7 febbraio 2015
Il presente articolo descrive le considerazioni metodologiche per diverse valutazioni non invasive della funzione vascolare e della morfologia che sono comunemente utilizzate nella ricerca medica per valutare diversi stadi dell'aterosclerosi.
L'obiettivo generale del seguente esperimento è quello di esaminare l'artrosclerosi subclinica in diversi territori vascolari. In primo luogo, l'imaging laser doppler con ionoforesi di farmaci vasodilatatori viene utilizzato per esaminare la funzione endoteliale microvascolare. Successivamente, la dilatazione flusso-mediata e la glicerina, la dilatazione mediata da tritrati vengono utilizzate per esaminare la funzione endoteliale dei grandi vasi.
Infine, lo spessore del mezzo intimo carotideo viene analizzato per verificare la presenza di cambiamenti morfologici avanzati. I risultati mostrano cambiamenti nella funzione endoteliale microvascolare e dei grandi vasi in risposta alla stimolazione. Inoltre, viene caratterizzata anche la parete del vaso dell'arteria carotide.
Questi metodi possono aiutare a rispondere a domande chiave nel campo della fisiologia cardiovascolare, come determinare l'impatto degli interventi sulla salute vascolare in diverse popolazioni cliniche. Innanzitutto, prepara l'imager laser doppler. Lasciate scaldare per mezz'ora o più.
Calibrare la macchina e preparare il software all'uso. Inoltre, preparare le soluzioni nella camera in perspex. Quindi portare il partecipante allo studio al sedile dell'imager, il partecipante leggermente reclinato e su un cuscino solido con un gomito piegato a 90 gradi e l'avambraccio comodamente posizionato su un tappetino nero.
Assicurati di fissare l'avambraccio al cuscino in modo che rimanga in posizione sul tappetino. Quindi, prepara le camere in perspex. Innanzitutto, collegare le loro spine al controller per ionoforesi.
Quindi collegare la camera contenente acetilcolina alla connessione anodica e collegare la camera contenente nitro di sodio perside alla connessione del catetere. Quindi collegare le due camere all'aspetto a voler dell'avambraccio fissato utilizzando cuscinetti biadesivi. Inoltre, coprire le camere con vetrini coprioggetti da 32 millimetri.
Ora nel software dello scanner, apri la finestra di configurazione dello scanner situata in alto a sinistra nella schermata principale. Selezionare la scheda di scansione dell'immagine e determinare l'area da scansionare facendo clic sul pulsante del segno nell'angolo in basso a destra della finestra. Posizionare con cura la testina dello scanner in modo che esegua una scansione accurata dell'area di interesse, se necessario.
Modificare manualmente la regione di interesse inserendo le dimensioni dell'area di scansione nella sezione dell'area di scansione vicino alla parte superiore della finestra. Assicurarsi che la regione di interesse includa il diametro di ciascuna delle camere di ionoforesi e sia sufficientemente grande da limitare la variabilità del flusso sanguigno cutaneo. La scansione può ora essere avviata dopo il completamento della scansione.
Utilizzare il software di analisi delle immagini LDI. Per aprire il file di dati. Seleziona l'opzione di revisione dell'immagine nella finestra principale.
Ora segna una regione di interesse attorno ai diametri esterni di ciascuna camera. Quindi fare clic sull'icona delle statistiche e verrà visualizzata una colonna contenente le unità di perfusione mediana per ciascuna camera da ciascuna delle 12 scansioni di ciascuna camera. Prendere nota dell'unità di perfusione basale e dell'unità di perfusione più alta.
Inizia con la configurazione dell'ecografo Doppler e del software di analisi delle immagini vascolari per l'imaging dal vivo. Quindi introduci il partecipante alla configurazione e chiedigli di rilassarsi sulla sedia. Chiedi al partecipante al test di rimuovere eventuali gioielli dal polso e di utilizzare un cuscino per riposare comodamente il braccio.
Quindi metti un bracciale per la pressione sanguigna intorno al polso del partecipante. Deve essere tenuto il più fermo possibile. Quindi, fissare l'array di trasduttori lineari dalla macchina a un morsetto stereotassico.
Quindi serrare il morsetto sul trasduttore. Quindi, accedi al menu sull'ecografo lì. Impostare la frequenza di scansione su cinque megahertz e impostare la profondità su circa 3,5 centimetri.
Ora utilizzando il trasduttore, localizzare l'arteria brachiale con la scansione longitudinale. Di solito è da due a 10 centimetri sopra la fossa antecubitale. Quindi impostare il guadagno per una luminosità simmetrica nella parete vicina e lontana del vaso.
Il color doppler mostrerà il sangue arterioso che pulsa attraverso l'arteria, distinguendolo da qualsiasi vena. Imposta la vista dell'arteria brachiale in modo che sia chiaramente visibile e orizzontale sullo schermo. Dovrebbe apparire come due linee parallele continue separate da un'area libera tra le linee nel software.
Utilizzare il cursore per contrassegnare la regione di interesse e il software via registrerà automaticamente. La regolazione del diametro del vaso dell'area può essere effettuata con i pulsanti X e Y nella schermata principale. Ora, fai clic sul pulsante di avvio e immagina l'arteria per due minuti.
