8. April 2015
Dieses Protokoll beschreibt das modifizierte Lochbrett, bei dem es sich um einen Verhaltenstestaufbau handelt, der die Eigenschaften eines offenen Feldes und eines traditionellen Lochbretts umfasst. Dieser Aufbau ermöglicht die differentielle Analyse des unkonditionierten Verhaltens kleiner Laborsäuger sowie die Analyse kognitiver Fähigkeiten.
Das übergeordnete Ziel der folgenden Experimente ist es, das unkonditionierte Verhalten von kleinen Laborsäugern zu messen und ihre kognitiven Fähigkeiten zu analysieren. Dies wird erreicht, indem die Tiere in das modifizierte Lochbrett gelegt werden, um ihr unkonditioniertes Verhalten mit oder ohne Anwesenheit ihrer Käfiggenossen zu beobachten und zu bewerten. Zusätzlich kann vor der Prüfung ein neuartiges und bekanntes Objekt oder Lebensmittelpellet in die Vorrichtung eingebracht werden, das zur Messung der Objekterkennung oder der Hemmung der Nahrungsaufnahme verwendet werden kann.
Eine dritte Anwendung dieser Methode besteht darin, das Tier in die kognitive Version des modifizierten Ganzbretts zu setzen, wo die Belohnung mit einem kontrastierenden farbigen Identifikator in die Warteschlange eingereiht wird. Um die kognitiven Fähigkeiten des Probanden zu messen, zeigen die Ergebnisse ein Spektrum von unkonditioniertem Verhalten. Da die Methode mehrere Verhaltensdimensionen in einem einzigen Paradigma kombiniert, das Merkmale aus einem traditionellen Hole Board und einem Open-Field-Test enthält, besteht der Hauptvorteil dieser Technik darin, dass sie die Nachteile einer Testbatterie überwindet, indem sie die Anzahl der verwendeten Tiere reduziert, mögliche Testreihenfolgeeffekte umgeht und den Zeiteffekt und die Kosten reduziert. Die Tests sollten während der Dunkelphase im regulären Stallraum durchgeführt werden, wobei die aktivste Phase des Tieres für die Zwecke dieser Videountersuchung unter hellen Lichtbedingungen durchgeführt wird.
Verhaltenstests sollten an Tieren durchgeführt werden, die an ihre Umgebung und den Umgang mit dem Versuchsleiter gewöhnt wurden. Platzieren Sie die Platine mit den Zylindern in der Mitte der Experimentierbox. Positionieren Sie dann ein Bühnenlicht über dem Brett, um einen Kontrast in der Lichtintensität zwischen dem Brett und der Box zu erzeugen und den aversiven Charakter des Bretts zu erhöhen.
Platzieren Sie zunächst das bekannte Objekt in der Apparatur zwei Zentimeter entfernt von einem neuartigen Objekt in der Ecke gegenüber dem Startpunkt. Nehmen Sie dann das zu testende Tier aus dem Heimkäfig und platzieren Sie es mit dem Gesicht zur Wand in einer bestimmten Ecke des Geräts. Lassen Sie das Tier etwa fünf Minuten lang frei erkunden.
Lassen Sie einen erfahrenen Beobachter die Verhaltensparameter mit Hilfe einer Verhaltensbewertungssoftware bewerten. Verwenden Sie die in dieser Tabelle aufgeführten Parameter und messen Sie auch die Zeit, die das Tier benötigt, um sich dem neuen und vertrauten Objekt oder dem neuartigen und vertrauten Lebensmittel zu nähern. Reinigen Sie das Gerät nach jedem Versuch mit Leitungswasser und einem Papiertuch.
Um eine Verzerrung aufgrund von Geruchsreizen zu vermeiden, setzen Sie die Gruppengenossen für 10 bis 30 Minuten in das Gruppenkompartiment, bevor Sie das Versuchstier testen, um eine Behausung zu ermöglichen. Platzieren Sie dann das Versuchstier in das Testfach und lassen Sie es das modifizierte ganze Brett fünf Minuten lang frei erkunden oder so lange, wie es Ihr eigenes Protokoll erfordert. Lassen Sie auch hier einen erfahrenen Beobachter die Verhaltensparameter mit Hilfe einer Verhaltensbewertungssoftware live bewerten, wobei die in Tabelle eins aufgeführten Parameter wie zuvor verwendet werden.
Bevor Sie mit diesem Experiment beginnen, machen Sie die Tiere mit einer sehr schmackhaften Belohnung vertraut. Hier wird ein Stück Mandel verwendet. Bieten Sie die Belohnung einmal täglich an zwei aufeinanderfolgenden Tagen mit einer Pinzette im Heimkäfig an und setzen Sie vor dem Experiment eine Trennwand ein, um die Größe der Box auf 50 x 50 Zentimeter zu reduzieren.
