Antibody-Based Technologies

La vidéo explique le processus de production d’anticorps dans les cellules hôtes de mammifères, de l’expression des gènes à la sécrétion. Il implique la transcription, la traduction, la reconnaissance du signal, le repliement correct et la libération éventuelle dans le milieu extracellulaire via des vésicules sécrétoires.

Cette vidéo présente une méthode de génération d’anticorps à partir de cellules de mammifères en introduisant des vecteurs plasmidiques avec des gènes à chaîne lourde et légère. Ces vecteurs interagissent avec la polyéthylénimine et pénètrent dans les cellules en formant des polyplexes ; Plus tard, ils sont traduits en protéines individuelles et assemblés en anticorps complets, qui sont sécrétés dans le milieu extracellulaire.

Cette vidéo présente un test permettant de produire des anticorps monoclonaux contre l’aminopeptidase porcine N (APN), une métallopeptidase liée à la membrane, à l’aide d’une technologie d’hybridome traditionnelle. Lors de l’immunisation d’une souris avec l’APN, les cellules de la rate sont récoltées et fusionnées avec des cellules de myélome immortelles pour produire des hybridomes. Les hybridomes sont ensuite sélectionnés et proliférés à l’aide du milieu HAT...

Cette vidéo montre une procédure de production d’anticorps recombinants contre la métallopeptidase. Les plasmides recombinants porteurs de gènes pour l’anticorps, la protéine fluorescente verte et la résistance aux antibiotiques sont transfectés dans les cellules épithéliales avec de la lipofectamine. Les cellules transfectées sont sélectionnées et cultivées pour générer des anticorps recombinants.

La vidéo montre une technique de génération d’anticorps monoclonaux à partir de lymphocytes B spécifiques de l’antigène. Des vecteurs d’expression eucaryotes codant pour les chaînes lourdes et légères d’anticorps, clonés à partir de lymphocytes B spécifiques de l’antigène isolés, sont introduits dans des cellules de mammifères à l’aide de polyplexes. Une fois à l’intérieur des cellules, ces vecteurs subissent une traduction, et les peptides à chaîne lourde et légère qui en résultent...

Cette vidéo présente un test de purification des anticorps monoclonaux à partir de fluides de culture cellulaire prélevés sur des cellules ovariennes de hamster chinois. Il utilise une résine de verre poreuse avec de la protéine A immobilisée, qui se lie à la région Fc des anticorps de l’échantillon, les séparant efficacement des contaminants. L’utilisation d’un tampon d’élution à faible pH affaiblit l’interaction, facilitant la récupération des anticorps purifiés.

La vidéo présente une méthode de production d’anticorps thérapeutiques à l’aide de cellules de mammifères transfectées de manière stable. La supplémentation en tryptone stimule la division cellulaire, ce qui entraîne une prolifération et favorise un rendement en anticorps plus élevé. Le milieu contenant des anticorps est récolté, filtré et stocké pour une utilisation ultérieure.

Cette vidéo présente une technique de purification des anticorps monoclonaux à partir du surnageant de culture obtenu à partir d’une culture cellulaire productrice d’anticorps. Le processus implique l’utilisation d’une matrice de billes d’agarose réticulée avec de la protéine A conjuguée, qui immobilise les anticorps du surnageant sur les billes, permettant une séparation efficace des contaminants. En appliquant un tampon d’élution à faible pH, l’interaction protéine A-anticorps est relâchée,...

Cette vidéo présente un test mesurant l’activation des fonctions effectrices des lymphocytes T par les anticorps. L’ajout d’un anticorps monoclonal spécifique de l’hémagglutinine (HA) du virus de la grippe à des cellules de mammifères transfectées exprimant l’HA entraîne la formation de complexes immuns avec l’HA. Lors de l’introduction de lymphocytes T modifiés exprimant des récepteurs Fc et un rapporteur de luciférase, les lymphocytes T sont activés par les complexes anticorps-HA, et cette...

