מאמר סקירה

Caenorhabditis elegans: מודל In vivo ורסטילי לפענוח מסלולי איתות אונקוגניים שמורים

DOI:

10.3791/72682

⸱

14 באוגוסט 2026

 , 
1Institute of Pediatrics, Children's Hospital of Fudan University, 2Department of Rheumatology, The Second Affiliated Hospital of Jiaxing University

במאמר זה

סיכום

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

סקירה זו בוחנת את Caenorhabditis elegans כ-מודל in vivo משלים למחקר מסלולי סרטן, תוך התמקדות באותות RTK-RAS-ERK, Notch ו-Wnt שמורים, מוטציות מייצגות, מדדים כמותיים, כלים גנטיים, סריקת תרופות נגד סרטן ויישומים המבוססים על כימוסנסציה.

תקציר

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Caenorhabditis elegans (C. elegans) הוא מודל מטזואי שקוף, זול וניתן לטיפול גנטי, המגשר בין בדיקות תרביות תאים קונבנציונליות למערכות יונקים עבור מחקר מכניסטי של סרטן. סקירה זו, המתמקדת במסלולי איתות, סוקרת מחקרים מייצגים של מסלולי ה-RAS/MAPK, Notch ו-Wnt השמרים, ומאורגנת סביב שימור המסלולים, זני מוטנטים, פנוטיפים כמותיים, כלים גנטיים ויישומים במחקרי מנגנונים, סריקת תרכובות ובדיקות מבוססות כימושנסציה (chemosensation). ראשית, אנו מתארים את השימור של רכיבי המסלולים ופנוטיפים הרלוונטיים לגידולים, כולל פרוליפרציה יתרה של תאי הנבט והפנוטיפ של ריבוי וולבות (Muv). לאחר מכן, אנו ממרטבים מוטנטים מייצגים, כגון זני glp-1 ו-let-60 עם תפקוד מוגבר (gain-of-function) ומודלים של gld-1 ו-lip-1 עם אובדן תפקוד (loss-of-function), המאפשרים ניתוח של תחזוקת תאי גזע, פרוליפרציה אקטופית ושיבוש באיתות. בנוסף, אנו דנים בכלים הזמינים לבניית מודלים, כולל הפרעה של RNA (RNA interference), טרנסגנזה, MosTIC, TALENs ו-CRISPR/Cas9, תוך הדגשת נקודות החוזק והמגבלות שלהם עבור מחקרי תפקוד גנים הקשורים לסרטן. לבסוף, אנו מסכמים יישומים שפורסמו של C. elegans בסריקת תרופות נוגדות סרטן, גילוי מסלולים וכימושנסציה הקשורה לגידולים. באמצעות שילוב של שימור גנטי עם פנוטיפינג in vivo הניתן להרחבה, C. elegans מספק פלטפורמה משלימה ליצירת היפותזות, תיקוף מסלולים וגילוי טיפולי בשלב מוקדם, בעוד שיש להכיר במגבלותיו בנוגע לחסינות אדפטיבית ולמורכבות איברים בעת תרגום הממצאים לביולוגיה של סרטן בבני אדם.

מבוא

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

סרטן נותר גורם מוביל לתחלואה ולתמותה גלובלית. GLOBOCAN 2022 העריך כי היו קרוב ל-20 מיליון מקרים חדשים של סרטן ו-9.7 מיליון מקרי מוות מסרטן ברחבי העולם, כולל סרטני עור שאינם מלנומה1. מכיוון ששיעור השקיעות של הסרטן צפוי לעלות עם גידול האוכלוסייה וההזדקנות2, מערכות ניסיוניות המסוגלות לפתור מנגנונים שמורים ולתמוך בתעדוף יעיל של מטרות נותרות חיוניות.

מכניזמים של סרטן נחקרים בדרך כלל בתרביתי תאים ונבדקים לאחר מכן במודלים של חולייתנים. עם זאת, תרביות תאים אינן משחזרות את הפיזיולוגיה של האורגניזם השלם, בעוד שמחקרים בחולייתנים הם יקרים ובעלי תפוקה נמוכה יחסית. מודל משלים המשלב יכולת מניפולציה גנטית, הקשר רב-תאי וזמן תגובה ניסויי מהיר יכול לפיכך לגשר על שאלות נבחרות בין בדיקות in vitro לבין תיקוף ביונקים.

Caenorhabditis elegans (C. elegans) ממלא את הנישה המשלימה הזו. בטמפרטורה של 20 °C, הוא מתפתח מעובר למבוגר פורה תוך כ-3 ימים, בעל תוחלת חיים טיפוסית במעבדה של 2–3 שבועות, ומייצר כ-300 צאצאים מהפריה עצמית3. OrthoList 2 זיהה אורתולוגים של C. elegans עבור 10,678 מתוך 20,310 גנים מקודדי חלבון אנושיים (52.6%)4, בעוד שניתוח פרוטאומי השוואתי מוקדם יותר זיהה הומולוגים אנושיים עבור כ-83% מהפרוטאום של C. elegans5. בנוסף, לכ-72% מהגנים המניעים לסרטן (cancer driver genes) אנושיים שנבדקו יש לפחות אורתולוג אחד ב-C. elegans6. תהליכים שמורים כוללים אפופטוזיס, בקרת מחזור התא, מטבוליזם, תגובות למעשקה (stress responses), ואיתות של RTK–RAS–ERK, Notch, Wnt, TGF-β, ואינסולין/IGF3,4,6. עם זאת, אורתולוגיה אינה מעידה על שקילות תפקודית מלאה, והתולעת חסרה איברים של חולייתנים, חסינות סגולית, אנגיוגנזה ומערכת הובלה6.

סקירה זו מתמקדת במסלולי השמירה RTK (receptor tyrosine kinase)–RAS–ERK, Notch ו-Wnt, מכיוון שנתיבים אלו שמורים אבולוציונית, מופרעים לעיתים קרובות בסרטן בבני אדם, ומקושרים לפנוטיפים של C. elegans שניתן לדירוג קל. אנו מבחינים בין גידולים אמיתיים של תאי נבט לבין היפרפלזיה התפתחותית או פנוטיפים של גורל תאים אקטופי, מסכמים זנים מייצגים ומדדים כמותיים, סוקרים כלים גנטיים לבניית מודלים, ודנים במחקרים שבהם ניסויים בתולעים הבהירו מנגנונים נגד סרטן או אפשרו תיעדוף של תרכובות.

