マウスモデルにおける反復性脳震盪性頭部外傷のモデル化

まず、衝撃先端とプローブ先端を衝撃装置に取り付けます。

次に、麻酔をかけたマウスを定位固定フレームに固定します。

衝撃先端を前頭間縫合糸とラムドイド縫合糸の間に配置し、耳の間の架空の水平線に垂直に合わせます。

定位固定コントロールパネルのXチャンネルとYチャンネルをゼロにして、チップを切り替えるときに中心がシフトするのを防ぎます。

プローブ先端を衝撃中心に手動で移動し、衝撃部位に触れるように下げます。接触センサーをマウスの尻尾にクリップします。

Z チャネルをゼロにし、X と Y が 0 になり、Z がマイナス 4 になるまでインパクト チップの位置を変更します。

特定の速度で衝撃を適用します。

無呼吸(衝撃からマウスの最初の呼吸までの時間)を測定して、損傷の重症度を判断します。

マウスの回復を待ちます。

指定した間隔で衝撃を繰り返します。繰り返しの衝撃は脳の血管を破裂させ、微小出血を引き起こし、星状細胞の活性化を引き起こし、軽度の人間のような脳震盪を模倣します。

カスタムメイドのシリコーンゴムでコーティングされた金属チップを電磁定位固定装置に取り付けます。コーティングされた先端の平らな底が衝撃装置プローブの先端の表面と平行になるように注意してください。次に、麻酔をかけたマウスをうつ伏せの姿勢で温熱パッドの上に置き、つま先を挟んでも反応がないことを確認します。

次に、ヘアトリマーを使用して頭を完全に剃り、動物の目に軟膏を塗ります。動物の準備ができたら、コントロールボックスで衝撃装置の速度を毎秒4メートル、滞留時間を240ミリ秒にプリセットします。体温を摂氏39度近くに保つために、動物の体の下に柔らかい加熱パッドを置きます。

次に、鈍い端のイヤーバーを使用して、マウスを腹臥位の定位フレームに取り付けます。Zドライバーを使用して、マウスの頭の近くでインパクトチップを下げます。xドライバーとyドライバーをターゲット座標の中間、矢状縫合糸の上に移動して、直径9ミリメートルのフラットインパクトチップを調整します。

インパクトチップの片方の端が、2つの耳の間に引かれた架空の水平線と垂直に平行になるように注意します。衝撃の深さを正しく設定するには、まずデジタル定位固定制御パネルのxチャンネルとyチャンネルをゼロに設定し、チップを切り替えた後に衝撃中心がずれないことを確認します。

次に、追加のプローブチップをマウスの脳の衝撃部位に移動します。xドライバーとyドライバーを手動で調整して、プローブチップを衝撃領域の中心に移動し、接触センサーをテールにクリップします。Zドライバーを使用して、プローブの先端が衝撃部位の表面に触れるまでインパクターを下に動かし、定位固定制御パネルのZチャネルをゼロに設定します。

次に、x ドライバーと y ドライバーを使用して、x ドライバーと y ドライバーがゼロになるまで、インパクト チップを手動でインパクト エリアに戻します。次に、z ドライバーを示すコントロール パネルが負の 4.00 になるまで、z ドライブを下に移動します。そして、コントロールボックスのリトラクトスイッチを動かしてアクチュエーターをリトラクトします。

次に、コントロールボックスの衝撃スイッチをクリックして、変形深さ4ミリメートルの衝撃をトリガーし、タイマーを使用して衝撃からマウスの最初の呼吸までの時間を測定します。次に、動物を暖かいパッドに移し、完全に回復するまで監視します。