9 août 2012
Les étapes chirurgicales de l'augmentation de la vessie sont décrits en utilisant 3-D échafaudages dans des modèles murins et de rat. Pour tester l'efficacité de configurations de biomatériaux pour l 'augmentation de la vessie, les techniques de cystométrie à la fois éveillé et anesthésié sont présentés.
L'objectif de cette procédure est d'évaluer l'utilisation de biomatériaux pour l'agrandissement vésical en obtenant des données fonctionnelles par cytométrie. Cela est réalisé en premier lieu en anérosant le support à un défaut créé dans la vessie. La deuxième étape de la procédure consiste à tunneliser le tube de cystostomie jusqu'à l'abdomen.
La troisième étape consiste à placer le tube de cystostomie dans la vessie augmentée et à le fixer sur le dos de l'animal. L'étape finale est la réalisation d'une cystométrie afin d'évaluer la vessie augmentée d'un point de vue fonctionnel. En définitive, les résultats peuvent montrer des modifications de la capacité vésicale, de la compliance, des pressions mictionnelles, des durées du cycle nutritionnel et des volumes résiduels post-miction par cystométrie réalisée chez l'animal conscient.
Les implications de cette technique s'étendent à la thérapie des anomalies congénitales et acquises de la vessie ou de l'urètre qui entraînent une capacité, une compliance et une fonction globale de la vessie altérées. Étant donné que les nouveaux biomatériaux utilisés pour l'agrandissement de la vessie doivent être évalués fonctionnellement, après avoir préparé un animal pour une chirurgie abdominale, utilisez un scalpel pour pratiquer une incision médiane inférieure à travers la peau.
À l’aide d’une pince dentée, soulever le muscle droit et disséquer la surface postérieure du muscle avec des ciseaux fins de type Mets et des ciseaux Balm. Sectionner le reste du muscle dans la ligne médiane sur toute la longueur de l’incision cutanée afin de livrer la vessie à travers la plaie opératoire. Une fois par jour, placer un point de suture à travers la paroi postérieure de la vessie, puis à travers la paroi antérieure de la vessie. Ajouter des points de suture latéraux sur la vessie, mais ne pas nouer ces sutures.
Lorsque les points de suture sont maintenus tendus, la vessie présentera une configuration carrée mesurant environ un centimètre de côté, pénétrant longitudinalement la vessie par la paroi antérieure, juste en dessous du dôme vésical selon la ligne médiane. Veiller à ne pas trop tendre ces fils de suture, car ils pourraient facilement traverser le tissu vésical. Pour cette étape, une loupe binoculaire est préférable pour l'anastomose du support. À l’aide de ciseaux fins, découper le support en soie à la taille approximative du défaut vésical.
Commencez par un coin du support et sutures-le à la vessie de manière continue. Pour créer un sceau étanche tout autour du défaut, il est très important que le chirurgien réalise une anastomose étanche et sans tension entre le support et la vessie. Cela garantira la rétention de toute l'urine à l'intérieur de la vessie, car toute fuite intrapéritonéale entraînerait probablement la mortalité de l'animal.
À titre d'essai, utilisez une aiguille hypodermique de calibre 30 pour remplir la vessie d'eau. Si une fuite est détectée, fermez-la à l'aide d'un point de suture supplémentaire non continu. Ensuite, réduisez la vessie reconstruite dans l'abdomen avant la fermeture de la paroi abdominale.
Injecter le muscle droit et les tissus sous-cutanés avec de la bupivacaïne pour l'anesthésie locale et fermer l'incision. Ensuite, utiliser un point continu en surjet pour réapprocher le muscle droit et fermer la peau avec un point continu en surjet. Après avoir nettoyé et séché l'incision, transférer l'animal dans une cage propre et chauffée pour son réveil de l'anesthésie.
Avant de commencer, créez une ancre à l'extrémité d'un tube PE 50 de 10 centimètres afin qu'il ne glisse pas hors de la vessie. Pour ce faire, évaser délicatement l'extrémité du tube en l'exposant légèrement à une flamme. Ensuite, vérifiez que le tube n'est pas obstrué.
Injecter l'extrémité non évasée avec du sérum physiologique et s'assurer qu'il circule. Après avoir préparé un animal pour une intervention chirurgicale, avant d'exposer la vessie, pratiquer une incision d'un centimètre sur le dos entre les omoplates. À l'aide des ciseaux à pansements Metson, créer un plan entre la peau et le muscle sous-jacent.
Ensuite, insérez les pointes des ciseaux dans le plan et écartez-les pour créer un tunnel sous-cutané jusqu'à l'abdomen ventral. Puis, retournez l'animal. Exposez la vessie et replacez-la dans l'abdomen.
En revenant à l’incision dorsale, placez une petite pince dans le tunnel sous-cutané. Utilisez vos doigts pour protéger les contenus intra-abdominaux, puis utilisez les extrémités de la pince pour percer la paroi abdominale. Saisissez ensuite l’extrémité lisse du tube évasé avec la pince et tirez-le à travers l’incision dorsale.
