Prueba de la eficacia de los agentes farmacológicos en un modelo de entrega de destino pericárdico en la producción porcina

El objetivo general del siguiente experimento es identificar agentes farmacológicos administrados en el espacio pericárdico que puedan reducir los efectos secundarios durante los procedimientos quirúrgicos o mejorar los resultados del trasplante. Los electrodos de estimulación se colocan en la aurícula derecha y el ventrículo derecho para determinar el período refractario. Un estudio de estimulación eléctrica por pulsos en el programador determina el período refractario de las aurículas, el nódulo auricular-ventricular y los ventrículos.

Se administra una descarga en la orejuela auricular izquierda para inducir la fibrilación auricular con el fin de determinar la carga de FA. El fármaco se administra en el espacio pericárdico. El período refractario y la carga de FA se toman a los 30 minutos y a los 60 minutos después del parto pericárdico para compararlos con los basales.

A continuación, se administra la cardioplejia a través de una cánula por vía aórtica y se detiene el corazón. Por lo tanto, se puede evaluar la viabilidad de varios agentes farmacológicos que pueden disminuir la incidencia de arritmias cardíacas y/o daño esquémico tanto durante la cirugía cardíaca como durante el trasplante. La elección de los cerdos tiene varias ventajas.

Permite la colocación de múltiples catéteres de detección y cables de estimulación. La anatomía cardíaca del cerdo imita la de un humano adulto. Una cuna pericárdica quirúrgica es fácil de formar en los animales, y sus volúmenes de líquido pericárdico, comportamientos hemodinámicos y propiedades electrofisiológicas son similares a los de los humanos.

Varios procedimientos clínicos podrían beneficiarse de la administración pericárdica de terapias, incluido el parto, los procedimientos quirúrgicos cardíacos y la recuperación de órganos para trasplantes. Este método también puede ayudar a responder preguntas clínicas importantes relacionadas con el diagnóstico y los tratamientos cardíacos, como qué agentes son más eficaces para el parto pericárdico con el fin de reducir la carga de FA y/o prevenir las arritmias asociadas con los procedimientos cardíacos. Un cerdo de 70 a 80 kilogramos es anestesiado y el isofluorado intubado se suministra en una combinación de aire doméstico y oxígeno.

Antes de continuar, asegúrese de que el cerdo esté en un plano profundo de anestesia verificando la ausencia de tono de la mandíbula. Comience la cirugía accediendo cuidadosamente a la yugular externa derecha y a la arteria carótida con cauterización y disección roma. Una vez expuesto, coloque un catéter ganz de cisne francés de 8,5 en la yugular externa e infle el globo a 1,5 CC.

Luego, atraviese el catéter a través de la aurícula derecha hasta el ventrículo a través de la válvula pulmonar y baje por la arteria pulmonar hasta que sienta una presión en cuña. En este punto, desinfle el globo y deje el catéter en esta posición. Registre la presión auricular derecha y la presión de la arteria pulmonar con el balón.

A continuación, coloque un catéter de presión de cinco balones franceses en la yugular externa e introdúzcalo en el ventrículo derecho. Coloque otro catéter de presión con balón 5F en la arteria carótida, prolapse a través de la válvula aórtica y colóquelo en el ventrículo izquierdo. Luego, enjuague todos los catéteres de presión con 20 unidades por mililitro de solución salina hepronada y registre todos los datos de presión del ventrículo izquierdo, el ventrículo derecho, la presión de la arteria pulmonar y la presión auricular derecha.

El siguiente paso es acceder con cuidado a la yugular externa izquierda. Una vez accedidos, colocar dos 11 introductores de hemostasia francesa en la yugular y asegurarlos con sutura. Luego, coloque los catéteres orientables en los introductores.

Ahora, comience a usar la guía fluoroscópica. Coloque cables de fijación activa en la orejuela auricular derecha y en el vértice del ventrículo derecho. Conecte los cables del analizador a los cables implantados y use un programador para probar la captura.

Establezca los parámetros en ocho veces, 0,25 milisegundos, y establezca el ritmo 10 latidos por minuto más alto que la tasa intrínseca en ese momento, o incluso más. A continuación, registre la impedancia relativa de cada derivación. A continuación, realice una incisión medial desde la apófisis xifoidea hasta cerca del punto de inserción de los músculos esternocleidomastoides.