סקירה ופרספקטיבה

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

שימור של מסלולי העברה אונקוגניים ב- C. elegans
סרטן מונע על ידי שילובים של שינויים גנטיים ואפיגנטיים המשבשים את השגשוג, הדיפרנציאציה, ההישרדות, תחזוקת הגנום, המטבוליזם והאינטראקציות עם המיקרו-סביבה. C. elegans אינו יכול לשחזר כל מאפיין של ממאירות אנושית, אך הוא יכול לבודד תפקודי מסלולים שמורים בהקשר של אורגניזם שלם. לכן, המודלים המידעיים ביותר הם אלו המקשרים בין נגע מולקולרי מוגדר לבין פנוטיפ מדיד ואנלוגיה מפורשת לסרטן בבני אדם.

מסלול השירות RTK-RAS-ERK
הפעלה של קינאז טירוזין רצפטורי (RTK) מעודדת דימריזציה או ארגון מחדש של הרצפטור ופוספורילציה עצמית הדדית (trans-autophosphorylation) של שארי טירוזין ציטופלזמיות7. אתרי קישור של פוספו-טירוזין מגייסים חלבוני מתאם וגורמי חילוף של גואנין נוקלאוטיד, אשר ממירים את RAS ממצב קשור GDP למצב קשור GTP7,8. RAS-GTP מגייס קינאזות RAF לממברנת הפלזמה, שם הפעלת RAF יוזמת את רצף הקינאזות RAF–MEK–ERK8,9. ERK פעיל מphosphoryl את סובסטראטים ציטופלזמיים וגרעיניים המווסתים פרוליפרציה, דיפרנציאציה, הישרדות וגורל התא10. מוטציות אונקוגניות של RAS או פעילות חריגה של RTK יכולים לפיכך לתחזק את תפוקת המסלול באופן בלתי תלוי בבקרה חוץ-תאית רגילה8,11.

C. elegans מקודד למספר RTK, כולל LET-23/EGFR ו-EGL-15/FGFR12. במהלך השראת הפיתול (vulval induction), LIN-3/EGF מפעיל את LET-23 ואת שרשרת ה-SEM-5/GRB2–SOS-1–LET-60/RAS–LIN-45/RAF–MEK-2–MPK-1/ERK השמורה12,13,14. ויסות של LIN-1 ו-LIN-31 התלוי ב-ERK קובע את גורל תאי העשב (precursor cells) של הפיתול12,15. פעילות מופחתת של המסלול גורמת לפנוטיפ ללא פיתול (vulvaless phenotype), בעוד שהפעלה מופרזת — כגון אללים של let-60 עם תפקוד מוגבר (gain-of-function) — גורמת לפנוטיפ רב-פיתולי (Muv)15,16. אותו מסלול מווסת גם את התפתחות צינור ההפרשה, את החיבורים בין הרחם לפיתול, ומספר תהליכים בקו הנבט ובזכרים12,17,18,19. איתות של EGL-15/FGFR שולט על נדידת מיובלסטים מיניים, תחזוקת שרירים, הדרכת אקסונים והומיאוסטזיס של נוזלים20,21,22,23. מכיוון שתוצר המסלול תלוי ברקמה ובשלב ההתפתחותי, מודלים אינפורמטיביים הקשורים לסרטן מוגדרים על ידי נגע מולקולרי ספציפי, הקשר רקמתי רלוונטי וקריאה כמותית (quantitative readout)12.

שיוך אות Notch
Notch הוא נתיב העברת אותיות התלוי במגע, שבו ליגנד Delta/Serrate/LAG-2 (DSL) קשור לממברנה בתא אחד מפעיל רצפטור Notch בתא סמוך24,25. במהלך הבשלת הרצפטור, מתרחש ביקוע S1 בנתיב ההפרשה24. קישור הליגנד חושף לאחר מכן את אתר S2 לפרוטאזים ממשפחת ADAM, ולאחריו ביקוע S3 על ידי γ-secretase24,25. הדומיין התוך-תאי של Notch המשתחרר חודר לגרעין ויוצר קומפלקס תעתוק עם חלבוני קישור ל-DNA ממשפחת CSL וקו-אקטיבטורים ממשפחת Mastermind24. ב-C. elegans, הגורמים הגרעיניים המקבילים הם LAG-1 ו-SEL-825.

C. elegans מחזיק בשני קולטני Notch, ‏LIN-12 ו-GLP-125. בקו הנבט של הבוגר, תאי קצה דיסטליים (DTCs) מספקים ליגנדים מסוג DSL, בעיקר LAG-2 ו-APX-1, ל-GLP-1 על תאי גזע/פרוגניטורים סמוכים של קו הנבט (GSCs)26,27. פעילות גבוהה של GLP-1 שומרת על התרבות מיטוטית; ככל שהתאים רחוקים מה-DTC, סיגנל Notch מופחת מאפשר למסלולי ה-GLD לקדם כניסה למיוזה28,29. אללים של glp-1 עם תפקוד מוגבר (gain-of-function) יכולים לשמר מיטוזה אקטופית ולגרום לגידולים בקו הנבט25,30. LIN-12 שולט במספר החלטות לגבי גורל תאים סומטיים, כולל ההחלטה בין תא-עוגן (anchor-cell) לבין רחם ונטרלי; פעילות קונסטיטוטיבית של LIN-12 בתאי פרוגניטור של הוולבה יוצרת פנוטיפ של ריבוי וולבות (Muv), ו-GLP-1 מופעל יכול לקבוע באופן אקטופי גורלים וולבליים25,31,32.

גידולי תאי נבט פרוקסימליים יכולים להיווצר גם באמצעות מנגנון "נישה חבויה" (latent niche) שאינו אוטונומי לתא33. במוטנטים של pro-1 או במוטנטים עם תפקוד מוגבר (gain-of-function) של glp-1(ar202), עיכוב בכניסה למיוזה מאפשר לתאי נבט פרוקסימליים שאינם מובחנים להיתקל בליגנדים של DSL, כולל APX-1 ו-ARG-1, מתאי מעטפת הגונדה המבשילים33. הפעלה מתמשכת של GLP-1/Notch משמרת לאחר מכן את המיטוזה ואת תחזוקת הגידול33. לעומת זאת, אובדן של gld-1 גורם לגידולי תאי נבט עקב כשל בדיפרנציאציה מיוטית, ואין לסווג זאת כהפעלה ישירה של מסלול ה-Notch34.

