2 février 2010
La réponse optocinétique a été largement utilisé pour évaluer les fonctions visuelles du poisson zèbre larvaire. Néanmoins, le protocole standard pour les larves de poissons ne sont pas encore facilement applicables chez les adultes 1-5. Ici, nous introduisons la façon de mesurer l'OKR du poisson zèbre adulte en utilisant un nouveau protocole qui est établi dans notre laboratoire.
Bonjour à tous. Je m'appelle Mean Jing, et je viens de l'USTC. Comme nous le savons, la réponse optocinétique, ou OKR en abrégé, est un test comportemental au cours duquel un animal déplace ses yeux pour suivre un gradient.
Se déplacer autour de lui. Ce comportement a été largement utilisé pour évaluer les fonctions visuelles des larves de poisson zèbre.
Cependant, la méthode utilisant le prodigal standard pour immobiliser les larves de poisson n'est pas facilement applicable aux adultes. Ainsi, dans cette vidéo, nous allons vous présenter un nouveau prodigal qui permet d'enregistrer la ROK chez l'adulte. Et également à titre comparatif, nous démontrerons le test de ROK pour les larves de poisson et le test de ROM pour les poissons adultes.
Et par OMR, j'entends réponse motrice. Je vais maintenant vous montrer l'apparence de notre application personnalisée de ROK. Elle est agréable, n'est-ce pas ?
Dans cette configuration, il y a une base crible entraînée par un moteur. Le tube crible repose sur cette base crible et tourne avec elle. Une plaque de chambre est placée au-dessus de la base crible, mais ne tourne pas, et une lampe circulaire est utilisée pour éclairer le crible.
Et c'est tout. Il suffit de placer la chambre à poisson sur la plaque de chambre et nous sommes prêts à commencer. Bonjour, je suis Sui.
Bonjour, je suis W. Nous travaillons sur le développement neuronal et l'ELL de l'USPC. Aujourd'hui, nous allons vous montrer comment effectuer le test de performance élevé du poisson-zèbre. Bon, commençons.
Tout d'abord, nous allons vous montrer comment nous avons réalisé le test de réflexe optocinétique (OKR) chez le poisson zèbre adulte. Placez maintenant l'éponge dans la chambre à poisson et versez-y un peu d'eau. Pressez légèrement l'éponge pour éliminer les bulles d'air.
Maintenant, nous allons vous montrer comment fixer le poisson avec des épingles, étape par étape. Maintenant, remuons légèrement le poisson pour nous assurer que sa nageoire dorsale pointe vers le haut, et tendons la queue pour que le corps soit bien droit. Utilisez la pince d'artère pour fixer la nageoire caudale et insérez la pince dans la chambre à l'aide de la pâte à modeler.
Après la fixation, versez davantage d'eau dans la chambre et soufflez un peu d'eau vers le poisson pour le réveiller. Nous avons maintenant terminé la préparation et sommes prêts pour la véritable aventure : le test d'OKR.
Notez que les deux objets dans la partie supérieure de l'écran sont simplement le reflet du réseau sur la tête de l'épingle. Voyons maintenant comment nous avons effectué le test de ROK chez les larves. Nous avons placé les poissons mâles et femelles dans l'aquarium d'accouplement et les avons laissés pondre des œufs.
Ensuite, nous collectons les œufs et les transférons dans un récipient en verre. Nous utilisons une solution de méthylcellulose pour fixer les larves de poisson. La solution doit être refroidie rapidement après avoir été chauffée.
Nous le plaçons donc dans de l'eau glacée et secouons doucement jusqu'à ce qu'il devienne transparent. Versez maintenant 20 millilitres de méthylcellulose dans un récipient. Veillez à ce qu'il n'y ait aucune bulle d'air dans la solution.
Placer les larves en rangée dans la solution. Ajouter une minuscule bulle d'air d'un microlitre dans le champ de vision afin de pouvoir voir le reflet du ciblage. Voici la démonstration du comportement de ROK chez les larves de poisson-zèbre de type sauvage.
À la fin, nous allons vous montrer comment réaliser le test OMR chez les poissons-zèbres adultes. Tout d'abord, attrapez un poisson et placez-le dans une chambre pour poisson. Ensuite, positionnez la chambre pour poisson en place.
Ensuite, installer un cylindre blanc au centre de la chambre afin que les poissons ne puissent pas franchir le centre avant le test. Il est préférable de laisser le poisson s'adapter à cette condition d'éclairage pendant une minute. Voilà, la démonstration du test de réponse optomotrice pour les poissons-zèbres adultes est terminée.
Nous venons de vous montrer comment réaliser le test de réflexe optocinétique sur des poissons-zèbres adultes. Dans ce test, nous avons tenté de fixer le poisson-zèbre avec des épingles au lieu de méthylcellulose. Grâce à cette méthode, nous avons réussi à enregistrer une réponse forte qui a duré plus de quatre heures.
Cela donnera aux expérimentateurs largement le temps nécessaire.
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La réponse optocinétique (ROC) est un test comportemental utilisé pour évaluer les fonctions visuelles des larves de poisson-zèbre. Cet article présente un nouveau protocole permettant de mesurer la ROC chez le poisson-zèbre adulte, en répondant aux limites des méthodes existantes.
L'évaluation de la fonction visuelle chez le poisson zèbre adulte permet une détection mécanistique des cibles en neurosciences liées au traitement sensoriel et à la santé rétinienne. Le test de la réponse optocinétique (ROC) fournit un indicateur quantitatif fondé sur le comportement, utile à la validation de cibles dans les processus de découverte. Cette méthode renforce la fiabilité prédictive en établissant un lien entre des manipulations pharmacologiques ou génétiques et des réponses visuelles fonctionnelles dans un système pertinent pour la maladie.
Le test OKR s'inscrit dans le continuum de découverte allant de la vérification de l'hypothèse sur la cible à la validation préclinique, en particulier pour les programmes de neurosciences et de modalités sensorielles.