Luego, haga un corte de cizalla a través de las porciones restantes de la estructura ósea del esternón y, para retraer el esternón, diseccione el ligamento esternal-pericárdico. Con el esternón retraído, haga una disección roma para separar el pericardio de los revestimientos pleurales. A continuación, haga una incisión medial-sagital de tres a cinco centímetros en el pericardio y cree una cuna pericárdica con cuatro suturas de nudo cuadrado en cada esquina.

Por último, coloque un electrodo bipolar temporal en la región apical del ventrículo izquierdo y coloque un electrodo de estimulación temporal de inmersión unipolar en el apéndice auricular izquierdo. Para empezar, inicie un estudio de PSA. En primer lugar, programe una inducción de ráfaga de los parámetros de estudio PES para esperar ritmos de 400 o 300 milisegundos.

A continuación, programe un mínimo de 300 milisegundos de estimulación y reduzca la estimulación hasta que las cámaras cardíacas no se contraigan. Lo cual se nota por la detección de los cables de estimulación y determina el período refractario relativo. A continuación, fije el estimulador de césped al apéndice auricular izquierdo a través del cable de estimulación en inmersión.

Configúralo para que emita pulsos de dos segundos a cuatro hercios. Verifique esos ajustes con un osciloscopio. Ahora, administre un solo pulso a la orejuela auricular izquierda para reducir la fibrilación auricular, o AF.To determinar la carga relativa de FA, use el estimulador de césped una vez por minuto hasta 10 veces, hasta que se mantenga una FA durante un minuto.

Luego, permita que el animal permanezca en FA hasta por 10 minutos. Esta duración de tiempo representa la carga de AF. Si el corazón no ha dejado de fibrilar después de 10 minutos, electrocuta las aurículas con paletas directas a cinco julios para resincronizar el corazón.

Iniciar la administración pericárdica del agente farmacéutico potencialmente protegido. El período refractario y la carga de FA se determinan de nuevo a los 30 minutos y a los 60 minutos después de la administración pericárdica del agente farmacéutico. Para explantar el corazón, primero se implanta la cánula de vía aórtica.

Diseccionar cuidadosamente el tejido pericárdico alrededor de la aorta ascendente y extirpar el pericardio. Luego, asegure la cánula con suturas de etienlace 2.0 en la aorta ascendente, a unos dos o tres centímetros de distancia. Después de colocar las suturas, administrar 30.000 unidades de heprina por vía intravenosa.

A continuación, sutura la cánula de la vía aórtica a la aorta. Con el sistema de administración presurizado, retire el bisel del estilete y coloque una abrazadera en la cánula para detener el flujo. A continuación, prepare la cardiopalegia fría de Santo Tomás para entregar a 150 milímetros de mercurio.

Asegure un catéter de irrigación a la cardiopalegia presurizada con una llave de paso de tres vías. A continuación, fije la llave de paso a la cánula de vía aórtica. Ahora, realice una abrazadera transversal.

Y enjuagar el corazón con cardiopalegia hacia la válvula aórtica, cerrando así la válvula y perfundiendo las coronarias. Para evitar que el corazón se sobrepresurice, haga una incisión en la arteria pulmonar. Una vez que el corazón esté detenido, excírcalo y transfiéralo a un tampón Henseleit frío de Krebs.

Para reanimar el corazón, se pueden canular los vasos de grado utilizando métodos de corazón visible. Una vez que el corazón perfundido esté dentro de los cinco grados de 37 grados Celsius, restaure un ritmo sinusal nativo usando descargas de 34 julios a los ventrículos a través de electrodos de parche epicárdico. Monitorizar la función cardíaca durante una hora a través de las mismas presiones medidas in situ.

Cada cinco minutos, tome una muestra de un CC del seno coronario. Cada 10 minutos, calcule el grosor de la pared ventricular y las fracciones de eyección. Utilizando el protocolo descrito, se observó un aumento notable en los períodos refractarios efectivos ventriculares después de una infusión de DHA in situ.

La medición de la presión máxima después de la reanimación mostró un aumento en la presión ventricular izquierda de los corazones tratados con DHA en comparación con los controles. La presión del ventrículo izquierdo en los corazones tratados fue significativamente mayor en varios momentos. Esta técnica permite la evaluación de agentes terapéuticos administrados por objetivos que podrían usarse traslacionalmente para pacientes sometidos a procedimientos cardíacos, incluida la cirugía, o para la recuperación de corazones para trasplantes.

El empleo de este enfoque experimental puede allanar el camino para que los cirujanos e investigadores exploren nuevos agentes y estrategias de tratamiento que mitiguen la fibrilación auricular, reduzcan el daño miocárdico y reduzcan las lesiones de reprofusión asociadas.