שיוך Wnt
שיוך Wnt מווסת את גורל התא, קוטביות, נדידה ושכפול באמצעות מספר מסלולים התלויים בהקשר35,36. במסלול ה-β-catenin הקנוני, קישור של Wnt ל-Frizzled ול-LRP5/6 מעכב את קומפלקס ההשמדה AXIN–APC–GSK3–CK1, ובכך מאפשר ל-β-catenin להצטבר ולשתף פעולה עם גורמי TCF/LEF בגרעין35,36. הפרה של מסלול זה מרכזית במספר סוגי סרטן בבני אדם, ובמיוחד בסרטן השקיעון (colorectal cancer)36.

C. elegans משתמש הן במסלול קנוני של BAR-1/β-catenin והן במסלול אסימטריה מ diverge של Wnt/β-catenin37,38. סיגנלינג תלוי-BAR-1 תורם להחלטות גורל תאי פוסט-עובריים, כולל התפתחות הוולבה37,38. במסלול האסימטריה, WRM-1/β-catenin ו-LIT-1/NLK מפחיתים את רמות ה-POP-1/TCF הגרעיני בתא בת אחד, בעוד ש-SYS-1/β-catenin פועל כקו-אקטיבטור שעתוקי; רמות לא שוות של POP-1 ו-SYS-1 יוצרות גורלות תאי-בת מובחנים37,38,39. תכונות אלו, הספציפיות לתולעים, שונות ממסלול ה-Wnt הקנוני בינקים ויש לפרשן כארכיטקטורות סיגנלינג נפרדות37,38.

סיגנלינג Wnt לא-קנוני שולט על קוטביות תאים ועל נדידה באמצעות נתיבים תלוי-Frizzled ונתיבים דמויי רצפטור טירוזין קינאז35,40. ב- C. elegans, ליגנדים ורצפטורים של Wnt מנחים נדידות נוירונליות ומסודרמיות ומכוונים חלוקות אסימטריות37,41. מדדים אלו רלוונטיים לביולוגיה של הסרטן מכיוון ששינויים בקוטביות ובניידות הם תנאי מקדמי לפלישה, אף על פי שהתולעת אינה מדמה את הפצה מטאסטטית כשלעצמה36,37.

פנוטיפים מייצגים של מסלול Wnt כוללים פגמים בהתפתחות הוולבה בבעלי אובדן תפקוד של bar-142, פגמים בקוטביות עוברית במוטנטים של mom-2 או mom-537,43, ופגמים בנדידת תאים או בהנחיית אקסונים במוטנטים של mig-1 או prkl-137,41. זנים אלה הם מודלים התפתחותיים ספציפיים למסלול ואינם מקבילים ישירים לגידולים ממאירים36,37.

בחירת פנוטיפים ומדדים רלוונטיים לסרטן
יש להשתמש במונח "גידול" (tumor) בזהירות במודלים של C. elegans הקשורים לסרטן6. גידולי קו הנבט ב-C. elegans מכילים תאי נבט בעלי פגם בדיפרנציאציה שמתחלקים באופן אקטופי, ולכן הם מהווים את האנלוג הקרוב ביותר בתולעים לצמיחה נאו'פלסטית מוגברת30,34,44. לעומת זאת, הפנוטיפ "מולטיוולבה" (multivulva, Muv) משקף השראה אקטופית של גורל תאי הוולבה וצמיחת רקמה; זהו מדד רגיש לפעילות של מסלול RAS/MAPK או Notch, אך אין מדובר בגידול ממאיר15,16,25. בקו הנבט הדיסטלי, סיגנלינג Notch המופק מתאי הקצה הדיסטליים (DTC) שומר על מאגר תאי הפרוגניטור המיטוטיים28,44. אללים של glp-1 עם תפקוד מוגבר (gain-of-function) או פגמים בגנים של דיפרנציאציה מייוטית כגון gld-1 יכולים להגדיל את מספר תאי הנבט המיטוטיים30,34,44. בתאי פרוגניטור של הוולבה, תפקוד מוגבר של let-60/RAS או פעילות מופחתת של רגולטורים שליליים כגון LIP-1 יכולים לייצר או להעצים פנוטיפי Muv15,16,45. קטגוריות פנוטיפיות אלו מסוכמות באופן סכמטי ב-איור 1. איור 1A מציג את ההקשר האנטומי הנורמלי ואת המדדים הבסיסיים המשמשים בבדיקות של C. elegans הקשורות לסרטן. איור 1D מקשר בין סיגנלינג RAS/MAPK התלוי ב-LIN-3/LET-23 לבין החלטות לגבי גורל תאי פרוגניטור של הוולבה, בעוד ש-איור 1E ממחיש את סיגנלינג GLP-1/Notch בנישת תאי הגזע של קו הנבט הדיסטלי ומנגנוני גידול בנישה חבויה (latent-niche). איור 1F מפריד עוד יותר בין זרוע ה-Wnt הקנונית התלויה ב-BAR-1 לבין מסלול האסימטריה של Wnt/β-catenin, ומדגיש כי יש לפרש מדדים הקשורים ל-Wnt ב- C. elegans כפנוטיפים התפתחותיים או רגישים למסלול, ולא כמודלים ישירים של גידול ממאיר. נקודות קצה כמותיות מומלצות כוללות את אחוז בעלי פנוטיפ Muv, מספר הבליטות האקטופיות בוולבה, אורך האזור המיטוטי, תאי נבט חיוביים ל-phospho-histone H3, שטח הגונדה, פריון, לוקליזציה של רפורטר ומערכות יחסים של תגובה למינון15,28,30,44,45. טבלה 1 מסכמת זנים מייצגים, את הפגמים המולקולריים שלהם, פנוטיפים, בדיקות כמותיות ויישומים הקשורים לסרטן.

כלים גנטיים וניסיוניים
ניתן להפיק מודלים של C. elegans באמצעות מוטגנזה קלאסית, טרנסגנזה, הפרעה של RNA (RNAi), או עריכה ממוקדת של הגנום46,47,48. מיקרו-הזרקה לגונדות יוצרת ביעילות מערכים חוץ-כרומוזומליים46, בעוד שהקרנה, הפגזה של מיקרו-חלקיקים ומערכות להחדרה של עותק בודד יכולות להפיק שורות טרנסגניות משולבות או בעלות מספר עותקים נמוך ולהפחית ארטיפקטים של מספר עותקים ומוזאיקה47,48. רקומבינזים ספציפיים לאתר, החדרה של עותק בודד בתיווך Mos1, נוקלאזות אצבע-אבץ, TALENs, ובמיוחד CRISPR/Cas9, מאפשרים מחיקות ממוקדות, מוטציות נקודתיות, תיוג אנדוגני, אללים מותנים ווריאנטים אנושיים48,49. יש לבחור את השיטה בהתאם לשאלה אם המחקר דורש knockdown זמני, אובדן יציב, Gain-of-function, ספציפיות לרקמה, ביטוי אנדוגני, או החלפה בווריאנט של סרטן אנושי48,49.

