldmikroskop von decor aufgenommen.

Jetzt sind wir bereit, die retinale Morphologie zu analysieren. In dieser Sitzung wird gezeigt, wie man die Dicke der inneren nuclearen Schicht der Retina misst. Öffnen Sie die Software mit dem Namen Thorough Investigator.

Wählen Sie die 40 Typen aus und anschließend im Hauptzweibalken „Bild öffnen“. Wählen Sie unter dem Reiter Datei ein Bild eines gewünschten Netzhautbereichs aus, den Sie analysieren möchten. Wählen Sie den Typ der Konturlinie aus dem Dropdown-Menü des Hauptzweibalkens aus.

Stellen Sie sicher, dass die automatische Bewegung eingeschaltet ist. Sie können das Bild vergrößern, indem Sie auf die Schaltfläche „Vergrößern“ klicken. Mit der Schaltfläche „Verkleinern“ können Sie die Größe der Bildanzeige verringern.

Sowohl die Nachzeichnung als auch die Probe können durch Betätigen der Bewegungstasten in vier verschiedene Richtungen verschoben werden. Rechtsklicken Sie im Nachzeichnungsfenster und wählen Sie „einfache Rissnachzeichnung“. Zeichnen Sie die Konturlinie entlang der inneren Grenze der inneren Schicht.

Wenn ein Fehler gemacht wird, unterbrechen Sie ihn im Nachverfolgungsfenster und drücken Sie die Schaltfläche „Rückgängig“, um den letzten Zeichnungspunkt zu löschen. Setzen Sie die Nachverfolgung fort, bis zum letzten Punkt der Linie. Wenn die Zeichnung abgeschlossen ist, unterbrechen Sie sie im Nachverfolgungsfenster, wählen Sie eine offene Kontur aus und starten Sie das Bild, indem Sie auf „Vergrößern“ klicken.

Linksklick auf die Schaltfläche im Abbildungsfenster. Um das Bild zu vergrößern, wählen Sie einen Marker an der Marker-Zwei-Leiste bei Marcus. Am Verbindungspunkt.

Nachdem alle Marker hinzugefügt wurden, wählen Sie das Marker-Symbol an der Position der Marker-Zweierleiste und dem Cursor aus. Wählen Sie im Zentrum eines der Marker die Funktion „Schnellwinkelmessung“ über die rechte Maustaste im Reiter „Zweier“ im Tracingsfenster und anschließend die Option „Kontinuierlich“. Messen Sie den Winkel, indem Sie zunächst im Zentrum eines Markers klicken, der neben dem ausgewählten Marker liegt.

Für ein Ende des Liniensegments bewegen Sie den Marker so weit wie möglich in die Mitte des betroffenen Bereichs. Marker und Riss. Dehnen Sie die Gummibandlinie erneut bis zum äußeren Rand der Inia-Schicht aus, und passen Sie den Winkel an, bis er 90 Grad beträgt.

Erreichen Sie den linken Riss an der gewünschten Stelle. Positionieren Sie einen Dialog, der die Winkelmessung anzeigt, unmittelbar nach dem Klick. Drücken Sie die Eingabetaste, während Sie die Maus weiterhin links gehalten haben.

Klicken Sie auf das Tracierungsfenster, sodass die Linie von einem Ende bis zum neu ausgewählten Ende gezeichnet wird. Unterbrechen Sie die Linie im Tracierungsfenster und wählen Sie eine offene Steuerung. Wir müssen vier Messungen der Finger der inneren Kernschicht in jeder Region vornehmen, wobei vier Linien gezeichnet werden.

Senkrecht von der Kontrollbasisnacht bis zur äußeren Grenze der indischen nukleären Schicht und starten Sie das Bild, sodass Sie die Grenze deutlich sehen können. Wenn sich die Spitze der Linie nicht am äußeren Rand der inneren nukleären Schicht befindet, können wir sie verbinden oder die Linie im Bearbeitungsmodus verkürzen. Wählen Sie den Bearbeitungsmodus aus und markieren Sie die Linie.

Klicken Sie nun auf das Tracing-Fenster und wählen Sie im elektrischen Steuerfeld einen Suchpunkt aus. Fügen Sie einen Punkt am äußeren Rand hinzu, wobei die Punktbearbeitung entlang derselben Linie erfolgen sollte. Löschen Sie den ursprünglichen Punkt. Eine Ausrichtung mit einem neuen Hub kann dann erreicht werden.

Reduzieren Sie die Bildgröße, indem Sie auf die Schaltfläche „Verkleinern“ klicken. Deaktivieren Sie den Bearbeitungsmodus und zeichnen Sie das letzte Liniensegment. Nach dem Zeichnen der Bestelllinien wählen Sie den Bearbeitungsmodus aus.