Quindi premere gonfiare per registrare per cinque minuti mentre si gonfia il bracciale della pressione sanguigna a pressioni sistoliche. Il flusso sanguigno alla mano deve essere occluso dal bracciale dopo che il bracciale si è sgonfiato. Continuare la registrazione per tre minuti.
A questo punto viene indotta l'iperemia, che stimola la vasodilatazione mediata dall'ossido nitrico. Quindi fornire un riposo di 10 minuti. Quindi, riposizionare l'arteria brachiale ed effettuare una nuova registrazione di base del diametro dell'arteria per due minuti.
Ora, chiedi al partecipante di ingerire per via sublinguale una compressa di glicerolo tritrato da 500 grammi e continua a registrare per cinque minuti. Dopo cinque minuti, la compressa deve essere rimossa e il partecipante deve essere monitorato per gli effetti avversi. Quando si analizzano i dati, assicurarsi di controllare la regione della linea di base per gli artefatti, escludere eventuali artefatti prima di calcolare la media dei valori rimanenti per ottenere un diametro della linea di base.
Inoltre, durante l'analisi della dilatazione mediata dal flusso, ispezionare la regione di dilatazione del picco rilevata automaticamente. Se viene identificato in modo errato, selezionare manualmente una regione più ristretta, che contiene il picco. Per questa misurazione, chiedi al partecipante di sdraiarsi comodamente su un letto con un cuscino.
Quindi impostare le derivazioni ECG per un tracciato di base. Attaccali a entrambe le braccia e alla caviglia sinistra. Successivamente, vai al menu e imposta la frequenza di scansione a 10 megahertz e la profondità di registrazione a tre o quattro centimetri.
Quindi regolare il guadagno come prima. Ora, chiedi al partecipante di ruotare leggermente la testa a sinistra e di utilizzare il trasduttore a matrice lineare per scansionare l'arteria carotide destra. Cerca un punto di biforcazione nel vaso in quanto ciò mostra l'arteria carotide comune che si biforca nelle arterie carotidi interne ed esterne.
Scansiona l'arteria carotide lungo tutte le sue sezioni su un piano longitudinale. Identificare l'arteria interna ed esterna comune se si vede una placca. Salva le immagini ora.
Scatta almeno tre immagini di una sezione priva di placca e a circa un centimetro dal bulbo carotideo. Chiedi al partecipante di ruotare la testa dall'altra parte e ripetere la procedura per documentare l'arteria carotide sinistra. Dopo. Analizza le immagini offline utilizzando il pacchetto software di misurazione delle arterie mentre raccogli i valori per CIMT e diametro del lume.
Tieni presente che non è possibile effettuare letture accurate dalla parete vicina, quindi analizza solo le letture dalla parete più lontana. L'imaging laser Doppler con ionoforesi è stato utilizzato su una donna sana di mezza età senza malattie cardiovascolari. C'è stato un marcato aumento del flusso sanguigno mediano con entrambi gli stimoli.
Il picco del flusso sanguigno ha raggiunto 455 unità di perfusione per l'acetilcolina e 446 unità di perfusione per il nitro prossido di sodio. La dilatazione mediata dal flusso e la dilatazione mediata dal glicerolo tritrato sono state entrambe studiate in una giovane donna sana priva di malattie cardiovascolari. Il test di dilatazione flusso-mediata ha aumentato il diametro dell'arteria di circa il 10% e la dilatazione mediata dal glicerolo tritrato ha aumentato il diametro dell'arteria di circa il 30%Lo spessore del mezzo intimo carotideo è stato esaminato nell'arteria carotide sinistra di un individuo sano.
Il valore CIMT per la parete di fondo era di 0,83 millimetri e il diametro del lume era di 7,71 millimetri. Le stesse misure sull'arteria carotide destra erano 0,87 millimetri e 7,8 millimetri dopo il loro sviluppo. Queste tecniche hanno aperto la strada ai ricercatori in fisiologia cardiovascolare per comprendere i meccanismi delle malattie cardiovascolari in diverse popolazioni cliniche.
Questo articolo tratta metodi non invasivi per valutare la funzione e la morfologia vascolare, in particolare nel contesto della ricerca sull'aterosclerosi.
Le valutazioni vascolari non invasive mediante imaging a Doppler laser, dilatazione mediata dal flusso e ultrasuoni carotidei forniscono endpoint quantitativi essenziali per il rilevamento precoce della disfunzione endoteliale e del rimodellamento vascolare. Queste metodologie consentono ai gruppi di ricerca traslazionale di indagare lo stato di salute vascolare, ridurre i rischi associati a ipotesi meccanicistiche e sostenere una maggiore affidabilità predittiva nella validazione di bersagli cardiovascolari. L'integrazione di queste tecniche nei percorsi di scoperta e preclinici migliora il processo decisionale del portafoglio, permettendo una fenotipizzazione vascolare solida e riproducibile.
Queste valutazioni non invasive si integrano dalla fase iniziale della scoperta fino alla ricerca preclinica, garantendo continuità nel fenotipaggio vascolare e nella riduzione dei rischi meccanicistici.