ניתן להחדיר RNAi באמצעות הזרקה לגונדות, השריה או האכלת חיידקים המבטאים RNA דו-גדילי50. התהליך מהיר וניתן להרחבה, אך יעילות ה-knockdown משתנה בין רקמות וגנים, ו-RNAi מייצר פנוקופי (phenocopy) ולא אלל תורשתי מוגדר50. עבור מחקרים של תרכובות, תיקוף המודל צריך לכלול הצלה גנטית (genetic rescue) או אפיסטזיס, אללים עצמאיים ומדדים אורתוגונליים כדי להבדיל בין השפעות ספציפיות למסלול לבין רעילות, עיכוב התפתחותי או צריכה מופחתת של מזון6,44.

זרימת העבודה המעשית ליישום מודלים אלו מסוכמת באיור 2. במסגרת זו, שאלה הקשורה לסרטן ממופה תחילה לנתיב העברה שמרני ולנגע מולקולרי מוגדר, ולאחר מכן נבחרים זן C. elegans מתאים או מודל מהונדס, פנוטיפ כמותי ובקרות תיקוף. תכנון מדורג זה מסייע להבחין בין מודולציה ספציפית לנתיב לבין רעילות כללית או עיכוב התפתחותי, ומספק בסיס רציונלי ליישומים עוקבים במחקרי מנגנונים, תיעדוף תרכובות או בדיקות המבוססות על כימיות-חישה (chemosensation).

יישומים קודמים
מחקרים שפורסמו מדגימים כיצד מודלים של C. elegans המוגדרים לפי מסלולים יכולים לסייע בתעדוף תרכובות בשלב מוקדם. בפלטפורמת EGFR ספציפית למוטציה, Bae et al. ביטאו רצפטורים כימריים של LET-23 המכילים את דומיין הtyrosine-kinase של EGFR אנושי בתאי vulva, כולל וריאנטים של wild-type, L858R, ו-T790M/L858R. הכימרות המפעילות L858R ו-T790M/L858R הובילו לפנוטיפ multivulva (Muv), מה שאפשר לאחוז של בעלי חיים עם Muv לשמש כנקודת קצה כמותית לסריקה. Gefitinib ו-erlotinib דיכאו את פנוטיפ ה-Muv הקשור ל-L858R אך לא את הפנוטיפ הקשור ל-T790M/L858R. בסריקת פיילוט של 8,960 מולקולות קטנות, זוהו AG1478 ו-U0126 כמעכבים של סיגנלינג תלוי-EGFR או תלוי-MEK, בהתאמה51. Medina et al. העריכו עוד את המועמדים לשימוש חוזר (repurposing) itraconazole, disulfiram, etodolac, ו-ouabain בזני מוטנטים המוגדרים לפי מסלולים המייצגים הפרעות ב-Wnt, Notch, ו-RAS–ERK. הצלה (Rescue) של עקרות, חוסר פוריות או פנוטיפים של Muv שימשה כנקודת קצה פנוטיפית לתעדוף תרכובות52. לאחרונה, Makhoul et al. בדקו את EAPB02303 בבעלי חיים מסוג MT2124 let-60(n1046gf) ו-MT4698 let-60(n1700gf). הם כימתו הן את חלקם של בעלי החיים המציגים את פנוטיפ ה-Muv והן את מספר ה-vulvae האקטופיים לבעל חיים, והבחינו בדיכוי פנוטיפי העולה בקנה אחד עם פעילות מופחתת של מסלול LET-60/RAS–MAPK. ניסויי תוחלת החיים ומיקום DAF-16 המשלימים שלהם תמכו גם הם בהשפעה על סיגנלינג insulin/IGF-1–PI3K–AKT53. עם זאת, יש לפרש הצלה פנוטיפית במודלים של תולעים אלו כראיה לוויסות של מסלולים ותעדוף תרכובות בשלב מוקדם, ולא כהוכחה ישירה ליעילות אנטי-סרטנית בגידולים של יונקים.

מודלים של גידולי תאי נבט מבחינים בין נתיבים השונים מבחינה מכניסטית להמשכיות של proliferacy. אללים של glp-1 עם תפקוד מוגבר (gain-of-function) שומרים על מיטוזה תלויה ב-GLP-1/Notch בתאי הנבט, בעוד שמוטציות ב-pro-1 חושפות מנגנון נישה-חבוי (latent-niche) שאינו אוטונומי לתא, שבו ליגנדים של DSL מתאי מעטפת פרוקסימליים תומכים בשימור מיטוטי חריג. לעומת זאת, אובדן תפקוד (loss-of-function) של gld-1 גורם להיווצרות גידולי תאי נבט בעיקר באמצעות הפרעה בדיפרנציאציה מייוטית ולא באמצעות הפעלה ישירה של נתיב ה-Notch. מודלים אלה מספקים, לפיכך, מערכות משלימות לחקר שימור תאי גזע, כשל בדיפרנציאציה ויצירת גידולים התלויה במיקרו-סביבה30,33,34.

יישומים אחרים הקשורים לסרטן כוללים סריקות של לטאליות סינתטית של LIN-35/Rb, בדיקות אפופטוזה תלויות CEP-1/p53, ומחקרים של שילובי אותות של AMPK ו-PI3K6,44. יש להתייחס ליישומים המבוססים על כימוסנסציה (chemosensation) בנפרד ממודלים של גידולים וסריקת תרופות. במחקרים אלו, C. elegans נחשפים למטבוליטים נדיפים או שפשפוניים הקשורים לסרטן, ותגובות התנהגותיות נמדדות כסימנים אבחנתיים פוטנציאליים. בדיקות כאלה אינן ממדלות צמיחת גידולים או פעילות של תרופות נגד סרטן, והן דורשות תיקוף אנליטי וקלני לפני יישום אבחנתי54,55.

