Basée sur sonde endomicroscopie confocale laser de l'appareil urinaire: La Technique

L'objectif de l'expérience suivante est de démontrer la microscopie in vivo à l'aide d'une microscopie endoscopique confocale laser à sonde chez un patient subissant une résection transurétrale d'une tumeur de la vessie. Cette procédure s'effectue tout d'abord par une cystoscopie en lumière blanche afin de visualiser l'ensemble de l'urothélium de la vessie et de repérer toute lésion muqueuse anormale ou suspecte. Dans un deuxième temps, un agent de contraste est instillé de manière intravésicale, fournissant le contraste fluorescent nécessaire à la visualisation au microscope endoscopique confocal laser. Enfin, lors d'une troisième étape, la microscopie in vivo de chaque zone d'intérêt est réalisée, et les caractéristiques cellulaires, microarchitecturales et vasculaires du tissu sont notées.

En fin de compte, les résultats de la microscopie in vivo peuvent être comparés à l'analyse histopathologique des biopsies des régions d'intérêt. Le Dr Joseph Leal, chirurgien urologue ayant mis au point l'application de la microscopie endolaser à balayage confocal par sonde pour les voies urinaires en salle d'opération, démontrera la procédure. Une fois que le sujet est en position lithotomique, commencez par insérer un cystoscope rigide par l'urètre en utilisant une cystoscopie à lumière blanche standard afin d'examiner les régions de la vessie sous lumière blanche.

Marquer les régions d'intérêt pour la microscopie endoconfocale au laser à l’aide d’une boucle de résection. D'autres modalités d'imagerie optique macroscopique, telles que la cystoscopie fluorescente et l'imagerie en bande étroite, peuvent être utilisées à cette étape pour identifier des zones supplémentaires suspectes. Insérer ensuite un cathéter urinaire stérile dans la vessie à l’aide d’une seringue de 60 millilitres, puis instiller l’agent de contraste dilué par gravité.

Ensuite, pincer le cathéter urinaire pour maintenir l'agent de contraste en séjour. Après cinq minutes, drainer l'agent de la vessie. Puis verser de 240 à 300 millilitres de sérum physiologique dans la seringue de 60 millilitres afin d'éliminer tout résidu de produit de contraste de la vessie avant l'injection intraveineuse de fluorescéine.

Prélevez un millilitre de fluorescéine dans une seringue. Fixez la seringue au point d'accès intraveineux et injectez de 0,5 à un millilitre de fluorescéine par voie intraveineuse en bolus, en rinçant la ligne avec du sérum physiologique. Une fois l'agent de contraste injecté, retirez une sonde stérile d'endomicroscopie laser confocale de son emballage et connectez-la à l'unité de balayage laser.

Ensuite, faites chauffer et étalonnez la sonde d'imagerie conformément aux instructions du fabricant, puis réinsérez le cystoscope rigide muni d'une lentille à zéro degré dans la vessie. Avancez maintenant la sonde d'imagerie de microscopie endoconfocale le long du canal de travail du cystoscope, en positionnant la pointe légèrement au-delà de l'extrémité du cystoscope sous lumière blanche. Localisez les régions d'intérêt précédemment marquées pendant que la sonde d'imagerie balaye la région d'intérêt.

Enregistrez les images pour une analyse ultérieure. Ensuite, utilisez la main de l'opérateur pour manipuler l'imagerie par microscopie endoscopique confocale. Sondez en contact direct et rapide avec les régions d'intérêt afin d'obtenir des coupes optiques de ces régions.

Augmentez et réduisez délicatement la pression appliquée à la sonde d'imagerie tout en maintenant un contact direct afin d'atteindre les tumeurs situées à l'intérieur de la vessie. Utilisez un coude AL standard et un pont pour faciliter la déviation de la sonde d'imagerie et assurer un contact direct avec la région d'intérêt. Si souhaité, prélevez des biopsies à froid à partir de toute région d'intérêt correspondante qui a été scannée par la microscopie endoscopique à laser confocal.

Une fois l'imagerie terminée, retirez la sonde d'imagerie par microscopie endoconfocale du canal de travail. Lors de la réalisation de cette procédure, il est important de se rappeler de rincer l'excès de fluorescéine à l'intérieur de la vessie avant l'imagerie et de maintenir un contact à 90 degrés entre la sonde et la surface muqueuse. Cette première image provient d'une cystoscopie représentative en lumière blanche montrant une tumeur papillaire marquée par voie intravasculaire.

Remarquez la sonde d'imagerie de 2,6 millimètres visible au bas de l'image. Ces deux images sont des exemples représentatifs d'images obtenues par microscopie endoscopique confocale à laser à partir de deux tumeurs vésicales différentes, en utilisant respectivement la fluorescéine intravésicale et intraveineuse. Étant donné que les sondes d'imagerie peuvent être interchangeables entre les différents types de cystoscopes à laser confocal, la microscopie endoscopique peut être combinée à d'autres modalités d'imagerie émergentes, ce qui peut améliorer la précision diagnostique de chaque technologie prise isolément, notamment la cystoscopie fluorescente comme illustré ici, et l'imagerie en bande étroite comme montrée ici.

Ainsi, cette méthode pourrait fournir des informations sur le cancer de la vessie. Elle pourrait être appliquée à d'autres systèmes, comme les carcinomes urothéliaux des voies urinaires supérieures, qui peuvent être difficiles à diagnostiquer au cours d'une biopsie.