11 במרץ 2016
תפקוד המודינמי בשלב מוקדם הוא קריטי להתפתחות מחלת כליות. עם זאת, מתודולוגיות הזיהוי מוגבלות. ההתקדמות האחרונה בסונוגרפיה מספקת אפשרות לא פולשנית ומדויקת לגילוי מוקדם של פגיעה בכליות. מחקר זה מתאר מתודולוגיה סונוגרפית שלב אחר שלב לאיתור תפקוד לקוי של הכליות באמצעות מודל נפרוטוקסיות של חולדות הנגרמות על ידי תרופות.
המטרה הכוללת של הליך זה היא לספק מתודולוגיה סונוגרפית שלב אחר שלב לאיתור תפקוד לקוי של הכליות באמצעות מודל עכברוש נפרוטוקסיות המושרה על ידי תרופות. זה מושג על ידי מיקום ראשון של בדיקת האולטרסאונד באמצעות מערכת המסילות ובידוד אבי העורקים. לאחר מכן, זווית הבדיקה מותאמת כדי לקבל תצוגת כליות מלאה במרכז המסך ותמונת מצב B מאוחסנת בקצב הפריימים הגבוה ביותר האפשרי.
לאחר מכן, נפתח החלון האקוסטי של דופלר צבעוני כדי לבודד את עורק הכליה ווריד הכליה. לבסוף, הגל הפועם או קו החיווי הצהוב PW משמש להערכת זרימה בעורק הכליה הימני ו-sinistore משמש לאיסוף הנתונים בקצב הפריימים הגבוה ביותר האפשרי. בסופו של דבר, הדמיית אולטרסאונד ברזולוציה גבוהה משמשת להצגת שינויים המודינמיים בכליה בעקבות פגיעה כלייתית חריפה הנגרמת על ידי ציספלטין.
שיטה זו יכולה לענות על שאלות מפתח בתחום ניטור תפקודי הכליות, כגון שינויים המודינמיים הנגרמים כתוצאה מפגיעה בכליות. למרות ששיטה זו יכולה לספק תובנה לגבי המודינמיקה של הכליות, ניתן ליישם אותה גם במערכות אחרות, כגון מודלים של עכברים. ביום 0, לאחר הרדמת בעלי החיים על פי פרוטוקול הטקסט, ומריחת משחת עיניים, השתמשו בלהב מס' 40 ובקרם אפילציה כדי להסיר את השיער מהחזה.
תוך כדי ניטור הסימנים החיוניים של החיה, הגדר מערכת אולטרסאונד MS250 ברזולוציה גבוהה עם תדר מרכזי של 21 מגה-הרץ המחוברת ליציאה הפעילה, והאפליקציה מוגדרת מראש על הכליה. הנח את החיה המורדמת במצב שכיבה על הרציף והשתמש במערכת המסילה, מקם את קו האמצע של בדיקת האולטרסאונד על החיה בזווית של 90 מעלות לקו הפרסטרנלי השמאלי המבודד את אבי העורקים. ממצב זה, החלק את הפלטפורמה עם החיה כך שהגשושית תתיישר עם עורק הכליה השמאלי או הימני.
בעזרת המיקרומניפולטורים, צפה בעורק הכליה. לאחר מכן כוונן את זווית הבדיקה על ידי הטיה קלה לאורך ציר ה-Y של הגשושית כדי לקבל תצוגת כליות מלאה במרכז המסך. לאחר הדמיית אגן הכליה ועורק הכליה, אחסן את התמונות בקצב הפריימים הגבוה ביותר המותר עם הבדיקה המשמשת.
לאחר מכן, לחץ על מקש הדופלר הצבעוני במקלדת כדי להפעיל את החלון האקוסטי של דופלר צבעוני. ודא שעומק המיקוד נמצא במרכז הכליה. השתמש ב-sinistore כדי להקליט את הנתונים בקצב הפריימים הגבוה ביותר האפשרי.
כדי לצלם תמונות בתצוגת גל פועם או PW, לחץ על מקש PW כדי להעלות קו חיווי צהוב על המסך. באמצעות מקש הזווית PW, מקם את הקו הצהוב בעורק הכליה בזווית המקבילה לכיווניות הזרימה דרך הכלי, וודא שזווית הדופלר נמוכה מ-60 מעלות. במצב זה, החלון האקוסטי מתפצל לחלקים עליונים ותחתונים.