La vidéo présente un test cellulaire pour détecter l’immunoglobuline G anti-aquaporine-4 à l’aide d’une biopuce contenant des cellules non transfectées et des cellules transfectées exprimant l’aquaporine-4. Cette méthode a des applications dans le diagnostic des troubles du spectre de la neuromyélite optique, confirmées par une forte fluorescence verte sur la biopuce.

Cette vidéo présente une technique permettant de générer des variants d’échappement d’anticorps monoclonaux neutralisants du virus de la grippe. Une suspension virale neutralisée par anticorps est injectée dans des œufs de poule embryonnés pour propager les variants d’échappement de manière sélective. Il en résulte une population virale principalement composée de variants d’échappement, confirmée par un test d’hémagglutination.

Cette vidéo montre les événements induits par FcγRIIIa initiés par des anticorps thérapeutiques dans des cellules tueuses naturelles humaines. La plateforme de stimulation artificielle facilite l’exploration des fonctions effectrices en aval, englobant le réarrangement cytosquelettique, la dégranulation, la production de chimiokines/cytokines et les voies de signalisation médiées par les parties FcγRIIIa et Fc des anticorps impliquées dans la liaison.

Cette vidéo présente un test cellulaire quantifiant l’absorption de Tau par la microglie murine à l’aide d’agrégats de Tau sensibles au pH et marqués par fluorescence, analysés par tri cellulaire activé par fluorescence pour une évaluation quantitative.

Cette vidéo présente une technique d’identification d’anticorps contre des antigènes spécifiques dans un échantillon à l’aide d’une culture neuronale de l’hippocampe de rat. En exposant des neurones en culture à des échantillons de patients contenant des auto-anticorps ciblant les récepteurs N-méthyl-D-aspartate (NMDAR), la présence d’auto-anticorps liés à la surface neuronale est révélée par immunomarquage.

Cette vidéo présente un test de mesure des anticorps neutralisants contre le virus respiratoire syncytial (VRS). La pré-incubation avec un sérum contenant des anticorps neutralisants contre le VRS neutralise les particules virales, réduisant ainsi l’infection cellulaire et la formation de plaques. Les cellules infectées par le virus sont ensuite soumises à la fixation, au blocage et au marquage d’anticorps conjugués aux fluorophores pour la visualisation de la plaque. Ce processus permet...

Cette vidéo présente la détection par électrochimiluminescence des auto-anticorps des îlots dans le sérum humain. Les anticorps présents dans le sérum font le lien entre l’antigène conjugué au ruthénium et l’antigène de capture biotinylé, formant des complexes qui sont détectés par des mesures d’électrochimiluminescence.

La vidéo fait la démonstration d’un immunodosage sur papier, impliquant des disques de cellulose fonctionnalisés à l’amine réticulés avec du glutaraldéhyde. L’immobilisation covalente des anticorps de capture spécifiques des IgG-Fc, suivie de l’introduction d’immunoglobulines G et d’anticorps de détection conjugués à la peroxydase de raifort, entraîne un changement de couleur confirmant la présence d’immunoglobulines G.

Cette vidéo présente une technique in vitro pour étudier l’effet des anticorps sur les biofilms fongiques. Le champignon pathogène Candida tropicalis sécrète un facteur de virulence sécrété par l’aspartyl protéinase 2 (Sap2), facilitant la formation du biofilm. Lors de l’introduction d’un sérum inactivé par la chaleur contenant des anticorps spécifiques de Sap2 qui inhibent la maturation du biofilm, la viabilité des cellules fongiques est évaluée à l’aide d’un test chromogène.

Cette vidéo présente un test mesurant les titres d’anticorps inhibiteurs de la neuraminidase grippale (NA) dans un échantillon de sérum. Un échantillon de sérum contenant des anticorps contre NA est ajouté à une plaque de micropuits recouverte de fétuine. Lors de l’ajout du virus, les anticorps empêchent le NA viral de fendre le fœtuin et d’exposer sa fraction galactose. Une lectine conjuguée à la peroxydase est ensuite ajoutée, qui se lie au galactose exposé. Le titre d’anticorps inhibiteurs...

