The Tail Suspension Test-

Der Schwanzfesseltest ist ein verbreiteter Verhaltensversuch, der zur Vorhersage der antidepressiven Wirksamkeit verschiedener experimenteller Eingriffe verwendet wird. Dieses Video demonstriert die Durchführung dieses Tests. Der Schwanzfesseltest ist für die Maus validiert und wird für größere Nagetiere nicht empfohlen.

Im Schwanzaufhängetest werden Mäuse an ihren Schwänzen aufgehängt. Die Maus bleibt sechs Minuten lang aufgehängt. Während dieser Zeit werden die Verhaltensweisen des Versuchstieres aufgezeichnet.

Am Ende des sechsminütigen Testzeitraums wird das Klebeband vom Schwanz des Versuchstiers entfernt. Nach Abschluss des Tests werden die visuellen Aufzeichnungen auf einen Computer oder einen Videomonitor übertragen. Zur Auswertung misst ein Beobachter die Zeit, die eine Maus während der gesamten sechsminütigen Sitzung mit Kampfverhalten verbringt.

Verbindungen mit antidepressiven Eigenschaften erhöhen die Zeit, die Mäuse mit Kampfverhalten verbringen. Dies zeigt sich in kürzeren Phasen der Immobilität. Beispielsweise haben wir berichtet, dass das stimmungsstabilisierende Medikament Lithium, das klinisch als zusätzliche antidepressive Therapie nützlich ist, die Immobilitätszeit im Schwanzaufhängetest verringert.

Hallo, mein Name ist Sean aus dem Labor von Dr. Todd Gould in der Abteilung für Psychiatrie an der University of Maryland School of Medicine in Baltimore. Hallo, ich bin Chantel aus demselben Labor. In diesem Video zeigen wir Ihnen, wie man den Schwanzaufhängetest durchführt und bewertet.

Der Schwanzaufhängetest wird verwendet, um die potenzielle Wirksamkeit von Antidepressiva zu bewerten. Gehen wir also ins Labor und zeigen Ihnen, wie man das Experiment durchführt. Obwohl nicht zwingend erforderlich, verwenden wir eine speziell konzipierte Box für den Schwanzaufhängetest.

Für diesen Test ist unsere Schwanzfesselbox in vier Kammern unterteilt, wobei jede Kammer einem einzelnen Maus vorbehalten ist. Die Trennwände verhindern, dass die Mäuse sich während des Tests gegenseitig beobachten können.

Es ist jedoch möglich, ein Regal oder eine andere Konstruktion zu verwenden, um die Mäuse aufzuhängen. Die Abmessungen der Box für den Schwanzaufhängetest werden so gewählt, dass die Mäuse nicht an die Kanten reichen und sich daran festhalten können. Vor Beginn des Experiments genügend Klebebandstücke zuschneiden und den Bereich markieren, der zur Befestigung am Schwanz verwendet wird.

In unserem Labor verwenden wir 17 cm lange Klebestreifen. Zwei Zentimeter vom Ende dieses Klebestreifens sollten markiert und zur Befestigung am Schwanz verwendet werden. Wir platzieren den Schwanz in der Mitte dieses zwei Zentimeter langen Abschnitts.

Platzieren Sie die Box für den Schwanzaufhängetest und die Videokamera. Vor der Einführung der Tiere sollte die Box gründlich mit einer desinfizierenden Lösung gereinigt werden, um Gerüche von vorherigen Versuchstieren zu neutralisieren. In unserem Labor verwenden wir zwei verschiedene Schwanzaufhängeboxen, die in jeder Hinsicht identisch sind, außer in der Farbe.

Für albinotische Mäuse bietet eine dunkelgraue Box einen guten Kontrast für Videoaufnahmen. Für dunkler gefärbte Mäusestämme ist eine weiße Box geeignet. Schalten Sie die Rauschmaschine ein.

Es sollte alle intermittierenden Geräusche abmaskieren. Bringen Sie die Mäuse in den Versuchsraum, um sie akklimatisieren zu lassen. Die Bedingungen im Raum sollten konstant gehalten und frei von Geräuschen, Änderungen der Lichtintensität und anderen möglichen Störungen sein.

Diese Akklimatisierungsphase dauert in der Regel mindestens eine Stunde. Sobald die Akklimatisierungsphase beendet ist, kann der Test durchgeführt werden, um zu verhindern, dass bestimmte Mausstämme an ihren Schwänzen hochklettern. Beim Schwanzaufhängetest verwenden wir Plastikzylinder, die wir über die Schwänze stülpen.

Diese Zylinder ruhen während des Tests an der Basis ihres Schwanzes. In unserem Labor verwenden wir Kunststoffzylinder, die vier Zentimeter lang, einen Zentimeter Durchmesser haben und 1,5 Gramm wiegen. Wenn Kunststoffzylinder verwendet werden, um das Hochklettern zu verhindern, sollten sie vor dem Anbringen des Klebebands auf die Schwänze gelegt werden.

Wir bringen das Klebeband an der äußersten Schwanzspitze an, wobei zwei bis drei Millimeter des Schwanzes außerhalb des Bandes verbleiben. Befestigen Sie das Band an den Schwänzen der Mäuse in ihrem Heimkäfig. Verwenden Sie das markierte Ende des Bandes und stellen Sie sicher, dass das Band am Schwanz haftet und sich anschließend an sich selbst festheftet.