השתמש ב-sinistore כדי ללכוד את התמונה של צורות הגל המצביעות על מהירות הזרימה העורקית בשיא הסיסטולה והדיאסטולה. לאחר ההדמיה, הניחו את החיה מתחת למנורת חימום באזור התאוששות נקי בשכיבה על עצם החזה. עקוב באופן רציף אחר הסימנים החיוניים של בעל החיים עד להחלמה מלאה מההרדמה לפני החזרתו למתקן הדיור.
עשרים וארבע שעות לאחר ביצוע הדמיה בסיסית, יש לתת זריקה בין-צפקית של 10 מיליגרם לק"ג ציספלטין במנה אחת לבעלי החיים המטופלים. יש לתת תמיסת מלח רגילה לחיות הביקורת. בהתאם ללוח הזמנים המוצג כאן, ותוך כדי ניטור הסימנים החיוניים של בעל החיים, בצע הדמיית אולטרסאונד כפי שהודגם קודם לכן בסרטון.
בצע ניתוח נתונים על פי ההנחיות בפרוטוקול הטקסט. התמונות שהוצגו במחקר זה צולמו על ידי מפעיל יחיד ונתוני ההדמיה נותחו על ידי חוקר יחיד. התוצאות הראו כי לבעלי חיים שטופלו בציספלטין יש קריאטינין בסרום שנע בין 0.5 ל-2.1 ביום השישי.
הרמה הנורמלית של קריאטינין נמוכה מ-1.1. תמונות האולטרסאונד מציעות רגישות גבוהה לנתונים היסטולוגיים המוצגים במחקרים הבאים. ביום השישי, ההיסטולוגיה הדגימה דפוסים עקביים של פגיעות ביניים חריפות של צינוריות בכליות שטופלו בציספלטין בהשוואה לבעלי חיים רגילים שטופלו במי מלח.
באמצעות הדמיית אולטרסאונד ברזולוציה גבוהה למדידת שינויים המודינמיים בכליות, לא היה שינוי במורפולוגיה בבעלי חיים ללא טיפול בציספלטין בין היום 0 ל-6, בעוד שהמורפולוגיה של פולסוס פרווס זוהתה בבעלי חיים שטופלו בציספלטין ביום 6. RI מייצג אינדקס התנגדות ו-PI מייצג מדד פועם. הגבולות העליונים עבור RI ו-PI תקינים הם 0.7 ו-1.15, בהתאמה, בחולדות.
מדידת מדדים אלה להערכת השינויים ההמודינמיים בכליות, הדגימה עלייה משמעותית בשני בעלי החיים שטופלו בציספלטין ביום השישי. בזמן ניסיון הליך זה, חשוב לוודא שלבעל החיים יש סימנים חיוניים תקינים בהרדמה. לאחר פיתוחה, טכניקה זו סללה את הדרך לחוקרים בתחום השינויים ההמודינמיים באולטרסאונד כלייתי בעקבות פגיעה כלייתית חריפה.
לאחר צפייה בסרטון זה, אתה אמור להבין היטב כיצד לדמיין כליה באמצעות מודל של חיה קטנה של פגיעה כלייתית חריפה.
מחקר זה מציג מתודולוגיה סונוגרפית מפורטת לגילוי תפקוד כליות לקוי במודל של נפרוטוקסיות מושרית תרופתית בחולדות. באמצעות דימוי אולטרסאונד ברזולוציה גבוהה, שיטה זו שואפת לספק תובנות לגבי שינויים המודינמיים בעקבות פגיעה כלייתית חריפה.
זיהוי מוקדם של הפרעה המודינמית כלייתית המושרית על ידי תרופות נותן מענה לפער קריטי בהערכת בטיחות פרה-קלינית, שבה סמנים ביולוגיים מסורתיים כמו קראטינין בנסיוב מפגרים אחרי השינויים הפיזיולוגיים. גישה סונוגרפית זו מאפשרת הפחתת סיכונים מתוך הבנת המנגנון על ידי זיהוי שינויים וסקולריים לפני גרימת נזק מבני, ובכך תומכת בביטחון חיזוי בתהליך אופטימיזציה של תרכובות מובילות. עבור מו"פ בביופרמה, שילוב של ניטור המודינמי לא פולשני משפר את הרצף התרגומי ומפחית את שיעורי הנשירה בשלבים מאוחרים עקב נפרוטוקסיות בלתי צפויה.
שיטה זו משתלבת ברצף שבין שלב הגילוי לשלב הפרה-קליני, ובאופן ספציפי משפרת את זיהוי המולקולות המובילות (lead identification) ואת הערכת הבטיחות הפרה-קלינית, על ידי אספקת סממנים המודינמיים מוקדמים המכווינים את בחירת התרכובות ואת קידומן.