Zum Testen von Mäusen legen Sie ein kleineres Brett in die Mitte der Box. Dieses Diagramm zeigt den Aufbau der modifizierten Lochplatte. Nächster Duft, alle 10 Zylinder mit einem Geschmack, von dem die Tiere angezogen werden, wie Vanille und Köder, alle Zylinder mit der Belohnung, die unter einem Gitter platziert ist, damit sie nicht entfernt werden kann.
Q3-Zylinder mit einem farbigen Ring, der sich vom PVC abhebt und diese Zylinder mit einer abnehmbaren Belohnung ködert. Platzieren Sie das Tier wieder in der gleichen Ecke des Geräts und lassen Sie einen erfahrenen Beobachter live scoren. Die Verhaltensparameter mit Hilfe von Verhaltensbewertungssoftware.
Messen Sie die in Tabelle 2 aufgeführten Parameter zusätzlich zu den zuvor in Tabelle 1 gezeigten, mit Ausnahme der Parameter im Zusammenhang mit der Objekterkennung oder der Hemmung der Nahrungsaufnahme. Führen Sie täglich vier Trainingsversuche mit einem konstanten Intervall zwischen den Versuchen durch, bis eine konstante Zeit für das Sammeln aller drei Mandelstücke festgelegt ist. Reinigen Sie das Gerät nach jedem Versuch mit Leitungswasser und einem Papiertuch, um eine Verzerrung aufgrund von Geruchsreizen zum Testen des Umkehrlernens zu vermeiden.
Sobald das Tier vollständig trainiert ist, stechen und ködern Sie drei verschiedene Zylinder oder so viele verschiedene Zylinder, wie es Ihr eigenes Protokoll erfordert, und testen Sie das Tier in der erforderlichen Anzahl von Versuchen. Die ersten vier Bilder zeigen Ergebnisse des kognitiven Testparadigmas, das die kognitive Funktion von C 57 schwarz sechs J-Mäusen mit leichter zerebraler Hypoxie-Ischämie mit der Bezeichnung HI 45, schwerer Hypoxie-Ischämie mit der Bezeichnung HI 75 und Scheinkontrollmäusen misst. Dieses Diagramm zeigt die mittlere Latenzzeit zum Abschließen der vier Versuche eines Testtages.
Dieses Diagramm zeigt die Anzahl der erneuten Besuche eines Abkantlochs an jedem Testtag. Ein Maß für Fehler im Kurzzeitgedächtnis. Hier werden Besuche von nicht eingespannten Löchern gezeigt.
Dies ist ein Maß für Fehler im Langzeitgedächtnis. Hier werden die Daten für die Anzahl der Auslassungsfehler angezeigt. Ein Auslassungsfehler ist definiert als die Anzahl der nicht besuchten Köderzylinder.
Um zu bestätigen, dass die I45-Gruppe keine kognitive Beeinträchtigung aufwies, wurde diese Gruppe gegen die Scheinkontrollen getestet. In einer Umkehraufgabe wurden die drei Schlitze auf drei verschiedene Zylinder aufgeteilt und die Tiere in vier Versuchen getestet. Der Umkehreffekt wird deutlich, wenn man den letzten Versuch der ersten Stufe mit dem ersten Versuch der Umkehrstufe vergleicht.
Dieses Bild zeigt die Latenz bis zum Abschluss der Studie für beide Gruppen, und ein deutlicher Gesamteffekt der Behandlung ist offensichtlich. Dies bedeutet, dass es in der HI 45-Gruppe eine beeinträchtigte kognitive Flexibilität gab, die mit dem modifizierten Ganzboard mit der Umkehraufgabe nachweisbar war. Nachdem Sie sich dieses Video angesehen haben, sollten Sie ein gutes Verständnis dafür haben, wie Sie das modifizierte ganze Board sowohl in der allgemeinen als auch in der kognitiven Version verwenden können.
Dieses Protokoll beschreibt das modifizierte Lochbrett, einen Verhaltensversuch, der Merkmale eines offenen Feldes und eines traditionellen Lochbretts kombiniert. Es ermöglicht die differenzielle Analyse unbedingten Verhaltens und kognitiver Fähigkeiten bei kleinen Laborsäugern.
Das modifizierte Lochbrett-Paradigma (mHB) ermöglicht eine umfassende Verhaltens- und kognitionsbezogene Profilierung bei kleinen Labor-Säugetieren und unterstützt so die Validierung von Zielstrukturen in einem frühen Stadium sowie die Risikominimierung hinsichtlich deren Wirkmechanismen in der neuropsychiatrischen und zentralnervösen (CNS) Wirkstoffforschung. Durch die Integration mehrerer Verhaltensdimensionen in einem einzigen Testverfahren reduziert das mHB den Tierverbrauch, minimiert störende Effekte der Testreihenfolge und beschleunigt die Vorselektion von Wirkstoffkandidaten für CNS-relevante Zielstrukturen.
Das mHB-Paradigma integriert sich in die Entdeckungskette von der frühen Target-Validierung über die Identifizierung von Leitverbindungen bis hin zur präklinischen Verhaltensbewertung, insbesondere in portfolios mit Fokus auf das zentrale Nervensystem (CNS).