Cette vidéo présente un test permettant de détecter les allo-anticorps HLA anti-donneur chez les receveurs d’organes. Un réseau de peptides est synthétisé pour représenter des épitopes potentiels pour le rejet d’organe médié par des anticorps. La matrice est incubée avec le sérum du receveur, contenant des allo-anticorps qui se lient à leurs épitopes cibles. La liaison des anticorps est détectée à l’aide de la chimiluminescence pour identifier les épitopes HLA spécifiques du donneur qui...

Cette vidéo présente la technologie de matrice de glycanes imprimée pour l’analyse des anticorps antiglycanes circulants dans le sérum de souris. Les anticorps contenus dans le sérum interagissent avec des glycanes spécifiques sur la puce, ce qui est confirmé par immunomarquage suivi d’un balayage par fluorescence.

Cette vidéo présente une technique qui applique la technologie des microréseaux peptidiques pour profiler la spécificité des anticorps reconnaissant les modifications post-traductionnelles (PTM) sur les peptides d’histones. Une lame de microréseau contenant des peptides d’histones conjugués à des fluorophores immobilisés avec des combinaisons PTM connues est traitée avec des anticorps spécifiques de PTM cibles. Ce processus permet d'identifier la spécificité de l'anticorps pour la cible et sa...

Cette vidéo présente une technique d’immunomarquage pour localiser les protéines d’arabinogalactane (AGP) et les pectines dans les tissus végétaux. Des coupes de tissus végétaux fixes et enrobées de résine sont colorées avec des anticorps primaires et secondaires fluorescents spécifiques à l’AGP et à la pectine et un colorant fluorescent liant la cellulose pour révéler leur colocalisation spécifique au tissu dans la paroi cellulaire.

Cette vidéo présente un test immuno-enzymatique indirect ou un test d’immunocapture sandwich ELISA conçu pour évaluer les niveaux de glycoprotéines immunogènes dans les vaccins. La plaque de test, contenant des anticorps spécifiques aux glycoprotéines, est incubée avec des échantillons de vaccin dilués en série, y compris des vaccins de référence et d’essai, suivie d’un immunodosage pour quantifier la teneur en glycoprotéines du vaccin testé.

Cette vidéo présente un protocole de détection de l’immunoglobuline E spécifique du sérum à l’aide d’un système de chimiluminescence à base de cartouche microfluidique. Les IgE sériques interagissent avec des allergènes distincts immobilisés dans la zone réactionnelle de la cartouche, qui sont ensuite détectés avec des anticorps anti-IgE conjugués à la peroxydase et un substrat chimiluminescent, permettant la détection simultanée de plusieurs IgE spécifiques aux allergènes.

Cette vidéo présente une technique permettant de détecter les protéines prions mal repliées dans les coupes cérébrales à l’aide de l’immunohistochimie. Après avoir traité la section du cerveau avec de l’acide formique pour dénaturer les prions et minimiser le risque d’infection, ainsi que pour démasquer les agrégats de prions à l’aide de la récupération d’épitopes induite par la chaleur, les sections sont immunomarquées pour les agrégats de protéines prions mal repliés et observées au...

Cette vidéo illustre le processus d’évaluation de la distribution intracellulaire des conjugués d’anticorps modifiés par peptide dérivés du virus à l’aide de la microscopie confocale. La séquence de localisation nucléaire dérivée du virus dirige les conjugués d’anticorps dans le cytoplasme, confirmée par immunomarquage et mesure de fluorescence.