Rechtsklicken Sie auf das Tracingsfenster, und wir platzieren die vier Liniensegmente entsprechend. Wir können nun die vier Messwerte erhalten, indem wir die CONT-Messschaltfläche drücken. Wählen Sie diese vier Messwerte aus und fügen Sie sie durch Klicken auf Kopieren in ein Fachprogramm ein.

Klicken Sie auf Ball, um „Speichern unter“ im Reiter „Datei“ auszuwählen. Die Spurdaten können als Datendatei gespeichert werden. In diesem Teil quantifizieren wir die Anzahl der roten Schwanz-Gagan-Zellen. Wählen Sie „Bild öffnen“ aus.

Wählen Sie unter der Registerkarte „Datei“ ein Bild eines gewünschten Netzhautbereichs aus, das Sie analysieren möchten. Zunächst müssen wir identifizieren, welche Zellen lebende und welche abgestorbene Zellen sind. Jene Zellen, die eine annähernd runde Form aufweisen und bei denen ein deutlicher Kern klar erkennbar ist, gelten als lebende Netzhautganglienzellen.

Diese verglichenen kleinen und kondensierten Zellen gelten als diese Zelle. Wählen Sie den Typ der Konturlinie aus der Dropdown-Liste der beiden Hauptleisten aus. Zeichnen Sie eine Linie entlang der Grenze der linken Faserschicht und führen Sie die Kontur mit der Option „offene Kontur“ nach.

Fügen Sie an jedem Ende einen Marker an der Spitze der Linie und den anderen in der Nähe des Teams hinzu. Wählen Sie das Markersymbol in der Marker-Zweileiste aus. Positionieren Sie den Cursor in der Mitte der Marker.

Wählen Sie an der Spitze unter dem Tab „Schnellwinkelmessung“ aus. Rechtsklicken Sie zweimal im Nachzeichnungsfenster, wählen Sie eine kontinuierliche Option aus und aktivieren Sie lediglich die Gummibandlinien, um einen Winkel von 19 Grad zu messen. Drücken Sie direkt nach dem Erfassen eines Dollar-Feldes die Eingabetaste.

Beachten Sie jedoch, dass die Maus gleichzeitig noch vorhanden ist. Unterbrechen Sie das Nachzeichnungsfenster, sodass eine neue Linie speziell von der Spitze ausgehend verlängert werden kann. Unterbrechen Sie im Nachzeichnungsfenster und wählen Sie eine offene Steuerung.

Ziehen Sie eine weitere neue Linie auf genau dieselbe Weise wie am anderen Ende. Wir haben zwei Begrenzungen erstellt, innerhalb derer die Anzahl der Ratin-Gagan-Zellen gezählt wird. Wählen Sie einen Markierungs-Typ aus und befestigen Sie einen an jeder fünften Zelle.

Wählen Sie eine Grenze als Ausschlusslinie aus, wobei die Zelle, die diese berührt, nicht gezählt wird. Wählen Sie einen anderen Markierungs-Typ für die toten Zellen. Die Anzahl jedes Markierungs-Typs wird entsprechend neben dem Markierungs-Symbol angezeigt.

Wählen Sie im Bereich der zwei Balken den Bearbeitungsmodus aus und wählen Sie die Konturlinie aus. Unterbrechen Sie diese im Nachzeichnungsfenster und verlängern Sie die Linie erneut. Der Name der Konturlinie kann durch Drücken der Konturmessschaltfläche abgerufen werden.

Die Anzahl der Zellen kann dann pro Millimeter des Namens angegeben werden. Speichern wir dies unter der Registerkarte „Datei“. Die Spurdaten und die Markierungsdaten können als Datendatei gespeichert werden.

In diesem Teil wird gezeigt, wie die Zellseite eines retinalen Ganglienzell-Auswahlbildes gemessen wird. Wählen Sie unter dem Reiter „Datei“ ein Bild eines gewünschten Retinabereichs aus, das Sie analysieren möchten. Wählen Sie eine lebende Ganglienzelle anhand der im vorherigen Teil beschriebenen Kriterien aus.

Wählen Sie in der Lebendzelle den Typ der Konturlinie vom Notierungspunkt der beiden Hauptbalken aus. Zeichnen Sie eine Konturlinie entlang des Umfangs der Zelle, ungefähr am Ende rechts, klicken Sie im Nachzeichnungsfenster und wählen Sie „Kontur schließen beenden“. Die Fläche der Zelle wird unter dem Punkt Fläche im Steuerungsmessdialogfeld angezeigt.

Dieses Video hat drei einfache Methoden gezeigt, die die Netzhaut objektiv analysieren können. Wir hoffen, dass dieses Video von.