פרספקטיבות
C. elegans הוא בעל ערך רב ביותר כאשר השאלה הביולוגית תלויה במנגנונים תאי-אוטונומיים או סיסטמיים שמורים שניתן לקשור לפנוטיפ כמותי. מגבלותיו — כולל היעדרe חסינות אדפטיבית, כלי דם, אפיתל ספציפי לאיברים וגרורות טבעיות — מונעות מידול ישיר של אינטראקציות רבות בין גידול לסטרומה ובין גידול למערכת החיסון. הזדמנויות עתידיות כוללות עריכה אנדוגנית של וריאנטים המופקים מחולים, הפרעה ספציפית לרקמה, דימיג' בעל תכולה גבוהה (high-content imaging), פנוטיפינג אוטומטי, ושילוב של גנטיקה של תולעים עם גנומיקה של סרטן בבני אדם. יש להתייחס לממצאים כראיות המייצרות מנגנונים או מטרות, ויש לתקף אותם בתאי יונקים או במודלים של חולייתנים לפני הסקת מסקנות טרנסלציוניות.

מסקנות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

C. elegans הוא מערכת in vivo משלימה וניתנת למניפולציה גנטית לצורך ניתוח של מסלולי סיגנלינג שמרניים הקשורים לסרטן ותיעדוף של מטרות או תרכובות מועמדות. היישומים המידעיים ביותר שלו מקשרים באופן מפורש בין שינויים בסרטן בבני אדם לבין אורתולוג שמרני בתולעת, הקשר רקמתי ופנוטיפים כמותיים, כגון התרבות יתר של תאי נבט, היווצרות multivulva, פעילות של רפורטר או תגובה לתרופות. הפרשנות חייבת להבחין בין גידולי נבט אמיתיים לבין תוצרי קריאה של מסלולים התפתחותיים, ועליה להיתמך על ידי אללים עצמאיים, הצלה גנטית (genetic rescue) או אפיסטזיס, ובקרות לרעילות ולעיכוב התפתחותי. למרות שהתולעת אינה יכולה לדגמן חסינות אדפטיבית, כלי דם, ארכיטקטורה ספציפית לאיבר או גרורות, היא נותרת בעלת ערך ליצירה מהירה של היפותזות ואישור ראשוני של מסלולים. עבודה עתידית המשלבת עריכה אנדוגנית של וריאנטים המופקים מחולים, הפרעה ספציפית לרקמה, פנוטיפינג אוטומטי ואישוש בין-מיני תחזק את התרגום לביולוגיה של סרטן ביונקים.

דיאגרמה של מסלולים גנטיים ב-C. elegans; RAS/MAPK, Notch, Wnt; מנגנוני התמיינות תאים.
איור 1. מדדי סיגנלינג שמורים הקשורים לסרטן ב-C. elegans. (A) אנטומיה של טיפוס בר (Wild-type) ומדדים נורמליים. (B) גדילה יתר דמוית גידול בקו הנבט עם מדדי אזור מיטוטי מורחב. (C) פנוטיפ רב-וולבה (Muv) כמדד כמותי למסלול. (D) סיגנלינג LIN-3/LET-23 RAS/MAPK בתאי מקור של הוולבה. (E) סיגנלינג GLP-1/Notch בנישת תאי הגזע של קו הנבט ומנגנוני גידול בנישה חבויה. (F) ענפי Wnt ב-C. elegans מחולקים לענף הקנוני התלוי ב-BAR-1 ולמסלול האסימטריה של Wnt/β-catenin. פנוטיפים של Muv ושל Wnt הם מדדים רגישים למסלול או להתפתחות, ולא מודלים ישירים של גידולים ממאירים. אנא לחצו כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של איור זה.

ניתוח מסלולי סרטן; תרשים של מתודולוגיה ניסיונית בתיקוף ויישום מסלולים.
איור 2. מסגרת מעשית המקשרת בין מודלים של C. elegans למנגנונים ויישומים הקשורים לסרטן. זרימת העבודה מקשרת בין בחירת מסלול, הגדרת נגע מולקולרי, בחירת קריאת המודל (readout), תיקוף כמותי ויישום הקשור לסרטן. שימושים מייצגים כוללים בדיקות דיכוי Muv של RAS/MAPK, מחקרי מנגנוני גידולי תאי נבט, בקרות מסלול ורעילות, ויישומים מבוססי כימו-חישה שאינם גידוליים. אנא לחצו כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של איור זה.