Cette vidéo démontre une approche d’alimentation en anticorps pour étudier le trafic des récepteurs du glutamate dans les cultures neuronales primaires de l’hippocampe. Cette approche permet d’observer les populations de récepteurs à la fois au niveau du plasma et des membranes internes. La discrimination entre ces sous-ensembles est obtenue en marquant les récepteurs avant et après la perméabilisation membranaire, en utilisant le même anticorps primaire mais des anticorps secondaires conjugués...

Cette vidéo présente un test permettant de mesurer la phagocytose cellulaire dépendante des anticorps (ADCP) par les phagocytes du lait maternel. Des microsphères marquées par fluorescence, conjuguées à un complexe antigène-anticorps, sont combinées à une suspension cellulaire isolée du lait maternel pour induire une phagocytose cellulaire dépendante des anticorps par les leucocytes phagocytaires. Lors du marquage des cellules avec des anticorps contre l’antigène leucocytaire commun (CD45), la...

Cette vidéo présente un test permettant de quantifier la liaison de particules de type virus (VLP) de norovirus humains à des bactéries intestinales humaines. Les suspensions bactériennes sont mélangées aux VLP et incubées pour permettre la formation de complexes VLP-bactéries. Les complexes sont ensuite marqués avec des anticorps spécifiques aux VLP marqués au fluorophore, suivis d’une visualisation et d’une quantification basées sur la cytométrie en flux pour identifier le pourcentage de...

Cette vidéo présente un protocole d’immunodosage par électrophorèse capillaire pour détecter un biomarqueur protéique associé à la sclérose latérale amyotrophique (SLA) à partir de plaquettes sanguines humaines. La confirmation de la présence de la protéine biomarqueur de la SLA est obtenue par une séparation des protéines plaquettaires en fonction de la taille, suivie d’une détection chimiluminescente.

Cette vidéo présente une méthode d’évaluation de la réponse immunitaire des anticorps à un nouveau vaccin adjuvant à base de nanoémulsion chez des souris pré-immunisées. L’immunisation améliore la réponse en anticorps, comme le confirme la détermination des titres d’anticorps IgG.

Cette vidéo présente un test permettant de mesurer l’accumulation d’une sonde antibiotique fluorescente dans des cellules bactériennes. L’exposition à un inhibiteur de la pompe à efflux perturbe le gradient transmembranaire de protons dans les cellules bactériennes, auquel un antibiotique conjugué à un fluorophore est ajouté. L’inhibition des pompes d’efflux due à la perturbation du gradient de protons provoque l’accumulation de l’antibiotique à l’intérieur de la bactérie. Les cellules...

La vidéo présente une méthode d’imagerie par fluorescence pour la localisation in vivo d’anticorps dans un modèle de xénogreffe de tumeur de souris. Il s’agit de l’injection de cellules tumorales chez une souris pour générer des xénogreffes solides sous la peau. L’injection ultérieure d’anticorps fluorescents confirme la localisation spécifique grâce à des signaux de fluorescence améliorés dans la xénogreffe tumorale.

Cette vidéo présente une technique d’administration assistée par convection (CED) pour l’administration d’anticorps dans le cerveau de la souris. Le crâne d’une souris anesthésiée est exposé et un trou de bavure est créé dans la zone cible pour l’administration d’anticorps. Un cathéter étagé contenant des anticorps est inséré sur le site cible, et via une pompe à perfusion, un gradient de pression est créé pour délivrer des anticorps à un débit contrôlé.

Cette vidéo montre une procédure d’administration d’anticorps assistée par ultrasons dans un modèle murin. Les microbulles injectées rétro-orbitales oscillent sous l’effet des ultrasons, créant une perturbation transitoire de la barrière hémato-encéphalique, permettant aux anticorps marqués de pénétrer dans le cerveau.

Cette vidéo présente une technique impliquant un radio-immunoconjugué pour l’imagerie in vivo d’une tumeur dans un modèle murin. Lors de l’injection du radio-immunoconjugué, les anticorps du conjugué se lient à un antigène membranaire spécifique sur les cellules cancéreuses. Le radiotraceur du conjugué émet des positrons qui interagissent avec les électrons voisins pour produire de l’énergie, qui est détectée par un scanner de tomographie par émission de positons (TEP) pour créer une image de...

