21. Dezember 2012
Verlust von peritonealen Integrität bietet ein neues Paradigma zu verstehen und zu behandeln chronischen Beckenschmerzen bei Frauen mit leichten Formen von Endometriose und kann leicht nachgewiesen werden unter Verwendung intraoperative Instillation von Farbstoff zum Zeitpunkt der Laparoskopie.
Das übergeordnete Ziel des folgenden Experiments besteht darin, Behandlern, die Frauen mit Beckenschmerzen versorgen, eine einfache Methode an die Hand zu geben, um das Vorhandensein und Ausmaß einer diskreten Endometriose sichtbar zu machen. Dies wird erreicht, indem zunächst eine Übersicht über sichtbare Endometriose durchgeführt wird, um offensichtliche Erkrankungen zu identifizieren. Im zweiten Schritt wird Methylenblau-Farbstoff appliziert, der Bereiche mit diskreter Endometriose sichtbar macht, die bei einer normalen Laparoskopie möglicherweise übersehen werden.
Anschließend werden alle blaugefärbten Bereiche vollständig entfernt, um den Patienten restlos von der Erkrankung zu befreien. Die Ergebnisse, die mittels Rasterelektronenmikroskopie gewonnen wurden, zeigen, dass dieser Ansatz unsichtbare Endometriose entfernt, die die darunterliegenden Peritonealzellen beeinträchtigt und dadurch menstruellem oder ovulatorischem Blut den Zugang zu den sensiblen Nerven ermöglicht, die das Becken innervieren und Schmerzen verursachen. Die Bedeutung dieser Technik reicht sowohl für die Diagnose als auch für die Behandlung der Endometriose, da sie es uns ermöglicht, subtile und sogar unsichtbare Formen der Endometriose zu erkennen, die die Peritonealoberfläche stören und das Blut in Kontakt mit den darunterliegenden Nerven bringen können, wodurch die Schmerzen erklärt werden, unter denen diese Patienten leiden.
Normalerweise gelangt während des Eisprungs oder der Menstruation etwas Blut in die Beckenhöhle. Das Epithel des Beckens und des Bauches enthält eine intakte Schicht aus Mesothelzellen, die verhindert, dass dieses Blut oder die im Blut enthaltenen schmerzauslösenden Faktoren mit sensorischen Nervenfasern in Kontakt kommen. Bei Frauen mit Endometriose können entzündliche endometrioidartige Zellen dazu führen, dass die Peritonealzellen ihre Zell-Zell-Kontakte verlieren, wodurch dem Blut Zugang zu den darunterliegenden Geweben und Nervenfasern ermöglicht wird.
Diese Lücken in den Mesothelzellen können mittels Rasterelektronenmikroskopie sichtbar gemacht werden, sind aber auch der Grund dafür, dass der blaue Farbstoff die darunterliegenden Gewebe dort anfärben kann. Frauen mit chronischen Beckenschmerzen werden zunächst befragt, um ihre Krankengeschichte sowie Details zur Lokalisation der Schmerzen im Zusammenhang mit dem Menstruationszyklus zu ermitteln; assoziierte Symptome wie Beschwerden im Sinne eines Reizdarmsyndroms oder Harnblasenbeschwerden werden notiert und dokumentiert. Zusätzlich wird nach der Patientenauswahl eine körperliche Untersuchung der Patientin durchgeführt.
Stellen Sie sicher, dass Sie Frauen, die einer Laparoskopie unterzogen werden, um Erlaubnis für eine mögliche Resektion von Endometrioseherden und die Verwendung ihres Gewebes für Forschungszwecke bitten. Führen Sie die Laparoskopie mit standardisierten Techniken über einen fünf Millimeter großen Nabelkanal und zusätzliche fünf Millimeter große Kanäle im Unterbauch durch. Untersuchen Sie das Becken sorgfältig, um eventuelle Befunde einer Endometriose mit der präoperativen Schmerzlokalisation zu korrelieren, wie sie von der Patientin angegeben wurde.
Mischen Sie anschließend Methylenblaufarbstoff im Verhältnis 1 zu 200 mit steriler Kochsalzlösung und injizieren Sie die Lösung mit einer Aspirationsnadel auf die Beckenoberflächen. Führen Sie danach eine Saugirrigation durch, um überschüssigen Farbstoff zu entfernen und die Peritonealflächen zu spülen. Untersuchen Sie erneut sorgfältig das Becken und dokumentieren Sie alle Bereiche mit Anfärbung durch den blauen Farbstoff.
Sofern möglich, reseziere die betroffenen Bereiche des Peritoneums. Nach Abschluss der Resektion prüfe das Becken, um sicherzustellen, dass keine Blutung vorliegt. Danach lasse das CO2-Gas ab, entferne die Instrumente und verschließe die Inzisionen mit einem Gewebekleber.