זןגנוטיפנגע מולקולרי / ענף במסלולפנוטיפ / מדד (readout)נקודת קצה כמותית מומלצתשימוש מייצג / זהירות
CB1026lin-1(e1026) IV.תפוקה שעתוקית של RAS/MAPK; מדכא LIN-1 מסוג ETS במורד MPK-1/ERKMultivulva (Muv)% בעלי חיים מסוג Muv; בליטות וולבליות אקטופיות/בעל חייםתפוקת RAS/MAPK וולבאלית; קריאה של מסלול התפתחותי, לא גידול ממאיר
CB1275lin-1(e1275) IV.התוצר השעתוקי של RAS/MAPKמוב*% תנועה; בליטות/בעל חייםאלל lin-1 חלופי לאישור פלט המסלול
MT3516lin-1(e1275) cha-1(p1152) IV.תפוקת RAS/MAPK ברקע גנטי מורכבנראה כי הטקסט שהזנת ("Muv") אינו מכיל תוכן מדעי או הוראות לתרגום. אנא ספק את הטקסט באנגלית שברצונך לתרגם לעברית.% Muv; תזמון התפתחותי; פריוןיש להשתמש בזהירות, אלא אם כן הרקע של cha-1 רלוונטי לבדיקה
MT301lin-31(n301) II.תוצר שעתוק תלוי-RAS/MAPK; גורם forkhead מסוג LIN-31נראה שהטקסט שהזנת ("Muv") אינו מכיל תוכן מדעי או הוראות לתרגום. אנא ספק את הטקסט באנגלית שברצונך לתרגם לעברית.מיקום סמני גורל של תאי VPC ב-Muv;%קריאת גורל תאי הפרוסה במורד המסלול של LET-60/MPK-1
MT1001lin-1(e1777) IV.התוצר השקיפי של מסלול ה-RAS/MAPKנראה כי הטקסט שהזנת ("Muv") אינו מכיל תוכן לתרגום או שהוא שגוי. אנא ספק את הטקסט המדעי באנגלית שברצונך לתרגם לעברית.% תנועתיות; בליטות לבעל חייםתוקן מפלט הקשור ל-Wnt לפלט הקשור ל-RAS/MAPK
MT2124let-60(n1046gf) IV.העמקת תפקוד של LET-60/RAS; סיגנלינג RAS/MAPK היפראקטיבינראה שהטקסט שהזנת ("Muv") אינו כולל תוכן לתרגום או שהקלדת אותו בטעות. אנא ספק את הטקסט המדעי באנגלית שברצונך לתרגם לעברית.% Muv; בליטות/חיה; דיכוי תגובת מינוןבדיקות סריקה של תרכובות אנטי-סרטניות ובדיקות דיכוי מסלול עבור RAS/MAPK
MT4698let-60(n1700gf) IV.gain of function של LET-60/RAS; איתות RAS/MAPK היפראקטיבינראה שהטקסט שהזנת ("Muv") אינו מכיל תוכן מדעי או משפט שלם לתרגום. אנא ספק את הטקסט המלא באנגלית כדי שאוכל לתרגמו לעברית אקדמית ומקצועית עבור JoVE.% Muv; בליטות/חיה; דיכוי תגובת מינוןזן לסריקת תרכובות עבור מסלול RAS/MAPK; בשימוש עם MT2124 במחקרי דיכוי מסלולים ב-EAPB02303
MT309lin-15B&lin-15A(n309) X.מולטי-וולבה סינתטית; בקרה שלילית של השראת הוולבה/רקע המאפשר RASנראה שהטקסט שהזנת אינו מכיל תוכן באנגלית לתרגום. אנא ספק את הטקסט המדעי שברצונך לתרגם לעברית.% תנועתיות; חדירות; בליטות/בעל חייםרקע Muv רגיש או עם מודיפיקטור; אינו מודל גידול ישיר
ZM10942lin-15B&lin-15A(n765) X; hpIs774; hpEx4292.רקע Muv סינתטי בהקשר של רפורטר/טרנסגןקריאת Muv / רפורטר% Muv; לוקליזציה/עוצמה של חלבון הדגלהשתמש כאשר קריאת הדגימה של הגן המדווח (reporter) היא חיונית; תאר את הגן המועבר/הגן המדווח בטקסט
JK590glp-1(q35)/eT1 III; him-5(e1490)/eT1 V.קיטוע של הקצה ה-C של קולטן GLP-1/Notch; Muv חצי-דומיננטי עם פנוטיפ GlpMuv sterile / Glp% Muv; סטריליות; ספירת צאצאיםמדד התפתחותי של הנרתיק/קו הנבט התלוי ב-Notch; אין לקבץ עם מודלים של גידולי קו נבט דיסטליים
GC833glp-1(ar202) III.הגברת תפקוד של GLP-1/Notchגידול בקו הנבטאורך אזור המיטוזה; תאי +pH3; שטח הגונדה; פוריותמיטוזה תלוית-Notch מתמשכת במודל של גידול בתאי נבט
BS3164unc-32(e189) glp-1(ar202) III.העמקת תפקוד (gain of function) של GLP-1/Notch עם סמן/רקע של unc-32גידול במערכת הנבטאורך אזור המיטוזה; תאי +pH3; שטח הגונדה; פוריותרקע אלטרנטיבי ל-glp-1(ar202); ציינו את הסמן/רקע בשיטות
GC565pro-1(na48)/mIn1 [dpy-10(e128) mIs14] II.מודל הנישה החבויה; כניסה מאוחרת למיוזה מאפשרת חשיפה לליגנד DSL פרוקסימלי והפעלה של GLP-1/Notchגידול תאי נבט פרוקסימלייםתאי מיטוזה פרוקסימליים; תאי +pH3; אזור הגונד; פוריותהיווצרות גידול שאינה אוטונומית לתא; הבחנה מרכיב תפקוד מוגבר (gain of function) ישיר של glp-1
IT540gap-3(kp1) I; puf-8(zh17) unc-4(e120)/mnC1 [dpy-10(e128) unc-52(e444)] II.רקע מעורב של תהליכי בידול וקישור ל-RNA, בשילוב עם מסלולי RAS/MAPKMuv וגידול גרמלינלי% Muv; אורך אזור המיטוזה; תאי +pH3; פריוןיש להשתמש אך ורק כאשר קיים רציונל מכניסטי ברור, כיוון שפנוטיפים נובעים ממסלולים מעורבים
XA774gld-1(q485)/gna-2(qa705) unc-55(e1170) I.כשל בדיפרנציאציה של GLD/מיוטית; לא הפעלה ישירה של Notchגידול במבטא הגרמלינאריאורך אזור המיטוזה; תאים pH3+; שטח הגונדה; פוריותמודל של כשל בדיפרנציאציה מיוטית; אין לסמן כ-Notch
JK3025gld-1(q485) I/hT2 [bli-4(e937) let-?(q782) qIs48] (I;III).כשל בבידול GLD/מיוטיגידול בקו הנבטאורך אזור המיטוזה; תאי +pH3; פוריותמודל גידול gld-1 מאוזן; הבחנה מגידולי glp-1/Notch
JK1466gld-1(q485)/dpy-5(e61) unc-13(e51) I.כשל בדיפרנציאציה מיוטית/GLDגידול במערכת הנבטאורך אזור המיטוזה; תאים pH3+; פוריותרקע gld-1 חלופי; הבחנה מגידולים המונעים על ידי Notch
JK4299gld-2(q497) gld-1(q361) I/hT2 [bli-4(e937) let-?(q782) qIs48] (I;III).מסלול הכניסה למיוזה/הבידול של GLD-1/GLD-2גידול גרמליניאורך אזור המיטוזה; תאי +pH3; פוריותמודל גידול של מסלול GLD; לא הפעלת Notch ישירה
JK4832gld-1(q485) gld-2(q497) lst-1(ok814) sygl-1(tm5040) I/hT2 [bli-4(e937) let-?(q782) qIs48] (I;III).מסלול ה-GLD בתוספת רקע על ווסת תאי גזעגידול בקו הנבטאורך אזור המיטוזה; תאים pH3+; פריון; ביטוי סמניםמודל גורל של GLD/תאי גזע בעל מורכבות מכניסטית; הגדרת השערה מדויקת
JK2879gld-2(q497) gld-1(q485)/hT2 [bli-4(e937) let-?(q782) qIs48] (I;III).נתיב הבידול של GLD-1/GLD-2גידול בקו הנבטאורך אזור המיטוזה; תאים pH3+; פוריותמודל גידול חלופי מאוזן של נתיב ה-GLD
BS3156unc-13(e51) gld-1(q485)/hT2 [dpy-18(h662)] I; +/hT2 [bli-4(e937)] III.כשל בדפרנציאציה מייוטית מסוג GLD עם מוטציות סמן/רקעגידול בקו הנבטאורך אזור המיטוזה; תאים pH3+; פוריותיש להשתמש כאשר רקע הגנוטיפ מצוין בבירור
JK5760lst-1(ok814) sygl-1(q828) gld-2(q497) gld-1(q361) I/hT2 [bli-4(e937) let-?(q782) qIs48] (I;III).מסלול GLD בתוספת רקע של מטרה של Notch/ווסת תאי גזעגידול תורשתי (Germline tumor)אורך אזור המיטוזה; תאי +pH3; פוריות; ביטוי של סממני תאי גזעמודל מורכב של תאי גזע של קו הנבט/דיפרנציאציה; אין למזג תחת "Notch"