Cette vidéo illustre une méthode basée sur l’immunofluorescence pour visualiser les cellules de touffes intestinales dans des cryosections de jéjunum de souris flottantes. Dans les villosités intestinales, la co-localisation de la fluorescence verte à l’extrémité luminale avec une masse radiculaire rouge étendue indique la présence de cellules touffues.

Cette vidéo montre une méthode de suivi du trafic de lymphocytes T induits par des anticorps bispécifiques vers des tumeurs dans un modèle murin. Les lymphocytes T effecteurs transduits par la luciférase sont injectés dans une souris avec une xénogreffe de cellules tumorales sous-cutanées. Des anticorps bispécifiques sont ensuite introduits, se liant aux lymphocytes T et aux cellules tumorales. La localisation des lymphocytes T est suivie à l’aide de l’imagerie bioluminescente, l’amplitude du...

Cette vidéo présente l’immunomarquage à double marquage avec deux anticorps primaires différents élevés chez la même espèce, se liant spécifiquement aux protéines du parasite et de l’hôte. De plus, les anticorps secondaires marqués ciblant ces anticorps primaires permettent de visualiser distinctement les protéines de l’hôte et du parasite, facilitant ainsi l’étude de l’interaction hôte-pathogène.

La vidéo illustre une méthode de coloration par immunofluorescence utilisée pour examiner la neurogenèse dans l’hippocampe adulte. Initialement, une section de cerveau de souris subit un traitement avec des anticorps primaires dirigés contre les protéines marqueurs associées à la neurogenèse dans les cellules progénitrices neuronales. Ensuite, il est marqué avec des anticorps secondaires marqués avec des fluorophores. La section du cerveau est ensuite observée au microscope confocal pour...

Cette vidéo présente une technique d’immunomarquage des récepteurs sigma-1 dans une coupe de tissu cardiaque murin à l’aide de points quantiques. Le tissu cardiaque est fixé, osmimé, coloré, déshydraté, nauséabondé dans de la résine, puis sectionné. Les sections sont ensuite traitées avec des anticorps et marquées avec des points quantiques pour délimiter la localisation subcellulaire des récepteurs Sigma-1 à l’aide de la microscopie électronique.

Cette vidéo présente un test de coloration de l’ensemble des reins murins à l’aide d’une méthode de nettoyage des tissus appelée CUBIC (clear, unobstructed brain/body imaging cocktails and computational analysis) et de coloration immunofluorescente. Le rein est soumis à un nettoyage tissulaire, au cours duquel le rein est délipidé, décoloré et traité avec une solution d’adaptation de l’indice de réfraction pour rendre le tissu transparent pour une imagerie tridimensionnelle optimale. Le tissu...

Cette vidéo présente un test d’immunofluorescence pour détecter les agrégats d’alpha-synucléine spécifiques aux maladies neurodégénératives sur des coupes de biopsie cutanée. L’immunocoloration flottante est utilisée pour marquer par fluorescence l’hydrolase carboxyl-terminale et les agrégats d’alpha-synucléine dans les neurones dermiques. Au microscope confocal, les cellules présentant la fluorescence des deux anticorps indiquent la présence d’agrégats d’alpha-synucléine dans les neurones...

Cette vidéo présente une technique d’évaluation de l’infiltration de macrophages intestinaux dans un modèle murin de colite à l’aide de la tomographie médiée par fluorescence (FMT). Après avoir induit une colite chez une souris via du sulfate de sodium de dextran (DSS), l’animal reçoit une injection d’anticorps qui reconnaissent le marqueur de glycoprotéine F4/80 sur les macrophages infiltrés dans le côlon. La souris est ensuite imagée dans un dispositif FMT où les signaux de fluorescence et de...