Nach einer Stunde Ruhe im Aufwachraum darf die Patientin nach Hause gehen, um eine nicht sichtbare Endometriose mittels Rasterelektronenmikroskopie nachzuweisen. Dazu zunächst peritoneale Abschnitte mit einer sterilen Telfa-Kompresse vernähen, um das Präparat zu glätten und die intraperitoneale Seite nach oben auszurichten. Anschließend die Abschnitte in Glutaraldehyd-Fixierlösung für die REM geben. Sobald die Proben ausreichend fixiert sind, können sie bei einer anderen Patientin zur Rasterelektronenmikroskopie verarbeitet werden, bei der zuvor eine Endometriose vom Blasenbereich reseziert wurde und die seitdem keine Schmerzen mehr in diesem Bereich hat.
Der Farbstoff färbte die Peritonealflächen nicht an, was die Verbindung zwischen der Anfärbung mit blauem Farbstoff und dem Vorhandensein von Beckenschmerzen unterstützt. Dieses Bild der Peritonealfläche stammt von einer Frau mit chronischen Beckenschmerzen und Blasenbeschwerden, die sich zum Zeitpunkt der Menstruation verschlechterten. Das laparoskopische Bild wurde vor der Applikation des blauen Farbstoffs aufgenommen, und allein die Reflexion des laparoskopischen Lichts zeigte Areale, die verdächtig auf klare Läsionen der Endometriose hindeuteten, wie durch die Pfeile in diesem Bild aus demselben Bereich angezeigt. Es ist ersichtlich, dass der auf die Blase applizierte blaue Farbstoff deutliche Abschnitte des Peritoneums anfärbte.
Dieses Bild zeigt eine Resektion des Peritoneums, das über der Harnblase liegt, und dieses Bild zeigt die Zellen aus diesem Bereich, wie sie mittels Rasterelektronenmikroskopie sichtbar sind. Die Probe wurde gemäß Standardverfahren aufbereitet und mit einer Legierung aus Gold und Platin bis zu einer Dicke von 20 Nanometern aufgedampft. Es ist ersichtlich, dass das Peritoneum mit Zellen bedeckt ist, die als Endometriose angesehen werden, und dass die mesothelialen Zellen des Peritoneums Lücken in ihren Zell-Zell-Kontakten aufweisen, wodurch die darunterliegende extrazelluläre Matrix freigelegt wird.
Während dieses Rasterelektronenmikroskopbild von einer normalen Peritoneumprobe, die auf die gleiche Weise präpariert wurde, zeigt, dass die Epithelzellen des normalen Peritoneums eng miteinander verbunden sind. Wie Sie sehen können, handelt es sich hierbei um eine recht einfache Technik, die Sie bei Ihren laparoskopischen Eingriffen anwenden können, um subtile und unsichtbare Endometriose zu identifizieren, die für eine erhöhte Permeabilität der Peritonealoberflächen verantwortlich ist. Indem Sie die gesamte Läsion zusammen mit allen endometrioiden Zellen resektieren, verschaffen Sie Ihrer Patientin die beste Chance auf Schmerzlinderung.
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Diese Studie stellt eine Methode zur Erkennung subtiler Endometriose bei Frauen mit chronischen Beckenschmerzen vor. Mithilfe von Methylenblaufärbung während der Laparoskopie können Ärzt:innen Bereiche der Endometriose identifizieren und resezieren, die mittels Standardverfahren möglicherweise nicht sichtbar sind.
Diese Studie stellt eine auf Methylenblautest basierende Technik zur Detektion subtiler Endometriose während der Laparoskopie vor, die eine wichtige diagnostische Lücke bei Frauen mit chronischen Beckenschmerzen schließt. Durch die Visualisierung und Resektion von Verlust der Peritonealintegrität unterstützt die Methode die mechanistische Risikominimierung in der Endometrioseforschung und könnte die Zielvalidierung in Studien zu Schmerzbahnen verbessern. Der Ansatz bietet ein reproduzierbares, einfach zu handhabendes Werkzeug für präklinische Modelle, die Peritoneal-Nerv-Interaktionen bei Beckenschmerzen untersuchen.
Die Methode fügt sich in die Forschungskontinuum zur Endometriose ein, das von der frühen Entdeckung (Hypothesenprüfung mittels Farbstoffaufnahme) über die präklinische Validierung (ultrastrukturelle Bestätigung) bis hin zur therapeutischen Intervention (Resektion) reicht und unterstützt so ein iteratives De-Risiko-Management von Zielstrukturen.