טבלה 1: זנים מוטנטיים נבחרים של C. elegans ומדדי קריאה מומלצים למסלולים הקשורים לסרטן. נומנקלטורת הזנים והגנוטיפים מבוססת על רישומי CGC/WormBase; הערות למסלולים ופנוטיפים15,16,25,30,33,34,44,45,51,52,53. טבלה זו מסכמת זנים נבחרים המדגימים מדדי קריאה ספציפיים למסלולים הנפוצים במחקרים על C. elegans הקשורים לסרטן.

קיצורים: CGC, Caenorhabditis Genetics Center; DSL, ליגנד ממשפחת Delta/Serrate/LAG-2; EGFR, קולטן לגורם גדילה אפידרמלי; ERK, קינאז מופעל על ידי אות חיצוני; gf, תפקוד מוגבר (gain-of-function); GLD, פגם בהתפתחות תאי נבט; Glp, פנוטיפ של פגם בשגשוג תאי נבט; lf, אובדן תפקוד (loss-of-function); MAPK, קינאז מפרוטאין המופעל על ידי מיטוגן; MEK, MAPK/ERK kinase; Muv, ריבוי וולבה (multivulva); pH3+, חיובי ל-phospho-histone H3; RAS, סרקומה של חולדה; RNAi, השתקת RNA; VPC, תא מקדים של הוולבה; Wnt, wingless/integrated. ETS, E26 transformation-specific.

גילויים

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

המחברים מצהירים כי אין להם ניגודי אינטרסים.

תודות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

אנו מודים ל-Caenorhabditis Genetics Center, הממומן על ידי ה-NIH Office of Research Infrastructure Programs (P40 OD010440), על אספקת מידע ומשאבים בנוגע לזנים. עבודה זו נתמכה על ידי Zhejiang Provincial Health Bureau Science Foundation (מס' 2025KY1608).