Cette vidéo présente un test d’absorption d’anticorps pour imager la signalisation Notch/DeltaD chez les progéniteurs de la glie radiale du poisson-zèbre. Il s’agit de monter des embryons de poisson-zèbre déchorionnés inclus dans de l’agarose, d’injecter une solution de colorant ciblant les ligands DeltaD sur les RGP et d’imager au microscope à fluorescence pour une division cellulaire asymétrique confirmant l’activation de la signalisation Notch/DeltaD.

Cette vidéo démontre l’immunocapture des vésicules extracellulaires à l’aide de conjugués anticorps-nanoparticules magnétiques marqués par fluorescence. Le processus implique une formation complexe, une coloration avec des anticorps de détection marqués par fluorescence, une séparation magnétique et une analyse cytométrique en flux pour la caractérisation antigénique.

Cette vidéo présente un immunodosage basé sur des billes multiplex pour quantifier plusieurs cibles de cytokines dans un échantillon. Un mélange de microsphères distinctes conjuguées à des anticorps spécifiques aux cytokines est utilisé pour lier les cytokines présentes dans l’échantillon. Les rapporteurs marqués à la streptavidine sont immobilisés sur les cytokines liées à l’aide d’anticorps de détection biotinylés. La cytométrie en flux identifie les cytokines liées en fonction de la taille...

Cette vidéo présente un protocole d’évaluation de l’activation des cellules dendritiques à l’aide de cellules tumorales enrobées d’immunoglobulines G (IgG). Les cellules dendritiques internalisent les cellules tumorales enrobées d’IgG, traitent les antigènes tumoraux et les présentent à la surface par le biais des molécules du CMH-II, ainsi que la co-expression de la molécule de costimulation CD86. Ces cellules dendritiques subissent ensuite une immunocoloration et une analyse par cytométrie en...

Cette vidéo présente une méthode pour détecter les souches cyanobactériennes dans un échantillon environnemental à l’aide d’une puce à microréseaux d’anticorps. Les échantillons porteurs de diverses bactéries interagissent avec les anticorps imprimés, et l’immunomarquage avec des anticorps anti-cyanobactéries marqués au fluorophore révèle la présence de souches cyanobactériennes spécifiques par fluorescence à des endroits distincts.

Cette vidéo montre une technique d’immunocoloration de cellules encapsulées dans un hydrogel 3D. La culture d’hydrogel contenant des cellules progénitrices neurales est fixée, perméabilisée et traitée avec une solution bloquante pour éviter l’immunocoloration non spécifique. Un cocktail d’anticorps primaires est ajouté pour lier des protéines spécifiques, suivi d’anticorps secondaires marqués par fluorescence et d’une coloration nucléaire. L’échantillon est ensuite monté sur une lame et observé...

Cette vidéo présente une technique de perfusion continue d’anticorps spécifiques du peptide bêta-amyloïde (Aβ) dans l’hippocampe d’un rat. L’étude utilise l’implantation d’un système de canule bilatérale pour une perfusion contrôlée d’anticorps spécifiques du peptide Aβ couplée à la perfusion d’oligomères solubles Aβ (Aβo) dans l’hippocampe du rat afin d’étudier les interactions entre les oligomères et les anticorps.

Cette vidéo présente une méthode de détection et de quantification de transmetteurs peptidiques à l’aide d’un biocapteur d’immunosonde capacitif. L’électrode fonctionnalisée, enrobée d’anticorps, interagit avec les peptides d’intérêt, conduisant à un changement de signal qui permet une mesure et une détection précises des peptides.

Cette vidéo analyse l’afflux de calcium induit par les récepteurs des lymphocytes T dans les lymphocytes T. Les anticorps anti-CD3 activent les voies de signalisation des lymphocytes T, entraînant une augmentation des ions calcium intracellulaires qui se lient au colorant Indo-1. En cytométrie en flux, un changement de spectre de l’état sans calcium à l’état lié au calcium est corrélé à l’afflux de calcium induit par les récepteurs des lymphocytes T.