Ne tirez pas l'extrémité évasée de l'ancrage au-delà de la paroi abdominale avec le tube à travers l'incision. Placez un point de suture en surjet au dôme de la vessie. Laissez une petite pince sur l'extrémité libre du fil de suture afin qu'il ne soit pas accidentellement tiré à travers le point de suture.
En outre, ne pas serrer fortement le point de suture. Utiliser maintenant une aiguille EU de calibre 18 pour percer la paroi de la vessie au centre du point de suture en forme de bourse, juste assez pour être intraluminal. Puis introduire la pince fine dans l'ouverture et l'écarter doucement pour élargir le trou.
Insérez l'extrémité évasée du cathéter dans le défaut de la vessie jusqu'à ce qu'elle soit intraluminale. Serrez davantage le point de suture en cornet autour du cathéter et faites un nœud. Ensuite, enroulez le bout libre du fil autour du cathéter une fois et faites un nœud.
Maintenant, tester la vessie en injectant lentement du sérum physiologique à l’aide du tube. S’il y a un écoulement par l’urètre, aspirer le sérum physiologique afin de décomprimer la vessie. Répéter. Si une fuite est détectée, la réparer par suture, car une fuite urinaire peut entraîner la mortalité.
Fermer l'incision abdominale comme précédemment démontré. Ensuite, procéder à la fermeture de l'incision dorsale. La procédure de fermeture de l'incision dorsale diffère entre les rats et les souris.
Pour les rats, utiliser des ciseaux pour couper le tube du cathéter au niveau de la peau. Ensuite, insérer une aiguille 22G à extrémité émoussée dans le tube. Utiliser des points de suture continus pour fermer la peau par-dessus le tube, en laissant le boîtier de l'aiguille en protrusion.
Placez maintenant un bouchon de ligne intraveineuse sur l'aiguille émoussée et fixez l'extrémité du cathéter à la peau. Ensuite, nettoyez l'incision et laissez l'animal se rétablir dans un environnement chaud. Chez les souris, le cathéter doit être fixé de la manière suivante : laissez le cathéter long et obstruez son extrémité en la faisant fondre à l'aide d'une flamme.
Enroulez l'extrémité du tube et laissez-la dans la poche sous-cutanée sur le dos de l'animal. Fermez la peau au-dessus du tube en effectuant une suture continue en surjet. Avant l'analyse cytrique, prévoyez un temps de récupération postopératoire d'au moins cinq à sept jours, tant pour les rats que pour les souris.
Après la récupération le jour de la cytométrie. Chez la souris, il est nécessaire d'abord d'ouvrir l'incision dorsale sous anesthésie et d'extraire le tube enroulé du logement sous-cutané. Après avoir retiré le tube, refermer cette incision et attendre que la souris se réveille complètement de l'anesthésie avant de commencer la cytométrie en plaçant les animaux dans des cages métaboliques suspendues au-dessus de balances.
Accédez maintenant aux cathéters sus-pubien à l’aide d’une aiguille de 27 gauge reliée, via un tube en T, au transducteur de pression et à la pompe d’infusion. Commencez l’infusion de sérum physiologique. Attendez que l’enregistrement du schéma de miction se stabilise.
Au cours des 10 à 20 minutes suivantes, la pression vésicale augmente d'abord, puis est suivie d'une miction. Ensuite, enregistrez les cycles de miction pendant 15 à 120 minutes, ou au moins trois ou quatre cycles mictionnels au cours de la procédure. Surveillez les pliures du cathéter et autres complications.
Les enregistrements urodynamiques peuvent ensuite être analysés pour déterminer des paramètres tels que les volumes évacués, la compliance, les pressions maximales de vidange lors de la contraction, l'intervalle, la durée du cycle mictionnel et les volumes résiduels post-mictionnels. Après avoir visionné cette vidéo, vous devriez bien comprendre comment augmenter la vessie à l’aide de tout biomatériau. Vous saurez également comment évaluer la fonction de la vessie de tout rongeur à l’aide de la cystométrie chez un animal conscient non contraint.
Cet article décrit les étapes chirurgicales d'augmentation vésicale à l'aide de supports tridimensionnels chez des modèles murins et chez le rat. L'efficacité de configurations de biomatériaux pour l'agrandissement vésical est évaluée par des techniques de cystométrie réalisées chez des animaux éveillés et anesthésiés.
L'évaluation fonctionnelle des biomatériaux destinés à l'agrandissement vésical nécessite des modèles animaux standardisés et une analyse cystométrique afin d'évaluer la capacité, la compliance et la dynamique de la miction. Cette approche permet une détection précoque des risques liés aux conceptions de supports en reliant les propriétés structurelles aux résultats fonctionnels, avant des études sur grands animaux ou des essais cliniques. La méthodologie soutient la validation des cibles en médecine régénérative urologique en fournissant des mesures quantitatives et transposables pour des décisions « aller/ne pas aller » dans les filières de développement de biomatériaux.
La méthode s'intègre dans le continuum de découverte, depuis le criblage précoce des biomatériaux jusqu'à l'identification de candidats prometteurs et la validation préclinique, en fournissant des données fonctionnelles qui éclairent les décisions de progression.