4 luglio 2013
Questo video mostra il paradigma residente-intruso nei ratti. Questo test è un metodo standardizzato per misurare l'aggressività offensiva, comportamento difensivo e la violenza in un ambiente semi-naturale. L'uso del paradigma per gli esperimenti di stress sociale è spiegato pure.
L'obiettivo generale di questa procedura è quello di indurre in modo affidabile un comportamento aggressivo offensivo nei ratti maschi. In un contesto di laboratorio, il primo passo consiste nell'allevare un ratto maschio adulto insieme a una femmina sterilizzata per un periodo di almeno una settimana. Nel giorno del test, si posiziona l'attrezzatura per la registrazione video al fine di riprendere l'interazione sociale.
Successivamente, la femmina compagna viene rimossa dalla gabbia quando pronta, un ratto maschio sconosciuto viene introdotto nella gabbia del maschio residente e i due possono interagire per 10 minuti. In definitiva, la procedura mira a stabilire e mantenere un territorio da parte del maschio residente, che è disposto a difendere contro gli intrusi. Il punto di forza del metodo è che consente l'analisi del comportamento sociale naturale in un contesto di laboratorio, non solo nel maschio residente, ma anche nell'intruso.
Questo metodo può aiutare a rispondere a domande fondamentali sulla neurobiologia e neurofarmacologia o sull'aggressività funzionale di origine biologica, nonché sulla violenza come patologia dell'aggressività. La tecnica può essere utilizzata per studiare le conseguenze dello stress sociale acuto o cronico nel soggetto intruso. Si noti che il paradigma residente-intruso non è esente da preoccupazioni etiche.
Un grave sofferenza può verificarsi nel maschio intruso. La sofferenza animale deve sempre essere bilanciata con gli obiettivi scientifici principali dell'esperimento. L'aggressività offensiva è un comportamento altamente attivo e, pertanto, è richiesto uno spazio sufficiente per la sua piena espressione.
Per risultati ottimali, utilizzare gabbie residenti con almeno mezzo metro quadrato di superficie per favorire lo sviluppo della territorialità e ridurre l'isolamento sociale. Alloggiare ciascun animale residente con una femmina per almeno una settimana prima dell'inizio dell'esperimento. Utilizzare femmine compagne integre dal punto di vista ormonale ma sterili.
Questo garantirà che la femmina sia recettiva senza rimanere incinta e sviluppare aggressività materna. Poiché la territorialità si basa fortemente sulla presenza di segnali olfattivi, non cambiare la lettiera della gabbia prima o durante il test. L'animale intruso utilizzato negli studi seguenti deve appartenere a un ceppo non aggressivo e avere un peso corporeo leggermente inferiore rispetto al maschio residente.
Sebbene l'aggressività possa manifestarsi in qualsiasi momento della giornata, è preferibile effettuare il test durante la fase scura, quando il ratto è più attivo. Un'ora prima del test, rimuovere la femmina compagna dalla gabbia del residente. Impostare una videocamera sensibile alla luce per registrare il comportamento del residente, da analizzare in seguito.
Per iniziare il test, introdurre un intruso maschio sconosciuto nella gabbia domestica del residente. Osservare l'interazione comportamentale per 10 minuti. Vengono registrati comportamenti offensivi così come comportamenti sociali.
Qui viene mostrato il comportamento di impennamento e il comportamento di avvicinamento. Questo è il minaccia laterale. Questo è l'attacco in presa, e questa è una rincorsa mostrata.
Qui si verifica un periodo di esplorazione sociale seguito da un attacco di blocco. Avviene un certo annusamento anogenitale. Ora un ratto si muove verso l'altro.
Questo è il comportamento di abbassamento. Ecco una postura eretta. Questo comportamento è la minaccia laterale.
Osservare i peli rizzati o la piloerezione nel maschio residente, seguiti dalla postura eretta e da una certa esplorazione asociale. Rimuovere il maschio intruso dalla gabbia al termine del test e riunire il maschio residente con la sua femmina compagna. I dati vengono analizzati riproducendo il video e codificando i comportamenti mediante un software specializzato per misurare i comportamenti aggressivi.
Introdurre un intruso come mostrato in precedenza e determinare la latenza dell'attacco da parte del maschio residente. Una latenza molto breve è un primo indicatore di aggressività. Anche i morsi diretti a parti del corpo vulnerabili come la gola, l'addome e le zampe sono segni di morsi aggressivi.
Indirizzare il muso verso l'avversario indica un comportamento difensivo dell'animale. Nel caso di una ferita grave in parti del corpo vulnerabili, l'esperimento deve essere interrotto. A seconda della gravità.