Cette vidéo présente un test in vivo pour étudier la mitophagie chez Caenorhabditis elegans. Lors de l’exposition des nématodes à un médicament induisant la mitophagie, l’apparition de la mitophagie est évaluée par co-localisation entre DCT-1, un récepteur de la mitophagie sur les mitochondries endommagées, et la protéine membranaire autophagosomale LGG-1.

Cette vidéo présente un système microfluidique pour un dosage immunologique basé sur des nanoparticules magnétiques. Le système de détection utilise un dispositif microfluidique incorporant un piège magnétique dans ses canaux. Des immunocomplexes préformés, composés de nanoparticules magnétiques enrobées d’antigène liées à des anticorps primaires et secondaires conjugués à la peroxydase, sont introduits dans les canaux. Les immunocomplexes sont capturés dans le piège magnétique poreux lors de...

La vidéo présente une approche basée sur l’immunofluorescence pour quantifier le stress de réplication dans les cellules cancéreuses. Les cellules traitées à l’hydroxyurée produisent de l’ADN simple brin, détecté par immunofluorescence. Le nombre de foyers de fluorescence verts indique le niveau de stress de réplication dans les cellules cancéreuses.

La vidéo présente la mise en œuvre de la technologie Snap Chip pour les immunoessais sandwich multiplexés sans réactivité croisée. Le simple fait de casser deux lames de microréseaux, chacune contenant des réactifs différents, garantit le transfert de réactifs sans contamination croisée et permet de détecter plusieurs protéines à l’aide d’un dosage immunologique sandwich.

Cette vidéo présente un test permettant d’effectuer une immunocoloration multiplex à l’aide d’anticorps primaires de la même espèce hôte. Dans cette méthode, une section de tissu surrénalien subit un processus d’immunocoloration en deux étapes. Initialement, la section est colorée avec des anticorps spécifiques des marqueurs du cortex, suivie d’un démantèlement de l’anticorps lié et d’une recoloration avec des anticorps spécifiques des marqueurs de la moelle.

Cette vidéo présente une technique d’imagerie multispectrale de fluorescence in situ pour analyser différentes sous-populations de lymphocytes T infiltrants dans le tissu tumoral. La cryosection tissulaire d’un carcinome rénal est traitée à l’aide d’anticorps afin de marquer les lymphocytes T CD8+ qui expriment des récepteurs inhibiteurs spécifiques et présentent un phénotype résistant à l’immunothérapie. La coupe marquée est visualisée à l’aide d’un microscope multispectral afin d’identifier...

Cette vidéo présente une méthode de surveillance du trafic de la protéine cellulaire 0 infectée, ICP0 dans l’infection par le virus de l’herpès simplex-1. Après la synthèse de novo, ICP0 se déplace vers le noyau, puis vers le cytoplasme au cours de la progression de l’infection. La microscopie d'immunofluorescence révèle et analyse la localisation subcellulaire de la protéine, offrant ainsi des informations sur son trafic à travers les phases d'infection.

Cette vidéo présente une technique in vitro pour identifier les cellules immunitaires résidant dans les poumons murins. Après avoir isolé des cellules immunitaires cibles dans du tissu pulmonaire murin, elles sont marquées en surface à l’aide d’un cocktail d’anticorps marqués au fluorophore contre des marqueurs spécifiques sur les cellules immunitaires innées et adaptatives. De plus, les monocytes, les macrophages et les cellules dendritiques sont marqués à l’aide d’un marqueur intracellulaire.

La vidéo présente une méthode pour évaluer le clivage des protéines médié par la caspase dans les cellules infectées par le virus. Après l’infection virale, les caspases s’activent et dégradent diverses protéines cellulaires de l’hôte et nucléoprotéines virales, tandis que des inhibiteurs spécifiques de la caspase empêchent cette dégradation, comme le confirme le western blot.