הקלטה במרחב מוגבל תנודות בהיפוקמפוס מתנהגים באופן עכברים

שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות מפתח בתחום מדעי המוח כגון כיצד פעילויות רשת עצבית מאורגנות בקנה מידה זמני ומרחבי עדין. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא ששימוש בבדיקות סיליקון ליניאריות ניתוח נתוני זרם מאפשר שחזור של תנודות מקומיות שלא ניתן לזהות בקלות בהקלטות פוטנציאליות שדה קונבנציונליות. כדי להתחיל בהליך זה, יש לעקר את מכשירי הניתוח בעזרת מעקר חרוזים חם, ולאחר מכן לנגב את כל משטחי העבודה באתנול של 70%.

לאחר מכן, הרכיבו את החיה המורדמת במסגרת סטריאוטקסית על ידי החדרת מוטות אוזניים בעדינות לתעלת האוזן. לאחר שראש העכבר מיוצב על ידי מוטות האוזניים, הניחו פיה מעל החוטם לאספקה רציפה של איזופלורן, ולאחר מכן מרחו משחה על העיניים כדי למנוע התייבשות. לאחר מכן, הניחו כרית חימום מתחת לעכבר והזריקו בופרנורפין תת עורי כדי להבטיח שיכוך כאבים לאחר הניתוח.

לאחר מכן, יש לגלח את ראשו ולחטא את העור באתנול 70%. בעזרת מספריים כירורגיים, בצע חתך בעור לאורך קו האמצע של הגולגולת ופתח את העור באמצעות מלחציים כירורגיים. יישר את ראש החיה בעזרת כלי יישור סטריאוטקסי כדי ליישר ברגמה ולמבדה.

צריך להיות פחות מ-50 מיקרומטר של קיזוז גובה בין ברגמה ללמבדה. יתר על כן, יישר את הראש לאורך הציר המדיאלי-צדדי על ידי מדידת העומק במרחק מוגדר מברגמה בצד שמאל וימין כאחד. כוונן את הראש אם הוא מוטה.

נקו את הראש עם מי חמצן 3% וייבשו אותו עם מגבוני כותנה סטריליים. קבע את מיקום הגולגולת ביחס לברגמה באמצעות אטלס סטריאוטקסי מתאים. בעזרת ראש מקדחה של 0.9 מילימטר, קדחו שני חורי ברגים בעצם מעל המוח הקטן כדי למקם את הקרקע וברגי הייחוס.

בנוסף, קדחו חור אחד עד שלושה חורים לעיגון ברגים לייצוב השתל. מיקום ברגי העיגון יהיה תלוי במיקום הגולגולת. הכנס את הברגים לעצם באמצעות מברג מתאים.

היזהר לא לחדור למוח. כעת, בצע את הגולגולת על ידי דילול איטי של הגולגולת עם המקדחה באזור מלבני סביב צד ההשתלה. הרטיבו את העצם לעתים קרובות עם מאגר פוספט מעוקר.

חודרים בעדינות את הגולגולת הדקה שנותרה בעזרת מחט הזרקה בגודל 27 ומסירים אותה בעזרת פינצטה. לאחר מכן, חודרים בזהירות את הדורה מאטר בעזרת מחט הזרקה בגודל 27. בעזרת זוג פינצטה, צרו וו קטן על ידי כיפוף קצה המחט והשתמשו בוו זה כדי להסיר את הדורה.

לאחר מכן, מרחו מאגר פוספט כדי למנוע ממשטח המוח להתייבש. לאחר מכן, התקן את כלי החדרת האלקטרודה על מחזיק סטריאוטקסי ואפס את הגשושית על ברגמה. העבר את הגשושית לקואורדינטות הסטריאוטקסיות מעל הגולגולת ולחדור לאט לאט לפני השטח של המוח.

ודא שפירי הבדיקה אינם מתכופפים והימנע מהשתלה דרך כלי הדם. לאחר מכן, הורד לאט את הגשושית עד כ-200 מיקרומטר מעל העומק הרצוי. לאחר מכן, כסו את הגולגולת והשוקיים של בדיקת הסיליקון בווזלין מעוקר להגנה.

לאחר מכן, יש למרוח מלט דנטלי כדי לקבע את בסיס הגשושית לבורג העיגון בגולגולת. מיד לאחר מריחת המלט, העבר לאט את הגשושית לעומק היעד. קדם את 200 המיקרומטרים האחרונים לאחר מריחת המלט כדי להפחית את התנועה הרוחבית של הגשושית ולהבטיח נזק מינימלי לרקמות באזור המטרה.

לאחר שהמלט נרפא, שחרר את הגשושית מכלי ההחדרה על ידי המסת השעווה בעזרת צריבה לאחר מכן, שחררו את לוח המחברים מהתקן ההחדרה ומקמו אותו במקום מתאים על הגולגולת באמצעות מהדק תנין. קבע את לוח המחבר לגולגולת באמצעות מלט דנטלי.

במקרה של השתלת בדיקה בהיפוקמפוס, הנח את לוח המחבר על העצם הקודקודית הנגדית. לאחר מכן, הלחמו את חוטי ההארקה והייחוס של לוח המחברים לחוטים המחוברים לשני הברגים מעל המוח הקטן. חתוך את כיסוי המגן לגובה הנכון והנח אותו מעל בדיקת הסיליקון.

לאחר מכן, תקן את המכסה של לוח המחבר והגולגולת באמצעות מלט דנטלי, תוך הימנעות מהעור סביב הגולגולת החשופה. לאחר הניתוח, יש למרוח טיפול משכך כאבים מתאים על העכבר למשך יומיים לפחות. בית יחיד לעכבר כדי למנוע נזק לשתל.

הקלטות מבדיקות סיליקון מושתלות כרוניות המכוונות לאזור CA1 מוצגות כאן. ניתוח צפיפות המקור הנוכחי מיושם לאורך השוקיים הבודדות של הגשושית. בדוגמה זו, אירוע אדוות גל חד יחיד מוביל לשקיעת זרם בולטת בשכבה רדיאטום של CA1 ובדוגמה השנייה, נרשמו שני אתרים נפרדים בשכבת תאי הגרגיר של הבליטה המשוננת.

פס הגמא הגבוה בודד על ידי הפעלת מסנן מעבר פס של 60 עד 80 הרץ, וחשף התפרצויות גמא מקומיות באחד משני אתרי ההקלטה הממוקמים בשכבת תאי הגרגיר. שים לב שניתן לזהות את פעילות תנודת הגמא המקומית רק לאחר המרה של האותות המוקלטים ל-CSD. CSD, אך לא אותות LFP, מזהים את תקופות האסינכרוניות של הפאזה והמשרעת בין שני אתרי ההקלטה.

קטע זה מציג תקופה קצרה של פעילות גמא מסונכרנת. העקבות כאן ממחישות את הפרש הפאזה ואת מדד הפרש המשרעת עבור עקבות LFP ו-CSD. לאחר צפייה בסרטון זה, אתה אמור להבין היטב כיצד להשתיל בדיקות סיליקון בהיפוקמפוס.