Questo può essere considerato un endpoint di tipo umanitario oppure l'intruso dovrebbe ricevere le opportune cure mediche. Inoltre, un comportamento violento si manifesta quando un maschio residente attacca un maschio intruso anestetizzato. Il test con un maschio anestetizzato può essere interrotto non appena il residente effettua l'attacco.
Il comportamento aggressivo del soggetto residente può essere testato anche in un ambiente nuovo. L'assenza di un cambiamento nell'aggressività rispetto alla gabbia di casa è un segno di violenza. Per iniziare, selezionare un maschio residente ben addestrato, altamente aggressivo ma non violento, e seguire il protocollo illustrato in precedenza.
Osservare l'intruso per rilevare vari comportamenti. Dopo un periodo di esplorazione non sociale, un individuo si allontana dall'altro, mostra un comportamento sottomesso e fugge. Qui viene mostrata una postura eretta difensiva.
Dopo il test, restituire l'intruso alla sua gabbia di origine e calcolare il punteggio totale di difesa, che corrisponde alla somma del tempo trascorso in fuga, atteggiamento difensivo, postura eretta, sottomissione e congelamento. Lo stress sociale viene indotto seguendo lo stesso protocollo per lo stress sociale cronico.
Mantenere l'intruso nella gabbia del residente, ma separato dal residente mediante una schermatura perforata. Questa figura mostra la distribuzione di frequenza del punteggio di aggressione offensiva in una linea di laboratorio, ma originariamente selvatica di tipo selvatico e in una comune linea di ratti di laboratorio nel ceppo di tipo selvatico, circa un terzo degli animali è estremamente aggressivo, mentre il fenotipo altamente aggressivo è assente nei ratti Wistar. Questo esempio mostra la distribuzione delle diverse categorie comportamentali nel paradigma residente-intruso utilizzando il ceppo WTG come residenti e i ratti Wistar come intrusi.
Qui, il paradigma del residente intruso viene utilizzato in combinazione con la farmacologia comportamentale. L'agonista selettivo del recettore della serotonina 1A, Alnesprone, induce una riduzione dipendente dalla dose dell'aggressività offensiva, accompagnata da un aumento dipendente dalla dose dell'esplorazione sociale. In alcuni individui, l'aggressività offensiva può evolvere in una forma violenta di aggressione.
La forma violenta di aggressività è caratterizzata da attacchi molto brevi, da una latenza dell'attacco ridotta verso un maschio anestetizzato o una femmina, da ferite gravi e da un rapporto minaccia-attacco molto basso. Quando si utilizza questa procedura per lo stress sociale, è importante impiegare una linea di ratti aggressivi come residenti.
È necessario selezionare individui che mostrano aggressività offensiva per almeno il 30% del tempo del test. Dopo aver visto questo video, si dovrebbe essere in grado di identificare correttamente tutti i comportamenti esibiti sia dal residente che dall'intruso. Inoltre, si dovrebbe essere in grado di riconoscere la violenza.
Ricordare che il lavoro con il paradigma dell'intruso residente non è esente da preoccupazioni etiche. La sofferenza dell'intruso maschio dovrebbe essere sempre chiaramente correlata agli obiettivi principali dell'esperimento.
Questo video illustra il paradigma residente-intruso nei ratti, un metodo standardizzato per valutare il comportamento aggressivo in un ambiente semi-naturale. La procedura ha lo scopo di indurre aggressività offensiva e analizzare le interazioni sociali tra ratti residenti e ratti intrusi.
Il paradigma residente-intruso fornisce un saggio comportamentale standardizzato per valutare l'aggressività offensiva e le risposte allo stress sociale in modelli rodentici, supportando la validazione di bersagli nella scoperta di farmaci neuropsichiatrici. Quantificando comportamenti etologicamente rilevanti come la latenza dell'attacco, gli attacchi in presa e le posture difensive, il metodo consente una riduzione del rischio meccanicistica di composti che modulano vie associate all'aggressività. La sua utilità nella valutazione di modelli di stress sociale acuto e cronico migliora la rilevanza traslazionale per disturbi caratterizzati da impulsività, violenza e alterata regolazione dello stress.
Il paradigma residente-intruso si inserisce nel continuum della scoperta, dal test dell'ipotesi sul bersaglio alla valutazione dell'efficacia preclinica, in particolare per composti attivi sul sistema nervoso centrale mirati all'aggressività, all'impulsività e ai disturbi correlati allo stress.