30 de julio de 2008
El microscopio de luz es una herramienta básica para el biólogo celular, que debe tener un conocimiento profundo de cómo funciona, cómo debe ser alineado para diferentes aplicaciones, y cómo se debe mantener como sea necesario para obtener la máxima capacidad de formación de imagen y resolución. Los componentes del microscopio se describen en detalle aquí.
Los microscopios ópticos son herramientas esenciales en la investigación biomédica. Los componentes ópticos permiten una resolución de imagen mucho mayor que la observación a simple vista. Al combinar la microscopía con el procesamiento digital de imágenes, los investigadores pueden mejorar la visibilidad de la imagen y realizar mediciones cuantitativas precisas.
Este video lo guiará a través de los principales componentes del microscopio y sus funciones. Hola, soy Victoria Sanon Frolic del Servicio Central de Imagen Óptica del Centro de Ciencias de la Salud de la Universidad de Texas en San Antonio. Hoy les mostraré los componentes principales de su microscopio vital y sus funciones básicas.
Así que vamos a hacer un recorrido por su microscopio. Antes de usar un microscopio, es recomendable familiarizarse con sus componentes y sus funciones. Este es un microscopio óptico compuesto invertido Nikon Eclipse TI equipado para microscopía de luz transmitida y microscopía epifluorescente.
La dirección a lo largo del eje del microscopio se denominará eje Z y las direcciones perpendiculares como los ejes X e Y. Primero, examinaremos el tubo del ocular, la torreta que contiene los objetivos y la platina. Estos son los componentes principales que forman la imagen en el microscopio.
Las piezas son la interfaz entre el observador y el microscopio. Al sujetar la base de los tubos de los oculares binoculares, puede ajustar la distancia interpupilar moviéndolos más cerca o más lejos. Esto le permite observar cómodamente con ambos ojos.
Al mismo tiempo, ahora también se puede ajustar independientemente el enfoque del ocular para cada ojo. El aumento del ocular está marcado en el cilindro. Las cámaras se montan rutinariamente en los microscopios para la adquisición de imágenes.
Este microscopio en particular utiliza un adaptador tipo C para conectar una cámara CCD al puerto lateral del cuerpo del microscopio. Se gira un botón en el microscopio para colocar un prisma que dirija los rayos de luz que forman la imagen lejos de los oculares y hacia la cámara, que está montada en el puerto de la cámara. Los diferentes objetivos, que determinan principalmente la magnificación y la resolución, están montados en una torreta giratoria.
Cada objetivo está marcado con especificaciones como el aumento, la apertura numérica, el medio de inmersión requerido (por ejemplo, aceite, glicerina o aire), el grosor del cubreobjetos y otras características especiales como el modo de iluminación, la luz que sale por los oculares y las piezas nasales desenfocadas o proyectadas al infinito. El tubo objetivo contiene una lente de enfoque positiva que enfoca la luz de imagen para el ocular o la cámara. Ahora que les he mostrado los componentes formadores de imagen del microscopio, echemos un vistazo a los componentes que nos ayudarán a enfocar una imagen y realizar ajustes en la luz transmitida.
A continuación, examinaremos la platina, que es el soporte mecánico que sostiene la preparación microscópica. Al girar los mandos, se puede ajustar la posición de la muestra en las direcciones x e y. En la configuración del microscopio invertido, la platina es fija y el enfoque de la muestra se logra moviendo los objetivos hacia arriba y hacia abajo a lo largo del eje Z mediante los mandos de enfoque grueso y fino ubicados en el cuerpo del microscopio.
Ahora examinaremos los componentes de transiluminación del microscopio óptico, que proporcionan la luz para visualizar sus especímenes. En primer lugar, tenemos la lámpara y su carcasa, que suministra la luz para iluminar la muestra. En la microscopía óptica, la lámpara suele ser una bombilla halógena de bajo voltaje con un filamento de tungsteno que puede ajustarse para controlar la intensidad de la luz. Puede colocarse un obturador tras la fuente de luz para controlar la duración de la iluminación.
Justo después de la fuente de luz se encuentra el diafragma de campo, cuyo ajuste controla el área o campo del espécimen que debe iluminarse. A continuación está el componente conocido como condensador, cuya función principal es enfocar una iluminación brillante y uniforme sobre el espécimen. El diafragma de iris situado en la parte inferior del condensador controla el ángulo del cono de iluminación del condensador sobre el espécimen.
El ajuste de este diafragma controla el tamaño y la apertura numérica del cono de luz dirigido hacia la muestra, lo que resulta en una iluminación correcta, contraste y profundidad de campo. El ajuste óptico del diafragma del condensador permite una iluminación adecuada del elemento frontal del objetivo. Idealmente, este ajuste debe realizarse para cada objetivo con el fin de aprovechar al máximo el potencial del lente. Para la iluminación epifluorescente, la fuente de luz suele ser una lámpara de arco de xenón o mercurio.
En nuestro microscopio, una lámpara de arco con fuente de luz basada en mercurio debe manejarse con cuidado, ya que podría explotar si se manipula inadecuadamente. Asegúrese de usar guantes al instalar la bombilla, porque las huellas dactilares y los residuos pueden crear puntos calientes y provocar que la lámpara se agriete. Se recomienda encarecidamente no hacer funcionar una lámpara de arco durante más tiempo que el número de horas para el cual está clasificada.
La trayectoria de la luz fluorescente incluye un diafragma de campo y un diafragma de apertura, similar a la trayectoria de luz de transmisión. Más allá de estos diafragmas, la luz encuentra un conjunto de filtros que seleccionan el ancho de banda luminoso y dirigen la iluminación hacia el objetivo para alcanzar la muestra en la trayectoria de iluminación episcópica, donde el objetivo actúa tanto como condensador como objetivo.
Acabamos de mostrarle los componentes principales de su microscopio óptico. Comencé mostrándole los componentes formadores de la imagen del microscopio, es decir, los oculares, el objetivo y la cámara CCD. Luego revisamos la manipulación de la platina, los controles de ajuste de enfoque y el condensador.
Así que eso es todo. Gracias por ver este video y buena suerte con su microscopía.
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El microscopio óptico es un instrumento fundamental en la investigación biomédica, ya que proporciona una resolución de imagen mejorada en comparación con el ojo desnudo. Este artículo detalla los componentes principales de los microscopios ópticos y sus funciones, esenciales para los investigadores en este campo.
Comprender los componentes del microscopio óptico es fundamental para obtener imágenes celulares confiables en los flujos de trabajo de descubrimiento temprano. El alineamiento y mantenimiento adecuados garantizan una calidad de imagen reproducible, lo que apoya la validación de objetivos y el desarrollo de ensayos. Este conocimiento reduce la variabilidad técnica y mejora la confianza predictiva en modelos preclínicos.
El microscopio óptico apoya la biología del descubrimiento mediante la comprobación de hipótesis y la aclaración de vías, posibilitando la desactivación de riesgos biológicos en etapas tempranas.