Rapida determinazione della soglia termica nocicettivo in ratti diabetici

L'obiettivo generale di questa procedura è determinare la soglia di nocicezione termica nei ratti di controllo e in quelli diabetici. Il primo passo consiste nel posizionare un animale sul piatto riscaldante incrementale e sul misuratore di analgesia. Successivamente, la temperatura del piatto riscaldante viene aumentata gradualmente mentre la superficie si riscalda.

L'animale viene osservato per verificare l'assenza di comportamenti offensivi. Quando viene osservato questo comportamento, il riscaldamento viene interrotto e la temperatura della piastra in quel momento viene registrata. Alla fine, si possono ottenere risultati che mostrano variazioni della soglia nocicettiva termica in animali trattati con analgesici o affetti da neuropatia diabetica dolorosa.

Il vantaggio principale di questa tecnica rispetto ai metodi esistenti come la piastra riscaldata, che normalmente viene impostata a una temperatura super soglia, è che il nostro metodo aumenta gradualmente la temperatura della piastra, consentendo la determinazione accurata della soglia nocicettiva termica. La soglia nocicettiva termica, o TNT, viene determinata mediante l'analgesimetro a piastra calda incrementale, o IH pam. I componenti di questo sistema includono una camera di osservazione in plexiglass, una piastra di alluminio con controllo termico, un tastierino per la programmazione e un interruttore a pedale per il controllo remoto dell'apparecchiatura.

I dati vengono raccolti utilizzando un software personalizzato su un computer vicino. In alternativa, è possibile stampare copie cartacee tramite una porta seriale situata sull'apparecchiatura. Posizionare uno specchio dietro la camera in plexiglass per aumentare la visibilità del comportamento dell'animale.

Successivamente, impostare le velocità di riscaldamento desiderate, nonché le temperature iniziale di attesa e finale di interruzione. Premere l'interruttore a pedale per avviare e arrestare il sistema. Verificare che siano registrate sia la temperatura iniziale di attesa che quella finale di interruzione, insieme al tempo necessario per raggiungere la temperatura finale.

Se lo si desidera, l'operatore può provare il sistema su se stesso. Ritirare la mano dalla piastra metallica nel momento in cui si avverte il dolore. La percezione non deve causare danni alla pelle, né provocare alcun disagio successivo.

Iniziare l'acclimatazione la sera precedente posizionando le gabbie sul banco dove si svolgerà il test. Due ore prima del test, accendere il piano IH per abituare gli animali al rumore di fondo dell'apparecchio.

A questo punto, il sistema può essere configurato e testato come visto in precedenza. Dopo che gli animali si sono abituati all'ambiente, posizionare delicatamente un ratto nella camera in plexiglass sopra la superficie calda. Consentire all'animale di esplorare la camera per alcuni minuti.

Iniziare il test. Una volta che l'animale appare a proprio agio per iniziare la prova, premere l'interruttore a pedale per avviare il riscaldamento della piastra. Osservare il comportamento dell'animale mentre la piastra si riscalda.

Generalmente, le persone nuove rispetto a questo metodo incontreranno difficoltà poiché l'identificazione di un comportamento offensivo di massa non è sempre immediata e richiede pratica. Nessun comportamento offensivo è caratterizzato dal leccamento, scuotimento o sollevamento di uno dei pori posteriori. È utile notare che il primo comportamento osservato può essere il leccamento dei quattro pori, seguito da una reazione da parte dei pori posteriori.

Quando si osserva un comportamento particolarmente offensivo, premere l'interruttore a pedale per terminare la prova ed eliminare l'animale tornando alla sua gabbia di mantenimento. La temperatura che provoca questo comportamento è considerata la soglia termica della nocicezione o TNT dell'animale di controllo. L'unità viene pulita e il test viene ripetuto per il prossimo animale osservato.

Di seguito sono riportati i valori di soglia alla nocicezione termica di ratti e topi adulti giovani normali. I dati mostrano che la soglia alla nocicezione termica (TNT) dei ratti non ha presentato variazioni durante un periodo di quattro giorni di test. Analogamente, la TNT dei topi è risultata costante tra età diverse.

In questo esempio, i valori di TN TS di ratti diabetici STZ adulti giovani sono stati misurati ripetutamente. Si può osservare una diminuzione costante delle soglie nocicettive termiche a partire da due settimane dopo l'induzione del diabete. In questo caso, la IH pam è stata utilizzata per verificare le proprietà antinocicettive acute del composto analgesico.

A, il composto ha prodotto un lieve effetto analgesico negli animali di controllo rispetto a quelli che hanno ricevuto i veicoli. Tuttavia, l'analgesia è stata più pronunciata negli animali diabetici che hanno ricevuto il composto rispetto ai controlli trattati con veicolo. Durante il tentativo di questa procedura, è molto importante ricordare di monitorare continuamente il comportamento dell'animale, in particolare gli eventi che si verificano vicino al cept T dell'animale.