מקורות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Bray F, et al. Global cancer statistics 2022: GLOBOCAN estimates of incidence and mortality worldwide for 36 cancers in 185 countries. CA Cancer J Clin. 2024;74(3):229-263.
  2. Soerjomataram I, Bray F. Planning for tomorrow: global cancer incidence and the role of prevention 2020-2070. Nat Rev Clin Oncol. 2021;18(10):663-672.
  3. Corsi AK, Wightman B, Chalfie M. A transparent window into biology: a primer on Caenorhabditis elegans. Genetics. 2015;200(2):387-407.
  4. Kim W, Underwood RS, Greenwald I, Shaye DD. OrthoList 2: a new comparative genomic analysis of human and Caenorhabditis elegans genes. Genetics. 2018;210(2):445-461.
  5. Lai CH, Chou CY, Ch'ang LY, Liu CS, Lin WC. Identification of novel human genes evolutionarily conserved in Caenorhabditis elegans by comparative proteomics. Genome Res. 2000;10(5):703-713.
  6. Cerón J. Caenorhabditis elegans for research on cancer hallmarks. Dis Model Mech. 2023;16(6):dmm050079.
  7. Lemmon MA, Schlessinger J. Cell signaling by receptor tyrosine kinases. Cell. 2010;141(7):1117-1134.
  8. Karnoub AE, Weinberg RA. Ras oncogenes: split personalities. Nat Rev Mol Cell Biol. 2008;9(7):517-531.
  9. Udell CM, Rajakulendran T, Sicheri F, Therrien M. Mechanistic principles of RAF kinase signaling. Cell Mol Life Sci. 2011;68(4):553-565.
  10. Yoon S, Seger R. The extracellular signal-regulated kinase: multiple substrates regulate diverse cellular functions. Growth Factors. 2006;24(1):21-44.
  11. Malumbres M, Barbacid M. RAS oncogenes: the first 30 years. Nat Rev Cancer. 2003;3(6):459-465.
  12. Sundaram MV. Canonical RTK-Ras-ERK signaling and related alternative pathways. WormBook. 2013:1-38.
  13. Hill RJ, Sternberg PW. The gene lin-3 encodes an inductive signal for vulval development in C. elegans. Nature. 1992;358(6386):470-476.
  14. Aroian RV, Koga M, Mendel JE, Ohshima Y, Sternberg PW. The let-23 gene necessary for Caenorhabditis elegans vulval induction encodes a tyrosine kinase of the EGF receptor subfamily. Nature. 1990;348(6303):693-699.
  15. Shin H, Reiner DJ. The signaling network controlling C. elegans vulval cell fate patterning. J Dev Biol. 2018;6(4):30.
  16. Han M, Aroian RV, Sternberg PW. The let-60 locus controls the switch between vulval and nonvulval cell fates in Caenorhabditis elegans. Genetics. 1990;126(4):899-913.
  17. Abdus-Saboor I, et al. Notch and Ras promote sequential steps of excretory tube development in C. elegans. Development. 2011;138(16):3545-3555.
  18. Chang C, Newman AP, Sternberg PW. Reciprocal EGF signaling back to the uterus from the induced C. elegans vulva coordinates morphogenesis of epithelia. Curr Biol. 1999;9(5):237-246.
  19. Chamberlin HM, Sternberg PW. The lin-3/let-23 pathway mediates inductive signaling during male spicule development in Caenorhabditis elegans. Development. 1994;120(10):2713-2721.
  20. DeVore DL, Horvitz HR, Stern MJ. An FGF receptor signaling pathway is required for the normal cell migrations of the sex myoblasts in C. elegans hermaphrodites. Cell. 1995;83(4):611-620.
  21. Szewczyk NJ, Jacobson LA. Activated EGL-15 FGF receptor promotes protein degradation in muscles of Caenorhabditis elegans. EMBO J. 2003;22(19):5058-5067.
  22. Bülow HE, Boulin T, Hobert O. Differential functions of the C. elegans FGF receptor in axon outgrowth and maintenance of axon position. Neuron. 2004;42(3):367-374.
  23. Huang P, Stern MJ. FGF signaling functions in the hypodermis to regulate fluid balance in C. elegans. Development. 2004;131(11):2595-2604.
  24. Kopan R, Ilagan MXG. The canonical Notch signaling pathway: unfolding the activation mechanism. Cell. 2009;137(2):216-233.
  25. Greenwald I, Kovall R. Notch signaling: genetics and structure. WormBook. 2013:1-28.
  26. Kimble J, Seidel H. C. elegans germline stem cells and their niche. StemBook. 2013.
  27. Chen J, et al. GLP-1 Notch-LAG-1 CSL control of the germline stem cell fate is mediated by transcriptional targets lst-1 and sygl-1. PLoS Genet. 2020;16(3):e1008650.
  28. Kimble J, Crittenden SL. Germline proliferation and its control. WormBook. 2005:1-14.
  29. Austin J, Kimble J. glp-1 is required in the germ line for regulation of the decision between mitosis and meiosis in C. elegans. Cell. 1987;51(4):589-599.
  30. Berry LW, Westlund B, Schedl T. Germ-line tumor formation caused by activation of glp-1, a Caenorhabditis elegans member of the Notch family of receptors. Development. 1997;124(4):925-936.
  31. Seydoux G, Greenwald I. Cell autonomy of lin-12 function in a cell fate decision in C. elegans. Cell. 1989;57(7):1237-1245.
  32. Mango SE, Maine EM, Kimble J. Carboxy-terminal truncation activates glp-1 protein to specify vulval fates in Caenorhabditis elegans. Nature. 1991;352(6338):811-815.
  33. McGovern M, Voutev R, Maciejowski J, Corsi AK, Hubbard EJA. A latent niche mechanism for tumor initiation. Proc Natl Acad Sci U S A. 2009;106(28):11617-11622.
  34. Francis R, Barton MK, Kimble J, Schedl T. gld-1, a tumor suppressor gene required for oocyte development in Caenorhabditis elegans. Genetics. 1995;139(2):579-606.
  35. Angers S, Moon RT. Proximal events in Wnt signal transduction. Nat Rev Mol Cell Biol. 2009;10(7):468-477.
  36. Clevers H, Nusse R. Wnt/β-catenin signaling and disease. Cell. 2012;149(6):1192-1205.
  37. Sawa H, Korswagen HC. Wnt signaling in C. elegans. WormBook. 2013:1-30.
  38. Jackson BM, Eisenmann DM. β-catenin-dependent Wnt signaling in C. elegans. Cold Spring Harb Perspect Biol. 2012;4(8):a007948.
  39. Liu J, Phillips BT, Amaya MF, Kimble J, Xu W. The C. elegans SYS-1 protein is a bona fide beta-catenin. Dev Cell. 2008;14(5):751-761.
  40. Green JL, Kuntz SG, Sternberg PW. Ror receptor tyrosine kinases: orphans no more. Trends Cell Biol. 2008;18(11):536-544.
  41. Ackley BD. Wnt-signaling and planar cell polarity genes regulate axon guidance along the anteroposterior axis in C. elegans. Dev Neurobiol. 2014;74(8):781-796.
  42. Eisenmann DM, Maloof JN, Simske JS, Kenyon C, Kim SK. The beta-catenin homolog BAR-1 and LET-60 Ras coordinately regulate the Hox gene lin-39 during Caenorhabditis elegans vulval development. Development. 1998;125(18):3667-3680.
  43. Park FD, Tenlen JR, Priess JR. C. elegans MOM-5/frizzled functions in MOM-2/Wnt-independent cell polarity and is localized asymmetrically prior to cell division. Curr Biol. 2004;14(24):2252-2258.
  44. Jones M, Norman M, Tiet AM, Lee J, Lee MH. C. elegans germline as three distinct tumor models. Biology (Basel). 2024;13(6):425.
  45. Berset T, Hoier EF, Battu G, Canevascini S, Hajnal A. Notch inhibition of RAS signaling through MAP kinase phosphatase LIP-1 during C. elegans vulval development. Science. 2001;291(5506):1055-1058.
  46. Mello CC, Kramer JM, Stinchcomb D, Ambros V. Efficient gene transfer in C. elegans: extrachromosomal maintenance and integration of transforming sequences. EMBO J. 1991;10(12):3959-3970.
  47. Praitis V, Casey E, Collar D, Austin J. Creation of low-copy integrated transgenic lines in Caenorhabditis elegans. Genetics. 2001;157(3):1217-1226.
  48. Chen X, Feng X, Guang S. Targeted genome engineering in Caenorhabditis elegans. Cell Biosci. 2016;6:60.
  49. Dickinson DJ, Goldstein B. CRISPR-based methods for Caenorhabditis elegans genome engineering. Genetics. 2016;202(3):885-901.
  50. Ahringer J. Reverse genetics. WormBook. 2006:1-43.
  51. Bae YK, et al. An in vivo C. elegans model system for screening EGFR-inhibiting anticancer drugs. PLoS One. 2012;7(9):e42441.
  52. Medina PM, Ponce JM, Cruz CA. Revealing the anticancer potential of candidate drugs in vivo using Caenorhabditis elegans mutant strains. Transl Oncol. 2021;14(1):100940.
  53. Makhoul P, et al. Uncovering the molecular pathways implicated in the anticancer activity of the imidazoquinoxaline derivative EAPB02303 using a Caenorhabditis elegans model. Int J Mol Sci. 2024;25(14):7785.
  54. Hirotsu T, et al. A highly accurate inclusive cancer screening test using Caenorhabditis elegans scent detection. PLoS One. 2015;10(3):e0118699.
  55. Lanza E, et al. C. elegans-based chemosensation strategy for the early detection of cancer metabolites in urine samples. Sci Rep. 2021;11:17133.

הדפסות חוזרות והרשאות

בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה

בקש הרשאה

תגיות

Cancer ResearchCaenorhabditis eleganscancer modelcancer signalgermline tumorMulti vulval

מאמרים קשורים