Wenn das Klebeband angebracht ist, befestigen Sie jede Maus an den Wänden des Käfigs, um ein Verheddern der an verschiedenen Tieren befestigten Bänder zu verhindern. Führen Sie diesen Vorgang schnell durch. Andernfalls werden die Mäuse unnötigem Stress ausgesetzt.

Die Aufnahme sollte gestartet werden, bevor die Tiere aufgehängt werden. Hängen Sie die Tiere auf, indem Sie das freie Ende des Klebebands in einer Reihenfolge, die zwischen den Behandlungsgruppen gegengebalanciert ist, an der Aufhängestange befestigen, und achten Sie darauf, dass die Sicht der Kamera nicht behindert wird. Da die Mäuse nacheinander aufgehängt werden, hat jedes Tier einen leicht unterschiedlichen Startzeitpunkt für den Test.

Stellen Sie sicher, dass Sie mit der Bewertung jedes Mäuschens genau zu Beginn seiner Aufhängedauer starten. Es ist wichtig, dass die Sicht der Kamera nicht behindert wird. Da die gesamte Schwanzaufhängesitzung bewertet wird, könnte eine Behinderung der Kameraperspektive zum Verlust von Daten führen.

Stellen Sie sicher, dass alle Klebebandenden senkrecht zur Aufhängungslattheit liegen und die gleiche Länge an Spiel aufweisen. Starten Sie für jeden Versuchsteilnehmer die Stoppuhr. Der Schwanzaufhängetest dauert sechs Minuten.

Nach Ablauf der sechsminütigen Testphase das Klebeband vom Ende jedes Schwanzes entfernen und die Mäuse in ihren Heimkäfig zurückbringen. Am Ende des Tests sollten die Versuchsinformationen videoaufgezeichnet werden. Nachdem die Mäuse in den Kolonieraum zurückgebracht wurden, sollte die Testbox gründlich gereinigt und mit einer Sterilisationslösung abgewischt werden.

Nachdem wir die Tests abgeschlossen haben, werden wir nun die Auswertung der Verhaltensweisen besprechen. Die einzige Variable, die üblicherweise bei der Bewertung des Schwanzaufhängetests erfasst wird, ist die Zeitspanne, in der die Tiere regungslos sind. Um die Regungslosigkeitszeit zu ermitteln, messen wir die Zeit, in der die Mäuse beweglich sind, und ziehen diese von der sechsminütigen Testdauer ab. Wir werden die gesamten sechs Minuten des Tests auswerten.

Wir decken zunächst die Mäuse ab, die nicht bewertet werden, um dem Beobachter zu ermöglichen, sich bei jeder einzelnen Messung der verbrachten Zeit auf jeweils nur eine Maus zu konzentrieren. Die Beweglichkeit wird mittels einer am Bildschirm angezeigten Stoppuhr erfasst, die über ein Gamepad-Gerät gesteuert wird. Wie hier zu sehen ist, befinden sich zwei separate Bildschirmstopuhren, die gleichzeitig gesteuert werden können.

Die erste Stoppuhr zählt von 360 Sekunden herunter und zeigt dem Beobachter die Testdauer an. Die zweite Stoppuhr misst die Zeitspanne, in der die Versuchspersonen in Bewegung bleiben. Wie Sie bemerken können, wird die zweite Stoppuhr von der ersten verdeckt, sodass dem Beobachter nur deren Millisekunden-Dezimalstellen sichtbar sind.

Auf diese Weise kann der Beobachter erkennen, ob die Stoppuhr läuft, jedoch nicht die gesamte Bewegungszeit einsehen, bis die Auswertung abgeschlossen ist. Dies geschieht, um Beobachterverzerrungen zu vermeiden, die die Ergebnisse beeinflussen könnten. Mäuse zeigen insbesondere zu Beginn der Sitzung verhaltensweisen, die mit Fluchtverhalten zusammenhängen.

Zu diesen Verhaltensweisen gehören Versuche, die Wände der Apparatur und die Aufhängungsschiene zu erreichen, starke Körpererschütterungen sowie Bewegungen der Gliedmaßen, die einem Laufen ähneln. Diese Bewegungen stellen eindeutig Mobilität dar. Im Verlauf des Tests werden die Bewegungen jedoch zunehmend subtiler.

In unserem Labor zählen wir kleine Bewegungen, die auf die Vorderbeine beschränkt sind und bei denen keine Bewegung der Hinterbeine erfolgt, nicht als Mobilität. Außerdem werden pendelartige Schwingungen, die auf die durch vorangegangene Mobilitätsphasen erlangte Schwungkraft zurückzuführen sind, nicht als Mobilität gewertet. Nun betrachten wir die Bewertung einer tatsächlichen Sitzung des Schwanzaufhängungstests.

Üblicherweise wird die Immobilitätszeit und nicht die Bewegungszeit angegeben. Die Immobilitätszeit kann berechnet werden, indem die gesamte Bewegungszeit von der Testdauer von 360 Sekunden abgezogen wird. Bewertung: Der Schwanzfesseltest erfordert Schulung und Übung.

Es ist wichtig, einen internen Labarbeitsstandard zu etablieren und neue Beobachter so lange zu schulen, bis sie ein hohes Maß an Zuverlässigkeit erreichen. In dieser Arbeit erläutern wir, wie man den Schwanzaufhängtest durchführt und bewertet. Viel Erfolg bei Ihren zukünftigen Experimenten.